共刺激分子CD28和B7在关节炎发病中的作用
共刺激分子CD28和B7在关节炎发病中的作用
邓安梅 仲人前 陈孙孝 施笑梅 孔宪涛
摘 要 目的：探讨B7:CD28共刺激信号在关节炎发病机制中的作用。方法：经牛Ⅱ型胶原(BⅡC)诱导SD大鼠建立关节炎动物模型；分析抗B7-1和抗B7-2抗体对关节炎大鼠临床症状和特异性免疫反应的影响。结果：抗B7-1抗体可阻止SD大鼠发生胶原诱发性关节炎，降低大鼠对BⅡC的体液免疫反应。结论：B7:CD28共刺激信号在诱发T细胞介导的自身免疫疾病中起作用，抗B7-1抗体具有潜在的治疗作用。
关键词：共刺激信号；B7；抗原，CD28；关节炎
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类风湿性关节炎(RA)是一种慢性系统性炎症疾病,其发病机制尚不清楚。近年来的研究表明[1,2]，自身免疫过程参与着疾病的发生、发展，被抗原激活的T细胞在RA的激发和维持中起着重要的作用。T细胞表面抗原CD28是重要的共刺激分子，与其配体B7(B7-1或B7-2)结合可刺激T细胞增殖和IL-2转录。本研究采用牛Ⅱ型胶原(BⅡC) 诱导SD大鼠,建立RA动物模型，分析抗B7-1和B7-2抗体对疾病的影响，探讨B7:CD28共刺激信号在RA发病机制中的作用,从而为RA的治疗提供理论依据。
1 材料和方法
1.1 动物 SD大鼠200只(购自第二军医大学实验动物中心)，雌雄各半，年龄45～50 d，体质量约100 g。兔抗鼠 B7-1和B7-2抗体、兔IgG 2 a抗体(对照)、BⅡC均购自Sigma公司；完全福氏佐剂(FA)的制备：液体石蜡∶羊毛脂=8.5∶1.5，另加卡介苗75 mg/ml，研磨至匀。
, 百拇医药
1.2 关节炎大鼠模型的建立 初次免疫将10 mg BⅡC与5 ml FA研磨均匀后，以100 μl/只的剂量注入大鼠尾部皮内。21 d后用BⅡC以100 μg/只的剂量再次免疫大鼠。动物分4组(n=50)将兔抗鼠 B7-1，B7-2抗体前二者的混合物及对照IgG 2a 分别于初次免疫7 d后开始注射入相应大鼠(隔天，100 μg/只)。分别于25，30，35，40，45 d取10只大鼠进行临床症状、组织病理学和血清免疫学分析。
1.3 临床症状评分 依据大鼠每只爪的症状评分：1分，红；2分，肿；3分，趾关节变形；4分，关节强直。
1.4 血清抗胶原抗体滴度测定 采用眼眶后取血的方法，在不同时间采取大鼠全血。分离血清并冻存于-20℃。经加热灭活后用ELISA法检测抗体滴度。首先用0.1 ml的0.01 mg/ml的BⅡC包被微量滴孔板，4℃过夜；用1% BSA进行封闭；血清经1∶500稀释后加入滴孔，室温孵育2 h；加入HRP标记的兔抗大鼠IgG抗体，室温孵育1 h；加入3,3-二氨联苯胺过氧化物酶反应底物；在酶标仪450 nm处读取光密度(D)值。
, 百拇医药
1.5 组织病理学检查 取鼠爪浸泡于甲醛溶液1周后脱钙，进行石蜡包埋，经过胫骨和跗骨关节中心纵行切片，用苏木精和伊红染色。
1.6 统计学处理 不同组间χ2检验及t检验。
2 结 果
2.1 抗B7-1和抗B7-2抗体对关节炎的影响 本研究以BⅡC和FA混合物免疫SD大鼠，并于3周后进行再次免疫，之后在不同时间可观察到SD大鼠关节炎的发生，并且其发病数随免疫时间的延长而增加(图1)。
图1 BⅡC诱导大鼠关节炎发病率
, 百拇医药 Fig 1 Incidence rate of BⅡC-induced rat arthritis
Control to anti-B7-1:χ2=16.743,P<0.01; Control to anti-B7-2:χ2=0.668,P>0.05;
Control to anti-B7-1+anti-B7-2:χ2=0.736,P>0.05;
Anti-B7-1 to anti-B7-2:χ2=19.613,P<0.01;
Anti-B7-1 to anti-B7-1+anti-B7-2:χ2=1.096,P>0.05
○:Control; ●:Anti-B7-1
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▲:Anti-B7-1+anti-B7-2; ■:Anti-B7-2
为定量评估疾病活动程度，我们对大鼠关节症状程度进行了评分。结果表明，与对照组比较，抗B7-1 抗体显著抑制了关节炎的发生，发病率从80%降至50%(P<0.01)，发病期推迟(发病率25%时间从25 d推迟到35 d)，临床指征下降；而抗B7-2抗体却使病情更为严重，注入抗B7-1 抗体和抗B7-2抗体混合物未明显改变疾病程度和发病期(图2)。
