脑出血患者血清NO和血浆ET水平的动态变化及其临床意义
霍红梅 张志琳 包仕尧 邵国富
摘 要 目的：探讨一氧化氮(NO)、内皮素(ET)在脑出血患者病程、预后中的病理生理意义。方法：应用硝酸还原酶法、放射免疫法分别检测35例脑出血患者急性期和恢复期血清NO、血浆ET水平。结果：脑出血患者急性期血清NO水平明显降低、血浆ET-1水平明显升高(P<0.01)；并与病情严重程度相关，重型患者血浆ET-1水平明显高于轻型(P<0.05)；预后差的患者恢复期血浆ET-1水平明显高于、血清NO水平明显低于预后好的患者(P<0.05)。结论：脑出血后的NO/ET动态平衡破坏参与了疾病的病理生理过程，并影响预后。
关键词：脑出血；一氧化氮；内皮素
一氧化氮(NO)、内皮素(ET)有着广泛的生理病理意义。许多动物实验和一些临床研究表明，其在脑卒中的发生发展中起着重要作用。目前的研究多集中在缺血性脑梗死和蛛网膜下腔出血上，而对脑出血时两者关系的研究还较少，尤其是与预后的关系尚未见报道。因此，为进一步研究NO和ET在脑出血中的病理生理意义，我们观察了35例脑出血患者不同时期血清NO和血浆ET水平变化，并对其临床意义进行探讨。
, 百拇医药
1 资料和方法
1.1 病例选择及分组 脑出血组：35例，其中男21例，女14例。年龄38～80岁，平均56±14岁。均为首次发病，并经CT证实，均符合第4届全国脑血管病会议修订的诊断标准和评分方法。并除外慢性阻塞性肺病、心、肝、肾疾病及近2周内伴发感染性疾病者。出血部位：基底节21例，丘脑7例，壳核7例。入院和出院时神经功能缺损评分，轻型(0～15分)16例，中型(16～30分)12例，重型(31～45分)7例。预后分为预后好(基本痊愈+显著进步+进步)和预后差(无变化+恶化+死亡)。
正常对照组：20例，其中男13例，女7例。平均年龄50±8岁。均为健康体检者，均无心、脑、肺等疾病，各项生化指标正常。
1.2 标本采集 对照组和脑出血组在急性期(发病3日内)和恢复期(病程1个月后)采集血标本。均于早晨空腹抽取静脉血4ml。取2ml置于含10%EDTA 30μl和抑肽酶40μl的聚乙烯管中，混匀；另2ml置于一玻璃试管中。标本在2h 内，4℃、3000r/min离心15min，各吸取上清液于Eppendorf管中，置于-70℃冰箱保存待测。
, 百拇医药
1.3 测定方法 NO采用硝酸还原酶法测定其代谢产物Nox-，试剂盒购自南京建成生物工程研究所。ET-1采用放射免疫分析法测定，试剂盒购自北京东亚免疫技术研究所。操作严格按照试剂盒说明书进行。
1.4 统计学处理 数据以x±s表示，采用t检验和单因素方差分析。
2 结果
2.1 脑出血患者急性期、恢复期血清NO、血浆ET水平 见表1。脑出血组血清NO水平急性期较正常对照组明显下降，恢复期比急性期升高，但仍低于正常对照组。血浆ET-1 水平急性期明显升高，恢复期与急性期相比无下降趋势(P>0.05)，明显高于正常对照组。
表1 脑出血患者不同时期血清NO、血浆ET水平(x±s)
组别
, http://www.100md.com
NO (μmol/L)
ET-1(ng/L)
对照组
56.70±17.10
50.80±7.58
急性期
33.25±13.41**
130.40±54.95**
恢复期
41.65±17.03**▲
122.37±35.08**
, 百拇医药
**与对照组比较, P<0.01; ▲与急性期比较P<0.05
2.2 不同病情程度脑出血患者急性期血清NO、血浆ET水平比较 见表2。重型患者血清NO水平明显低于轻型，血浆ET水平明显高于轻型，与中型患者比较无明显差异(P>0.05)；随病情的加重，ET-1水平有升高趋势。
表2 不同病情患者急性期血清NO、血浆ET水平比较(x±s)
病情
n
NO (μmol/L)
ET-1(ng/L)
轻型
16
, 百拇医药
34.25±10.92
127.83±30.20
中型
12
27.56±13.40
140.34±23.13
重型
7
23.62±5.44*
154.92±21.06*
*与轻型组比较，P<0.05
, http://www.100md.com
2.3 脑出血患者恢复期血清NO、血浆ET水平与近期预后的关系 见表3。预后差的患者血清NO水平明显低、血浆ET水平明显高。表3 不同预后的中型脑出血患者恢复期血清NO、血浆ET水平(x±s)
预后
n
NO (μmol/L)
ET-1(ng/L)
好
9
35.33±10.81
