窒息对新生鼠红细胞免疫功能和LPO的影响
窒息对新生鼠红细胞免疫功能和LPO的影响
王玲 王为农 陶秦渝 鱼绥和
关键词：窒息；红细胞免疫；脂质过氧化；新生鼠
新生儿窒息时红细胞免疫功能的变化已引起人们注意，但缺氧时红细胞免疫活性降低的机制及意义尚不清楚。有人提出，红细胞免疫功能降低可能与其体内抗氧化能力下降、脂质过氧化损伤有关[1]。我们采用围产期窒息动物模型，观察了窒息后新生大鼠红细胞免疫功能及血清脂质过氧化物(LPO)的变化，旨在了解围产期窒息时，新生儿红细胞免疫状态与脂质过氧化损伤的相关性及其意义。
1材料和方法
1.1材料 SD大鼠由本校动物实验中心提供。酵母试剂由陕西省医院免疫室提供。过氧化物歧化酶(SOD)试剂盒由南京聚力生物医学工程研究所提供。硫代巴比妥酸为上海试剂二厂生产品。
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1.2方法
1.2.1动物模型的制备 将新生10d的SD大鼠(体重18～24g)随机分为正常对照组和窒息组。窒息组置于有机玻璃缺氧房内，按一定比例输入氧气和氮气，以监控仪控制氧浓度在7%、房内温度24℃、缺氧时间持续1h。4h后，与正常对照组一起断颈、取血，分别置于抗凝管及干燥管中待检。
1.2.2红细胞免疫功能的检测 以红细胞C3b受体花环形成率(E-C3bRR)和红细胞免疫复合物花环形成率(E-ICR)作为评价红细胞免疫活性的指标，参照郭峰〔2〕报道的方法进行检测。
1.2.3红细胞SOD活性和血清LPO含量的检测
SOD活性的测定采用亚硝酸盐法，按检测试剂盒中的说明测定。LPO的测定采用硫代巴比妥酸(TBA)荧光比色法〔3〕。所获数据用X±s表示，各组数据间的差异，采用方差分析法，相关性比较用直线相关分析法。
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2结果
2.1红细胞免疫功能的变化 窒息新生大鼠的E-C3bRR为16.1%±3.1%显著低于对照组(24.3%±4.1%，P∨0.01)；而其E-ICR(20.7%±2.8%)则显著高于对照组(12.7%±5.3%，P∨0.01)。
2.2红细胞SOD活性及血清LPO的检测 结果显示，窒息新生大鼠红细胞SOD的活性为1360U/g±206U/g明显低于对照组(1630U/g±262U/g，P∨0.01)；而血清LPO的水平则窒息组明显高于对照组，分别为(4.3±0.5)μmol/L和(2.1±0.4)μmol/L(P∨0.01)。E-C3bRR与血清的LPO含量呈负相关(r=-0.732,P∨0.05),与红细胞SOD的活性呈正相关(r=0.653,P∨0.05)。
3讨论
有报道指出，窒息新生儿红细胞免疫功能下降，CIC明显升高〔4〕，但缺氧时继发性红细胞免疫活性降低的机制及作用尚不清楚。有人认为，红细胞免疫功能的下降可能与其体内抗氧化能力下降、脂质过氧化损伤有关〔1〕。本文结果表明，窒息新生大鼠的红细胞免疫功能明显低下,血清LPO水平增高，红细胞SOD的活性降低；E-C3bRR与血清LPO含量呈负相关，与红细胞SOD含量呈正相关，均支持红细胞免疫功能的下降与脂质过氧化损伤有关。新生儿窒息时红细胞SOD的活性降低，可使机体氧自由基的清除机制失衡，导致LPO堆积〔5〕。由于脂质过氧化反应可破坏体内蛋白质、酶、细胞器及生物膜类〔6〕，导致细胞膜的液体性、流动性和通透性改变，从而影响红细胞膜的功能，使C3b受体的活性下降。另有报道，LPO的异常增多可降低细胞上CR1的活性，使清除CIC的功能障碍，加重CIC在组织中沉积，激活补体，而致血管壁受损加重，脑缺血更明显。另外，窒息后继发性红细胞免疫功能的下降，可影响对外源性病原的粘附、清除能力，使机体抗感染的免疫功能不足，而成为窒息新生儿易并发感染的原因之一〔1〕。因此，在新生儿窒息时，应用自由基清除剂及免疫调节剂提高其红细胞免疫功能，对改善病情可能具有较大意义。
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作者简介：王玲，女，42岁，副主任医师，副教授
王玲(第四军医大学唐都医院儿科，陕西 西安 710038)
王为农(第四军医大学唐都医院儿科，陕西 西安 710038)
陶秦渝(第四军医大学唐都医院中心实验室,陕西 西安 710038)
鱼绥和(第四军医大学唐都医院儿科，陕西 西安 710038)
参考文献：
[1]刘景田，张洁，编著.红细胞免疫学[M].西安：陕西科学技术出版社,1991：15-16，89，99-100.
[2]郭峰.红细胞免疫及其调节功能的测定方法[J].免疫学杂志，1990；6：60.
, http://www.100md.com
[3]周翔，辛中国，孙国光，等.血清过氧化脂质的测定和意义[J].白求恩医科大学学报，1985；11：358-361.
[4]韩晓华，韩玉昆，高云霞.新生儿疾病时红细胞免疫功能的变化[J].新生儿科杂志，1995;10(4)：170-171.
[5]阎石，孟晓晖，杨军.缺氧缺血性脑病儿红细胞超氧化物歧化酶、血清丙二醛变化[J].实用儿科临床杂志，1998;13(4)：194.