图2 大鼠关节炎临床指征评分
Fig 2 Clinical index of rat arthritis
, 百拇医药
○:Control; ●:Anti-B7-1
▲:Anti-B7-1+anti-B7-2; ■：Anti-B7-2
2.2 抗B7-1和抗B7-2抗体对大鼠体液免疫反应的影响 本研究对BⅡC免疫SD大鼠后不同时段的血清抗BⅡC抗体滴度进行测定。结果表明，对照组大鼠在经BⅡC免疫后，血清中抗BⅡC抗体水平迅速上升，与大鼠的关节炎病程相平行，而且在观察期内维持高水平。经抗B7-1抗体处理的大鼠中的抗BⅡC抗体滴度显著低于相应时段的对照组大鼠(P<0.01),而经抗B7-2抗体处理的大鼠抗BⅡC抗体滴度高于对照组(P<0.05)，经抗B7-1抗体和抗B7-2抗体处理的大鼠抗体滴度与对照组无明显差别(图3)。
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图3 大鼠模型血清抗BⅡC抗体滴度
Fig 3 The levels of anti-BⅡC antibody in rat models
Control:S=0.0975; Anti-B7-1:S=0.0921;
Anti-B7-2:S=0.0958; Anti-B7-1+anti-B7-2:S=0.1032;
Control to anti-B7-1:t=4.291,P<0.01;Control to anti-B7-2:t=1.043,P>0.05;
Anti-B7-1 to anti-B7-2:t=3.829,P<0.01;
Control to anti-B7-1+anti-B7-2:χ2=0.736,P>0.05;
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Anti-B7-1 to anti-B7-2:χ2=19.613,P<0.01;
Anti-B7-1 to anti-B7-1+anti-B7-2:t=3.725,P<0.01
○:Control; ●:Anti-B7-1
▲:Anti-B7-1+anti-B7-2; ■：Anti-B7-2
2.3 组织病理学表现 本研究对经不同抗体处理的BⅡC免疫后大鼠的爪关节进行组织切片分析。经苏木精和伊红染色，在光镜下可见，经IgG2a处理的对照组大鼠的关节出现了明显的单核细胞浸润，多形核细胞聚集，关节膜增厚，软骨及骨损伤，淋巴结炎和骨损伤。经抗B7-1抗体处理的大鼠组织改变和炎症反应明显减轻，而经抗B7-2抗体处理的大鼠炎症加强，组织损害更为严重，经抗B7-1 抗体和抗B7-2抗体混合物处理的大鼠与对照组相似(图4)。
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图4 大鼠模型关节组织切片(×100)
Fig 4 The tissue sections of hindpaws in rat models (HE，×100)
A:Control troup; B:Anti-B7 treating group
3 讨 论
已有研究表明，RA主要由CD4+，MHC Ⅱ类限制性T细胞诱发。T细胞与特异性抗原提呈细胞(APC)相互作用，导致多种细胞因子的产生,作用于关节中的多种细胞，引起B细胞产生免疫球蛋白和类风湿因子，造成免疫性复合物沉淀和补体介导性损伤[3，4]。
APC的共刺激分子作用是T细胞激活、细胞因子分泌和阻止免疫耐受中所必需的。许多研究表明[5～8]，调节B7及其配体之间的作用可进行有效的免疫治疗。如，用可溶性(CTLA-4Ig)可阻断小鼠对外源性胰岛细胞的排斥反应，诱导对移植物的长时期特异性耐受；抑制系统性红斑狼疮小鼠的抗体产生，延长其生存;可抑制(EAE)抗原特异性(LNC)的增殖和IL-2分泌，从而缓解临床症状。相反，B7-1可导致肿瘤细胞被排斥，抑制肿瘤转移，而胰岛细胞B7-1的过度表达可引起自身免疫性胰腺炎。在组织移植和自身免疫病领域，通过阻断共刺激信号以探索治疗途径，引起了广泛的兴趣。
, 百拇医药
本研究用BⅡC皮内注射在SD大鼠建立了关节炎模型。在经BⅡC免疫后，大鼠关节炎病情呈现进行性加重过程，从关节增生到关节软骨及骨损害。病程进展过程中大鼠关节的组织学变化类似于类风湿性关节炎，因而SD大鼠中的胶原诱发性关节炎可作为动物模型，用以研究其基础免疫机制和探讨其免疫治疗途经。本研究对B7-1和B7-2在关节炎病程的作用作了探讨。