118.77±16.87
差
, 百拇医药
3
25.26±6.32*
143.35±20.59*
*与预后好的患者比较，P<0.053 讨论
血管内皮舒张因子(NO)和血管内皮收缩因子(ET)都是调节血管内皮舒缩平衡、局部器官血流的重要因子。其中，ET是已知最强烈的血管内皮收缩因子[1]。两者在脑血管疾病的发生和发展中起着重要作用。本研究结果显示，在脑出血急性期血清NO水平明显下降、血浆ET-1水平明显升高；并与病情程度相关，重型患者血清NO水平明显低于、血浆ET-1水平明显高于轻型，但与中型患者比较未见明显差异，与文献报道有差别，考虑可能为病例样本小的原因。恢复期血浆ET-1无下降趋势。提示脑出血后，NO/ET动态平衡失调，在其病情发生、发展过程中起作用。其变化机制，可能与下列因素有关：(1)脑出血后机体的应激反应，使外周血管产生ET增加，NO减少；(2)脑出血后红细胞裂解产生的大量氧合血红蛋白(HbO2),刺激血管内皮细胞中ET的合成，还可能通过抑制cGMP或cAMP促进ET释放增多[2]；Hb可直接作用于脑血管平滑肌，并特异性地与NO结合，抑制NO活性；其次Hb自氧化，产生大量过氧化物，使NO灭活[3]；(3)局部因素如肾上腺素、凝血酶等增多加速ET合成；(4)颅内压增高，灌注压降低，缺血缺氧使脑血管内皮细胞受损，ET合成和释放增多，NO合成和释放减少。恢复期时应激状态虽恢复，但由于沉积的血凝块等其他原因使ET仍居高不下。重型患者，一般出血量较大，脑组织缺血缺氧严重，致NO/ET严重失调，从而也更加重了病情。
, 百拇医药
脑出血后的NO/ET动态平衡破坏，导致血管舒缩功能失调，血管收缩反应增强，血小板聚集，引起脑血管痉挛缺血，加剧脑水肿和脑损伤等一系列病理反应，有着重要的病理意义。目前，ET水平与预后的关系尚存在争议。有报道ET水平可反映病情和预后[4，5]。也有报道认为与预后无关[6]。我们选取了同等病情的患者观察恢复期血清NO、血浆ET水平与预后的关系，发现预后好的患者恢复期血清NO水平明显高于、血浆ET水平明显低于预后差的患者。提示NO/ET失调在恢复期仍发挥着病理意义，不利于预后。临床上若能及早纠正两者的失调，可减轻脑缺氧、脑损伤，有利于改善病情发展和预后。
霍红梅(苏州大学附属第二医院神经内科，苏州，215004)
张志琳(苏州大学附属第二医院神经内科，苏州，215004)
包仕尧(苏州大学附属第二医院神经内科，苏州，215004)
, http://www.100md.com
邵国富(苏州大学附属第二医院神经内科，苏州，215004)
参考文献
1，阮长耿.血栓和止血-现代理论和临床实践.南京: 江苏科学技术出版社,1994∶8
2，Cosentino F,Katusis ZS. Does endothelin-1 play a role in the pathogenesis of cerebral vasospasm? Stroke, 1994, 25(4)∶904～908
3，Fescher N,Akielki H,Schirk. Nitric oxide is the endothe-lium-derived relaxing factor in bovine pial arterioles. Stroke, 1990, 21(Suppl 12)∶46
, http://www.100md.com
4，汤 健,唐朝枢,杨 军，等.内皮素 {M}.北京∶ 北京医科大学、中国协和医科大学联合出版社,1994∶95
5，Ronald W.Hilwing, Robert A. Berg, Karl B. Kern,et al. Endothelin-1 vasoconstriction during swine cardiopulmonary resuscitation improves coronary perfusion pressures but worsens postresuscitation outcome.Circulation, 2000, 101∶2097
6，Elena Haapaniemi, Turgut T, Kathleen Hamel, et al.Endothelin-1 levels neither increase nor correlate with neurological scores, stroke risk factors, or outcome in patients with ischemic stroke. Stroke, 2000,31∶720, 百拇医药