[6]Mccord JM.Oxygen-derived free radicals in postischemic tissue injury[J].N Engl J Med，1985;312:159-162., 百拇医药
王玲 王为农 陶秦渝 鱼绥和
关键词：窒息；红细胞免疫；脂质过氧化；新生鼠
新生儿窒息时红细胞免疫功能的变化已引起人们注意，但缺氧时红细胞免疫活性降低的机制及意义尚不清楚。有人提出，红细胞免疫功能降低可能与其体内抗氧化能力下降、脂质过氧化损伤有关[1]。我们采用围产期窒息动物模型，观察了窒息后新生大鼠红细胞免疫功能及血清脂质过氧化物(LPO)的变化，旨在了解围产期窒息时，新生儿红细胞免疫状态与脂质过氧化损伤的相关性及其意义。
1材料和方法
1.1材料 SD大鼠由本校动物实验中心提供。酵母试剂由陕西省医院免疫室提供。过氧化物歧化酶(SOD)试剂盒由南京聚力生物医学工程研究所提供。硫代巴比妥酸为上海试剂二厂生产品。
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1.2方法
1.2.1动物模型的制备 将新生10d的SD大鼠(体重18～24g)随机分为正常对照组和窒息组。窒息组置于有机玻璃缺氧房内，按一定比例输入氧气和氮气，以监控仪控制氧浓度在7%、房内温度24℃、缺氧时间持续1h。4h后，与正常对照组一起断颈、取血，分别置于抗凝管及干燥管中待检。
1.2.2红细胞免疫功能的检测 以红细胞C3b受体花环形成率(E-C3bRR)和红细胞免疫复合物花环形成率(E-ICR)作为评价红细胞免疫活性的指标，参照郭峰〔2〕报道的方法进行检测。
1.2.3红细胞SOD活性和血清LPO含量的检测
SOD活性的测定采用亚硝酸盐法，按检测试剂盒中的说明测定。LPO的测定采用硫代巴比妥酸(TBA)荧光比色法〔3〕。所获数据用X±s表示，各组数据间的差异，采用方差分析法，相关性比较用直线相关分析法。
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2结果
2.1红细胞免疫功能的变化 窒息新生大鼠的E-C3bRR为16.1%±3.1%显著低于对照组(24.3%±4.1%，P∨0.01)；而其E-ICR(20.7%±2.8%)则显著高于对照组(12.7%±5.3%，P∨0.01)。
2.2红细胞SOD活性及血清LPO的检测 结果显示，窒息新生大鼠红细胞SOD的活性为1360U/g±206U/g明显低于对照组(1630U/g±262U/g，P∨0.01)；而血清LPO的水平则窒息组明显高于对照组，分别为(4.3±0.5)μmol/L和(2.1±0.4)μmol/L(P∨0.01)。E-C3bRR与血清的LPO含量呈负相关(r=-0.732,P∨0.05),与红细胞SOD的活性呈正相关(r=0.653,P∨0.05)。
3讨论
有报道指出，窒息新生儿红细胞免疫功能下降，CIC明显升高〔4〕，但缺氧时继发性红细胞免疫活性降低的机制及作用尚不清楚。有人认为，红细胞免疫功能的下降可能与其体内抗氧化能力下降、脂质过氧化损伤有关〔1〕。本文结果表明，窒息新生大鼠的红细胞免疫功能明显低下,血清LPO水平增高，红细胞SOD的活性降低；E-C3bRR与血清LPO含量呈负相关，与红细胞SOD含量呈正相关，均支持红细胞免疫功能的下降与脂质过氧化损伤有关。新生儿窒息时红细胞SOD的活性降低，可使机体氧自由基的清除机制失衡，导致LPO堆积〔5〕。由于脂质过氧化反应可破坏体内蛋白质、酶、细胞器及生物膜类〔6〕，导致细胞膜的液体性、流动性和通透性改变，从而影响红细胞膜的功能，使C3b受体的活性下降。另有报道，LPO的异常增多可降低细胞上CR1的活性，使清除CIC的功能障碍，加重CIC在组织中沉积，激活补体，而致血管壁受损加重，脑缺血更明显。另外，窒息后继发性红细胞免疫功能的下降，可影响对外源性病原的粘附、清除能力，使机体抗感染的免疫功能不足，而成为窒息新生儿易并发感染的原因之一〔1〕。因此，在新生儿窒息时，应用自由基清除剂及免疫调节剂提高其红细胞免疫功能，对改善病情可能具有较大意义。
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作者简介：王玲，女，42岁，副主任医师，副教授
王玲(第四军医大学唐都医院儿科，陕西 西安 710038)
王为农(第四军医大学唐都医院儿科，陕西 西安 710038)
陶秦渝(第四军医大学唐都医院中心实验室,陕西 西安 710038)
鱼绥和(第四军医大学唐都医院儿科，陕西 西安 710038)
参考文献：
[1]刘景田，张洁，编著.红细胞免疫学[M].西安：陕西科学技术出版社,1991：15-16，89，99-100.
[2]郭峰.红细胞免疫及其调节功能的测定方法[J].免疫学杂志，1990；6：60.
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[3]周翔，辛中国，孙国光，等.血清过氧化脂质的测定和意义[J].白求恩医科大学学报，1985；11：358-361.
[4]韩晓华，韩玉昆，高云霞.新生儿疾病时红细胞免疫功能的变化[J].新生儿科杂志，1995;10(4)：170-171.
[5]阎石，孟晓晖，杨军.缺氧缺血性脑病儿红细胞超氧化物歧化酶、血清丙二醛变化[J].实用儿科临床杂志，1998;13(4)：194.
[6]Mccord JM.Oxygen-derived free radicals in postischemic tissue injury[J].N Engl J Med，1985;312:159-162., 百拇医药