在经BⅡC免疫后用IgG 2a处理的对照组SD大鼠出现明显的临床症状(红、肿、趾和踝关节变形);在组织学检查中出现关节结构破坏，软骨及骨损害;血清中含有高滴度的抗BⅡC抗体；也有研究表明[9]，关节炎大鼠血清的被动转移可引起关节软骨及骨损害。这提示抗胶原抗体在关节炎发病机制中的作用。可以设想起初存在于外周循环的抗胶原抗体，与关节中的Ⅱ型胶原发生交叉反应，在局部形成抗原抗体复合物，激活补体成分从而吸引炎症细胞迁徙至关节。在此关节炎动物模型的关节面可观察到炎症细胞。目前尚不能确定人RA的发病机制与抗胶原抗体的关系，只有一小部分RA患者血清中可测到抗胶原抗体。然而从多数RA患者关节组织中分离的B细胞可产生抗胶原抗体，提示抗胶原的自身免疫反应在RA的发病机制中起重要作用[10]。
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在本研究中，加入抗B7-1或抗B7-2抗体对关节炎有不同的作用，抗B7-1抗体改善病情，而抗B7-2抗体加重病情。可能抗B7-1抗体可去除特异性刺激信号，即阻断了发生EAE相关的重要因素。这可能包括特异性Th1细胞的产生，这是EAE中必需的。然而在糖尿病模型中抗B7-2具有保护性，而抗B7-1则加重病情。这提示B7-1→Th1细胞，B7-2→Th2的概念过分简单化。此外，可能存在另外的共刺激途径，或者细胞可能对B7:CD28共刺激不敏感而依赖于其他途径。
参考文献
[1]Park W,Weyand CM,Schmidt D,et al.Co-stimulatory pathways controlling activation and peripheral tolerance of human CD4+ CD28- T cells[J].Eur J Immunol，1997,27(5):1082-1090.
, 百拇医药
[2]邓安梅，陈孙孝，仲人前，等.类风湿性关节炎患者外周血T细胞CD28表达下降及其意义[J].中国免疫学杂志，1998,14(专刊):205-207.
[3]McHugh RS,Ratnoff WD,Gilmartin R,et al.Detection of a soluble form of B7-1 (CD80) in synovial fluid from patients with arthritis using monoclonal antibodies against distinct epitopes of human B7-1[J].Clin Immunol Immunopathol，1998,87(1):50-59.
[4]Deng AM,Zhong RQ,Kong XT.Anti-ENA profile and humoral immune activation[J].J Med Coll PLA,1999，20(1):38-42.
, 百拇医药
[5]Thomas R.Antigen-presenting cells in rheumatoid arthritis[J].Springer Semin Immunopathol,1998,20(1-2):53-72.
[6]Webb LM,Walmsley MJ,Feldmann M.Prevention and amelioration of collagen-induced arthritis by blockade of the CD28 co-stimulatory pathway:requirement for both B7-1 and B7-2[J].Eur J Immunol，1996,26(10):2320-2328.
[7]HirohataS，Hashimoto T.Abnormal T cell responses to bacterial superantigens in Behcet′s disease (BD)[J].Clin Exp Immunol，1998,112(2):317-324.
, 百拇医药
[8]Langdon C,Leith J,Smith F,et al.Oncostatin M stimulates monocyte chemoattractant protein-1-and interleukin-1-induced matrix metalloproteinase-1 production by human synovial fibroblasts in vitro[J].Arthritis Rheum，1997,40(12):2139-2146.
[9]Spack EG.Treatment of autoimmune diseases through manipulation of antigen presentation[J].Crit Rev Immunol，1997,17(5-6):529-536.