摘 要 目的：探讨一氧化氮(NO)、内皮素(ET)在脑出血患者病程、预后中的病理生理意义。方法：应用硝酸还原酶法、放射免疫法分别检测35例脑出血患者急性期和恢复期血清NO、血浆ET水平。结果：脑出血患者急性期血清NO水平明显降低、血浆ET-1水平明显升高(P<0.01)；并与病情严重程度相关，重型患者血浆ET-1水平明显高于轻型(P<0.05)；预后差的患者恢复期血浆ET-1水平明显高于、血清NO水平明显低于预后好的患者(P<0.05)。结论：脑出血后的NO/ET动态平衡破坏参与了疾病的病理生理过程，并影响预后。
关键词：脑出血；一氧化氮；内皮素
一氧化氮(NO)、内皮素(ET)有着广泛的生理病理意义。许多动物实验和一些临床研究表明，其在脑卒中的发生发展中起着重要作用。目前的研究多集中在缺血性脑梗死和蛛网膜下腔出血上，而对脑出血时两者关系的研究还较少，尤其是与预后的关系尚未见报道。因此，为进一步研究NO和ET在脑出血中的病理生理意义，我们观察了35例脑出血患者不同时期血清NO和血浆ET水平变化，并对其临床意义进行探讨。
, 百拇医药
1 资料和方法
1.1 病例选择及分组 脑出血组：35例，其中男21例，女14例。年龄38～80岁，平均56±14岁。均为首次发病，并经CT证实，均符合第4届全国脑血管病会议修订的诊断标准和评分方法。并除外慢性阻塞性肺病、心、肝、肾疾病及近2周内伴发感染性疾病者。出血部位：基底节21例，丘脑7例，壳核7例。入院和出院时神经功能缺损评分，轻型(0～15分)16例，中型(16～30分)12例，重型(31～45分)7例。预后分为预后好(基本痊愈+显著进步+进步)和预后差(无变化+恶化+死亡)。
正常对照组：20例，其中男13例，女7例。平均年龄50±8岁。均为健康体检者，均无心、脑、肺等疾病，各项生化指标正常。
1.2 标本采集 对照组和脑出血组在急性期(发病3日内)和恢复期(病程1个月后)采集血标本。均于早晨空腹抽取静脉血4ml。取2ml置于含10%EDTA 30μl和抑肽酶40μl的聚乙烯管中，混匀；另2ml置于一玻璃试管中。标本在2h 内，4℃、3000r/min离心15min，各吸取上清液于Eppendorf管中，置于-70℃冰箱保存待测。
, 百拇医药
1.3 测定方法 NO采用硝酸还原酶法测定其代谢产物Nox-，试剂盒购自南京建成生物工程研究所。ET-1采用放射免疫分析法测定，试剂盒购自北京东亚免疫技术研究所。操作严格按照试剂盒说明书进行。
1.4 统计学处理 数据以x±s表示，采用t检验和单因素方差分析。
2 结果
2.1 脑出血患者急性期、恢复期血清NO、血浆ET水平 见表1。脑出血组血清NO水平急性期较正常对照组明显下降，恢复期比急性期升高，但仍低于正常对照组。血浆ET-1 水平急性期明显升高，恢复期与急性期相比无下降趋势(P>0.05)，明显高于正常对照组。
表1 脑出血患者不同时期血清NO、血浆ET水平(x±s)
组别
, http://www.100md.com
NO (μmol/L)
ET-1(ng/L)
对照组
56.70±17.10
50.80±7.58
急性期
33.25±13.41**
130.40±54.95**
恢复期
41.65±17.03**▲
122.37±35.08**
, 百拇医药
**与对照组比较, P<0.01; ▲与急性期比较P<0.05
2.2 不同病情程度脑出血患者急性期血清NO、血浆ET水平比较 见表2。重型患者血清NO水平明显低于轻型，血浆ET水平明显高于轻型，与中型患者比较无明显差异(P>0.05)；随病情的加重，ET-1水平有升高趋势。
表2 不同病情患者急性期血清NO、血浆ET水平比较(x±s)
病情
n
NO (μmol/L)
ET-1(ng/L)
轻型
16
, 百拇医药
34.25±10.92
127.83±30.20
中型
12
27.56±13.40
140.34±23.13
重型
7
23.62±5.44*
154.92±21.06*
*与轻型组比较，P<0.05
, http://www.100md.com
2.3 脑出血患者恢复期血清NO、血浆ET水平与近期预后的关系 见表3。预后差的患者血清NO水平明显低、血浆ET水平明显高。表3 不同预后的中型脑出血患者恢复期血清NO、血浆ET水平(x±s)
预后
n
NO (μmol/L)
ET-1(ng/L)
好
9
35.33±10.81
118.77±16.87
差
, 百拇医药
3
