阿昔洛韦片相对生物利用度及药物动力学
孙世明 何林 吴正中 童荣生 吴秀强 白艳 四川省人民医院临床药理研究室，成都市 610071
中图分类号:R978.7 文献标志码:B 文章编号:1001-0408(2000)02-0078-02
摘要：目的：研究阿昔洛韦片的药物动力学及相对生物利用度。方法：采用反相高效液相色谱法测定10名志愿受试者单剂量口服600mg阿昔洛韦片供试品与标准参比制剂后，阿昔洛韦血药浓度变化情况，经3p87药动学程序处理。结果：药-时曲线下面积分别为(5.31±0.75)μg/(ml·h)与(5.44±0.99)μg/(ml·h)，达峰时间分别为(1.90±0.39)h与(1.95±0.37)h，峰浓度分别为(1.12±0.19)μg/ml与(1.15±0.16)μg/ml。配对t检验与双单侧t检验结果表明，二者药-时曲线下面积、峰浓度及达峰时间均无显著性差异(P>0.05)。阿昔洛韦片供试品的相对生物利用度为(98.62±10.09)%。结论：阿昔洛韦片供试品与标准参比制剂为生物等效制剂。
, 百拇医药
关键词：阿昔洛韦；药物动力学；相对生物利用度
ABSTRACT：AIM： The pharmacokinetics and relative bioavailabilities of Acyclovir tablets were studied.METHODS：Blood concentrations of Acyclovir was determined by RP-HPLC after a single oral dose of two kinds of Acyclovir tablets was given separately to 10 volunteers in an open randomized cross-over test. RESULTS：After taking a single oral dose of 600mg Acyclovir test tablets and reference tablets， the AUC0→∞ of Acyclovir of the two formulations were 5.31±0.75μg/ml×h and 5.44±0.99μg/ml×h； Tmax were (1.90±0.39)h and (1.95±0.37)h；Cmax were 1.12±0.19μg/ml and 1.15±0.16μg/ml respectively. CONCLUSION：The results of statistical analysis showed that there were no significant differences in the AUC0→∞、Tmax and Cmax of Acyclovir between the two formulations(P>0.05) and two Acyclovir tablets were bioequivalent
, http://www.100md.com
KEY WORDS： Acyclovir tablet；pharmacokinetics；bioequivalence
阿昔洛韦是广谱抗病毒药，能选择性抑制病毒DNA聚合酶，阻止病毒DNA合成，比阿糖胞苷约强160倍，对单纯疱疹病毒Ⅰ、Ⅱ型最强，对水痘、带状疱疹病毒、巨型细胞病毒、E-B病毒也有抑制作用。用于疱疹性角膜炎、单纯疱疹、疱疹性脑炎、带状疱疹等，用途十分广泛[1～3]。本实验对两种国产阿昔洛韦片进行了药物动力学与生物等效性评价，以期为临床合理用药提供依据。
1 材料与方法
1.1 药品与试剂
阿昔洛韦对照品(中国药品生物制品检定所)；阿昔洛韦片供试品(由陕西康惠制药有限公司试制，100mg/片，批号980801)；阿昔洛韦片标准参比制剂(由中国湖北益康制药厂出品，100mg/片，批号990406)；内标吡嗪酰胺(由四川抗菌素工业研究所提供)；甲醇为色谱试剂；水为超纯水；其余试剂均为分析纯。
, http://www.100md.com
1.2 主要仪器
Alliance高效液相色谱仪(包括2690溶剂输送系统，996二极管阵列检测器，Millennium32数据处理软件)；YW-80A漩涡混合器(上海医科大学仪器厂)；TGL-16高速离心机(上海医用仪器厂)；实达-586计算机；3p87药物动力学程序(中国药理学会编)。
1.3 研究对象
10名健康男性，年龄20a～22a，平均(21.1±0.6)a；体重58kg～68kg，平均(61.5±3.3)kg。在充分了解本试验的目的与方法及了解该产品的药理与毒副作用，经自愿签署“志愿受试者志愿书”后成为本试验志愿受试者。经志愿受试者本人及家族病史调查，受试者无肝、肾功能及心脏功能异常，近2wk未使用过任何药物，本人及家族无过敏体质；对志愿受试者进行肝、肾功能及心电图检查，均正常。
1.4 血浆中阿昔洛韦测定方法
, 百拇医药
1.4.1 色谱条件：色谱柱：Phenomenex LUNA C18(5μm，250×4.6mm)柱，柱温40℃。流动相：水∶甲醇∶乙酸=400∶20∶0.05，流速：1.2ml/min。测定波长：254nm。
1.4.2 血浆样品的处理与测定：精密量取血浆样品1.0ml，置5ml具塞离心试管中，精密加入110.8μg/ml内标吡嗪酰胺溶液10μl，混匀，加入10%高氯酸溶液0.4ml，旋涡混合2min，12 000r条件下离心10min，取上清液20μl进样，在上述色谱条件下分离测定，记录色谱图、内标峰面积(Ai)与阿昔洛韦峰面积(As)。