[10]Sfikakis PP，Via CS.Expression of CD28,CTLA4,CD80,and CD86 molecules in patients with autoimmune rheumatic diseases:implications for immunotherapy[J].Clin Immunol Immunopathol，1997,83(3):195-198., 百拇医药
邓安梅 仲人前 陈孙孝 施笑梅 孔宪涛
摘 要 目的：探讨B7:CD28共刺激信号在关节炎发病机制中的作用。方法：经牛Ⅱ型胶原(BⅡC)诱导SD大鼠建立关节炎动物模型；分析抗B7-1和抗B7-2抗体对关节炎大鼠临床症状和特异性免疫反应的影响。结果：抗B7-1抗体可阻止SD大鼠发生胶原诱发性关节炎，降低大鼠对BⅡC的体液免疫反应。结论：B7:CD28共刺激信号在诱发T细胞介导的自身免疫疾病中起作用，抗B7-1抗体具有潜在的治疗作用。
关键词：共刺激信号；B7；抗原，CD28；关节炎
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类风湿性关节炎(RA)是一种慢性系统性炎症疾病,其发病机制尚不清楚。近年来的研究表明[1,2]，自身免疫过程参与着疾病的发生、发展，被抗原激活的T细胞在RA的激发和维持中起着重要的作用。T细胞表面抗原CD28是重要的共刺激分子，与其配体B7(B7-1或B7-2)结合可刺激T细胞增殖和IL-2转录。本研究采用牛Ⅱ型胶原(BⅡC) 诱导SD大鼠,建立RA动物模型，分析抗B7-1和B7-2抗体对疾病的影响，探讨B7:CD28共刺激信号在RA发病机制中的作用,从而为RA的治疗提供理论依据。
1 材料和方法
1.1 动物 SD大鼠200只(购自第二军医大学实验动物中心)，雌雄各半，年龄45～50 d，体质量约100 g。兔抗鼠 B7-1和B7-2抗体、兔IgG 2 a抗体(对照)、BⅡC均购自Sigma公司；完全福氏佐剂(FA)的制备：液体石蜡∶羊毛脂=8.5∶1.5，另加卡介苗75 mg/ml，研磨至匀。
, 百拇医药
1.2 关节炎大鼠模型的建立 初次免疫将10 mg BⅡC与5 ml FA研磨均匀后，以100 μl/只的剂量注入大鼠尾部皮内。21 d后用BⅡC以100 μg/只的剂量再次免疫大鼠。动物分4组(n=50)将兔抗鼠 B7-1，B7-2抗体前二者的混合物及对照IgG 2a 分别于初次免疫7 d后开始注射入相应大鼠(隔天，100 μg/只)。分别于25，30，35，40，45 d取10只大鼠进行临床症状、组织病理学和血清免疫学分析。
1.3 临床症状评分 依据大鼠每只爪的症状评分：1分，红；2分，肿；3分，趾关节变形；4分，关节强直。
1.4 血清抗胶原抗体滴度测定 采用眼眶后取血的方法，在不同时间采取大鼠全血。分离血清并冻存于-20℃。经加热灭活后用ELISA法检测抗体滴度。首先用0.1 ml的0.01 mg/ml的BⅡC包被微量滴孔板，4℃过夜；用1% BSA进行封闭；血清经1∶500稀释后加入滴孔，室温孵育2 h；加入HRP标记的兔抗大鼠IgG抗体，室温孵育1 h；加入3,3-二氨联苯胺过氧化物酶反应底物；在酶标仪450 nm处读取光密度(D)值。
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1.5 组织病理学检查 取鼠爪浸泡于甲醛溶液1周后脱钙，进行石蜡包埋，经过胫骨和跗骨关节中心纵行切片，用苏木精和伊红染色。
1.6 统计学处理 不同组间χ2检验及t检验。
2 结 果
2.1 抗B7-1和抗B7-2抗体对关节炎的影响 本研究以BⅡC和FA混合物免疫SD大鼠，并于3周后进行再次免疫，之后在不同时间可观察到SD大鼠关节炎的发生，并且其发病数随免疫时间的延长而增加(图1)。
图1 BⅡC诱导大鼠关节炎发病率
, 百拇医药 Fig 1 Incidence rate of BⅡC-induced rat arthritis
Control to anti-B7-1:χ2=16.743,P<0.01; Control to anti-B7-2:χ2=0.668,P>0.05;
Control to anti-B7-1+anti-B7-2:χ2=0.736,P>0.05;
Anti-B7-1 to anti-B7-2:χ2=19.613,P<0.01;
Anti-B7-1 to anti-B7-1+anti-B7-2:χ2=1.096,P>0.05
○:Control; ●:Anti-B7-1
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▲:Anti-B7-1+anti-B7-2; ■:Anti-B7-2
为定量评估疾病活动程度，我们对大鼠关节症状程度进行了评分。结果表明，与对照组比较，抗B7-1 抗体显著抑制了关节炎的发生，发病率从80%降至50%(P<0.01)，发病期推迟(发病率25%时间从25 d推迟到35 d)，临床指征下降；而抗B7-2抗体却使病情更为严重，注入抗B7-1 抗体和抗B7-2抗体混合物未明显改变疾病程度和发病期(图2)。