25.26±6.32*
143.35±20.59*
*与预后好的患者比较，P<0.053 讨论
血管内皮舒张因子(NO)和血管内皮收缩因子(ET)都是调节血管内皮舒缩平衡、局部器官血流的重要因子。其中，ET是已知最强烈的血管内皮收缩因子[1]。两者在脑血管疾病的发生和发展中起着重要作用。本研究结果显示，在脑出血急性期血清NO水平明显下降、血浆ET-1水平明显升高；并与病情程度相关，重型患者血清NO水平明显低于、血浆ET-1水平明显高于轻型，但与中型患者比较未见明显差异，与文献报道有差别，考虑可能为病例样本小的原因。恢复期血浆ET-1无下降趋势。提示脑出血后，NO/ET动态平衡失调，在其病情发生、发展过程中起作用。其变化机制，可能与下列因素有关：(1)脑出血后机体的应激反应，使外周血管产生ET增加，NO减少；(2)脑出血后红细胞裂解产生的大量氧合血红蛋白(HbO2),刺激血管内皮细胞中ET的合成，还可能通过抑制cGMP或cAMP促进ET释放增多[2]；Hb可直接作用于脑血管平滑肌，并特异性地与NO结合，抑制NO活性；其次Hb自氧化，产生大量过氧化物，使NO灭活[3]；(3)局部因素如肾上腺素、凝血酶等增多加速ET合成；(4)颅内压增高，灌注压降低，缺血缺氧使脑血管内皮细胞受损，ET合成和释放增多，NO合成和释放减少。恢复期时应激状态虽恢复，但由于沉积的血凝块等其他原因使ET仍居高不下。重型患者，一般出血量较大，脑组织缺血缺氧严重，致NO/ET严重失调，从而也更加重了病情。
, 百拇医药
脑出血后的NO/ET动态平衡破坏，导致血管舒缩功能失调，血管收缩反应增强，血小板聚集，引起脑血管痉挛缺血，加剧脑水肿和脑损伤等一系列病理反应，有着重要的病理意义。目前，ET水平与预后的关系尚存在争议。有报道ET水平可反映病情和预后[4，5]。也有报道认为与预后无关[6]。我们选取了同等病情的患者观察恢复期血清NO、血浆ET水平与预后的关系，发现预后好的患者恢复期血清NO水平明显高于、血浆ET水平明显低于预后差的患者。提示NO/ET失调在恢复期仍发挥着病理意义，不利于预后。临床上若能及早纠正两者的失调，可减轻脑缺氧、脑损伤，有利于改善病情发展和预后。
霍红梅(苏州大学附属第二医院神经内科，苏州，215004)
张志琳(苏州大学附属第二医院神经内科，苏州，215004)
包仕尧(苏州大学附属第二医院神经内科，苏州，215004)
, http://www.100md.com
邵国富(苏州大学附属第二医院神经内科，苏州，215004)
参考文献
1，阮长耿.血栓和止血-现代理论和临床实践.南京: 江苏科学技术出版社,1994∶8
2，Cosentino F,Katusis ZS. Does endothelin-1 play a role in the pathogenesis of cerebral vasospasm? Stroke, 1994, 25(4)∶904～908
3，Fescher N,Akielki H,Schirk. Nitric oxide is the endothe-lium-derived relaxing factor in bovine pial arterioles. Stroke, 1990, 21(Suppl 12)∶46
, http://www.100md.com
4，汤 健,唐朝枢,杨 军，等.内皮素 {M}.北京∶ 北京医科大学、中国协和医科大学联合出版社,1994∶95
5，Ronald W.Hilwing, Robert A. Berg, Karl B. Kern,et al. Endothelin-1 vasoconstriction during swine cardiopulmonary resuscitation improves coronary perfusion pressures but worsens postresuscitation outcome.Circulation, 2000, 101∶2097
6，Elena Haapaniemi, Turgut T, Kathleen Hamel, et al.Endothelin-1 levels neither increase nor correlate with neurological scores, stroke risk factors, or outcome in patients with ischemic stroke. Stroke, 2000,31∶720, 百拇医药