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抗内毒素人源性抗体制备成功
http://www.100md.com 2002年4月11日 中国医学论坛报
     本报讯 内蒙古自治区医院韩晓芳等,在一项名为“细菌内毒素基因工程抗体实验研究”中,成功制备了拮抗内毒素的人源性抗类脂A-Fab抗体,为临床防治内毒素血症提供了一种有效的免疫制剂。该研究近日获内蒙古自治区科技进步推荐一等奖。

    目前,国内尚无供临床使用的拮抗内毒素有效免疫制剂。近年有报道用内毒素单克隆抗体对抗内毒素,但因其动物源性进入人体后易导致过敏和排斥反应,限制了在临床中推广。国外有人研制出了抗类脂A人单克隆抗体,由于人杂交瘤细胞株不稳定,且抗体分泌低,也不能广泛应用。随着分子生物学和分子免疫学的发展以及基因工程抗体研究的不断深入,从淋巴细胞中直接获取活性抗体基因成为可能。

    韩晓芳等采用G-杆菌J7内毒素脂A蛋白免疫健康志愿者,然后利用噬菌体呈现抗体库技术成功构建了人源性噬菌体Fab抗体库。他们采用抗原递减法对这些抗体进行了三次淘筛,使抗体滴度较第一轮增加近100倍。再采用夹心ELISA法对噬菌体抗体进行筛选和鉴定,发现噬菌抗体只与内毒素类脂A结合,而与非相关抗原不发生反应,证明筛选出的人源性抗体具有抗内毒素类脂A的特异性,切掉噬菌体的gⅢ基因,最终获得了可溶性抗类脂A的Fab抗体。此后,韩晓芳等又对该抗体两个克隆进行了重链Fd基因序列分析,发现两个克隆重链的DNA序列具有典型的人免疫球蛋白基因序列的特征,属于人抗体第Ⅲ家族成员。, http://www.100md.com