图2 大鼠关节炎临床指征评分
Fig 2 Clinical index of rat arthritis
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○:Control; ●:Anti-B7-1
▲:Anti-B7-1+anti-B7-2; ■：Anti-B7-2
2.2 抗B7-1和抗B7-2抗体对大鼠体液免疫反应的影响 本研究对BⅡC免疫SD大鼠后不同时段的血清抗BⅡC抗体滴度进行测定。结果表明，对照组大鼠在经BⅡC免疫后，血清中抗BⅡC抗体水平迅速上升，与大鼠的关节炎病程相平行，而且在观察期内维持高水平。经抗B7-1抗体处理的大鼠中的抗BⅡC抗体滴度显著低于相应时段的对照组大鼠(P<0.01),而经抗B7-2抗体处理的大鼠抗BⅡC抗体滴度高于对照组(P<0.05)，经抗B7-1抗体和抗B7-2抗体处理的大鼠抗体滴度与对照组无明显差别(图3)。
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图3 大鼠模型血清抗BⅡC抗体滴度
Fig 3 The levels of anti-BⅡC antibody in rat models
Control:S=0.0975; Anti-B7-1:S=0.0921;
Anti-B7-2:S=0.0958; Anti-B7-1+anti-B7-2:S=0.1032;
Control to anti-B7-1:t=4.291,P<0.01;Control to anti-B7-2:t=1.043,P>0.05;
Anti-B7-1 to anti-B7-2:t=3.829,P<0.01;
Control to anti-B7-1+anti-B7-2:χ2=0.736,P>0.05;
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Anti-B7-1 to anti-B7-2:χ2=19.613,P<0.01;
Anti-B7-1 to anti-B7-1+anti-B7-2:t=3.725,P<0.01
○:Control; ●:Anti-B7-1
▲:Anti-B7-1+anti-B7-2; ■：Anti-B7-2
2.3 组织病理学表现 本研究对经不同抗体处理的BⅡC免疫后大鼠的爪关节进行组织切片分析。经苏木精和伊红染色，在光镜下可见，经IgG2a处理的对照组大鼠的关节出现了明显的单核细胞浸润，多形核细胞聚集，关节膜增厚，软骨及骨损伤，淋巴结炎和骨损伤。经抗B7-1抗体处理的大鼠组织改变和炎症反应明显减轻，而经抗B7-2抗体处理的大鼠炎症加强，组织损害更为严重，经抗B7-1 抗体和抗B7-2抗体混合物处理的大鼠与对照组相似(图4)。
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图4 大鼠模型关节组织切片(×100)
Fig 4 The tissue sections of hindpaws in rat models (HE，×100)
A:Control troup; B:Anti-B7 treating group
3 讨 论
已有研究表明，RA主要由CD4+，MHC Ⅱ类限制性T细胞诱发。T细胞与特异性抗原提呈细胞(APC)相互作用，导致多种细胞因子的产生,作用于关节中的多种细胞，引起B细胞产生免疫球蛋白和类风湿因子，造成免疫性复合物沉淀和补体介导性损伤[3，4]。
APC的共刺激分子作用是T细胞激活、细胞因子分泌和阻止免疫耐受中所必需的。许多研究表明[5～8]，调节B7及其配体之间的作用可进行有效的免疫治疗。如，用可溶性(CTLA-4Ig)可阻断小鼠对外源性胰岛细胞的排斥反应，诱导对移植物的长时期特异性耐受；抑制系统性红斑狼疮小鼠的抗体产生，延长其生存;可抑制(EAE)抗原特异性(LNC)的增殖和IL-2分泌，从而缓解临床症状。相反，B7-1可导致肿瘤细胞被排斥，抑制肿瘤转移，而胰岛细胞B7-1的过度表达可引起自身免疫性胰腺炎。在组织移植和自身免疫病领域，通过阻断共刺激信号以探索治疗途径，引起了广泛的兴趣。
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本研究用BⅡC皮内注射在SD大鼠建立了关节炎模型。在经BⅡC免疫后，大鼠关节炎病情呈现进行性加重过程，从关节增生到关节软骨及骨损害。病程进展过程中大鼠关节的组织学变化类似于类风湿性关节炎，因而SD大鼠中的胶原诱发性关节炎可作为动物模型，用以研究其基础免疫机制和探讨其免疫治疗途经。本研究对B7-1和B7-2在关节炎病程的作用作了探讨。
在经BⅡC免疫后用IgG 2a处理的对照组SD大鼠出现明显的临床症状(红、肿、趾和踝关节变形);在组织学检查中出现关节结构破坏，软骨及骨损害;血清中含有高滴度的抗BⅡC抗体；也有研究表明[9]，关节炎大鼠血清的被动转移可引起关节软骨及骨损害。这提示抗胶原抗体在关节炎发病机制中的作用。可以设想起初存在于外周循环的抗胶原抗体，与关节中的Ⅱ型胶原发生交叉反应，在局部形成抗原抗体复合物，激活补体成分从而吸引炎症细胞迁徙至关节。在此关节炎动物模型的关节面可观察到炎症细胞。目前尚不能确定人RA的发病机制与抗胶原抗体的关系，只有一小部分RA患者血清中可测到抗胶原抗体。然而从多数RA患者关节组织中分离的B细胞可产生抗胶原抗体，提示抗胶原的自身免疫反应在RA的发病机制中起重要作用[10]。
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在本研究中，加入抗B7-1或抗B7-2抗体对关节炎有不同的作用，抗B7-1抗体改善病情，而抗B7-2抗体加重病情。可能抗B7-1抗体可去除特异性刺激信号，即阻断了发生EAE相关的重要因素。这可能包括特异性Th1细胞的产生，这是EAE中必需的。然而在糖尿病模型中抗B7-2具有保护性，而抗B7-1则加重病情。这提示B7-1→Th1细胞，B7-2→Th2的概念过分简单化。此外，可能存在另外的共刺激途径，或者细胞可能对B7:CD28共刺激不敏感而依赖于其他途径。
参考文献
[1]Park W,Weyand CM,Schmidt D,et al.Co-stimulatory pathways controlling activation and peripheral tolerance of human CD4+ CD28- T cells[J].Eur J Immunol，1997,27(5):1082-1090.
, 百拇医药
[2]邓安梅，陈孙孝，仲人前，等.类风湿性关节炎患者外周血T细胞CD28表达下降及其意义[J].中国免疫学杂志，1998,14(专刊):205-207.
[3]McHugh RS,Ratnoff WD,Gilmartin R,et al.Detection of a soluble form of B7-1 (CD80) in synovial fluid from patients with arthritis using monoclonal antibodies against distinct epitopes of human B7-1[J].Clin Immunol Immunopathol，1998,87(1):50-59.
[4]Deng AM,Zhong RQ,Kong XT.Anti-ENA profile and humoral immune activation[J].J Med Coll PLA,1999，20(1):38-42.
, 百拇医药
[5]Thomas R.Antigen-presenting cells in rheumatoid arthritis[J].Springer Semin Immunopathol,1998,20(1-2):53-72.
[6]Webb LM,Walmsley MJ,Feldmann M.Prevention and amelioration of collagen-induced arthritis by blockade of the CD28 co-stimulatory pathway:requirement for both B7-1 and B7-2[J].Eur J Immunol，1996,26(10):2320-2328.
[7]HirohataS，Hashimoto T.Abnormal T cell responses to bacterial superantigens in Behcet′s disease (BD)[J].Clin Exp Immunol，1998,112(2):317-324.
, 百拇医药
[8]Langdon C,Leith J,Smith F,et al.Oncostatin M stimulates monocyte chemoattractant protein-1-and interleukin-1-induced matrix metalloproteinase-1 production by human synovial fibroblasts in vitro[J].Arthritis Rheum，1997,40(12):2139-2146.
[9]Spack EG.Treatment of autoimmune diseases through manipulation of antigen presentation[J].Crit Rev Immunol，1997,17(5-6):529-536.
[10]Sfikakis PP，Via CS.Expression of CD28,CTLA4,CD80,and CD86 molecules in patients with autoimmune rheumatic diseases:implications for immunotherapy[J].Clin Immunol Immunopathol，1997,83(3):195-198., 百拇医药