1.4.3 标准曲线制备方法：精密量取空白血浆1.0ml，置8支5ml具塞离心试管中，分别加入不同浓度的阿昔洛韦对照品溶液10μl，混匀，按血浆样品的处理与测定方法，从“精密加入110.8μg/ml内标溶液10μl”起进行处理和分离测定。
, http://www.100md.com 1.4.4 回收率试验：分别于1.0ml的空白血浆中加入高、中、低3种浓度的阿昔洛韦对照品溶液10μl，混匀，得高、中、低3种不同阿昔洛韦浓度的血浆样品，按血浆样品的处理与测定方法操作，依法测定回收率。
1.4.5 精密度试验：分别于1.0ml的空白血浆中加入高、中、低3种浓度的阿昔洛韦对照品溶液10μl，混匀，得高、中、低3种不同阿昔洛韦浓度的血浆样品，按血浆样品的处理与测定方法操作，测定日内与日间(5d内)精密度。
1.5 相对生物利用度实验的设计与方法
采用随机交叉试验设计方法设计实验。将10名志愿受试者随机分为2组，禁食12h后，分别口服600mg阿昔洛韦片供试品与标准参比制剂，服药后在规定时间点肘静脉采血约4ml，采血点均为服药前取空白血，服药后0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、4.0、6.0、8.0、12.0、16.0h取样品血。间隔1wk后交叉服药，同样时间点肘静脉采血。血样立即分取血浆，血浆置—20℃冰柜放置供测定。服药后3h内禁食并禁止饮水，受试期间受试者禁烟、酒、茶，进食统一餐。
, 百拇医药
2 结果
2.1 血浆中阿昔洛韦的测定方法
按选定的色谱条件，测得的空白血浆与血浆样品的色谱图，分别见图1、图2。由图可见，血浆中物质几乎不影响阿昔洛韦与吡嗪酰胺的分离测定。血浆中的阿昔洛韦与吡嗪酰胺的保留时间分别为6.49min、7.07min。将标准曲线制备项下测得的不同浓度阿昔洛韦系列溶液的As和Ai，计算Y(Y=As/Ai)，以Y值为纵坐标，阿昔洛韦浓度C(μg/ml)为横坐标，直线回归，得标准曲线方程：Y=0.2 006+1.348×10-3C，γ=0.9 995。结果表明，血浆中阿昔洛韦浓度在0.025～2.0μg/ml范围内，浓度与峰面积比有良好的线性关系。3种浓度的平均回收率为(99.12±4.07)%(n=15)。日内相对标准差≤5.10%，日间相对标准差≤5.7%。以s/n=3∶1计，方法的最低检测浓度为0.025μg/ml。
图1 空白血浆色谱图 图2 血浆样品、内标色谱图
, 百拇医药
2.2 阿昔洛韦片的药物动力学及相对生物利用度的测定结果
10名志愿受试者单剂量口服600mg阿昔洛韦片供试品与标准参比制剂均值的药-时曲线分别见图3和图4。
图3 单剂量口服阿昔洛韦片供试品600mg均值药-时曲线
图4 单剂量口服阿昔洛韦片标准参比制剂600mg均值药-时曲线
经3p87药动学程序对经时血药浓度数据进行处理，采用非室模型以统计矩计算AUC0→∞，其余药动学参数按一级吸收一室模型拟合计算，结果见表1。
表1 口服单剂量阿昔洛韦片供试品与标准参比制剂600mg的药动学参数
参比品 供试品
, 百拇医药 AUC0→∞[(μg/ml)×h] 5.438±0.986 5.310±0.747
Tmax(h) 1.95±0.37 1.99±0.39
Tmax(μg/ml) 1.15±0.16 1.12±0.19
Ka(1/h) 1.36±0.63 0.82±0.24
Ke(1/h) 0.32±0.06 0.38±0.09
T1/2(h) 2.24±0.37 1.91±0.45
V/F(L) 389.02±70.78 332.54±62.49
F(%) 98.62±10.09
2.3 统计分析
对口服600mg阿昔洛韦片供试品及标准参比制剂的AUC0→∞、Cmax及TS进行统计分析，均无显著性差异(P>0.05)，表明二者为生物等效制剂。
3 讨论
试验用剂量参考阿昔洛韦片临床所用剂量(每日200mg～1 000mg)及分析方法的灵敏度确定。配对t检验与双单侧t检验是制剂生物等效性评价常用的两种统计方法，本试验以两种方法进行统计分析，结果一致。实验所得药物动力学参数与文献[4]报道基本一致。摘自：中国药房, http://www.100md.com
中图分类号:R978.7 文献标志码:B 文章编号:1001-0408(2000)02-0078-02
摘要：目的：研究阿昔洛韦片的药物动力学及相对生物利用度。方法：采用反相高效液相色谱法测定10名志愿受试者单剂量口服600mg阿昔洛韦片供试品与标准参比制剂后，阿昔洛韦血药浓度变化情况，经3p87药动学程序处理。结果：药-时曲线下面积分别为(5.31±0.75)μg/(ml·h)与(5.44±0.99)μg/(ml·h)，达峰时间分别为(1.90±0.39)h与(1.95±0.37)h，峰浓度分别为(1.12±0.19)μg/ml与(1.15±0.16)μg/ml。配对t检验与双单侧t检验结果表明，二者药-时曲线下面积、峰浓度及达峰时间均无显著性差异(P>0.05)。阿昔洛韦片供试品的相对生物利用度为(98.62±10.09)%。结论：阿昔洛韦片供试品与标准参比制剂为生物等效制剂。
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关键词：阿昔洛韦；药物动力学；相对生物利用度
ABSTRACT：AIM： The pharmacokinetics and relative bioavailabilities of Acyclovir tablets were studied.METHODS：Blood concentrations of Acyclovir was determined by RP-HPLC after a single oral dose of two kinds of Acyclovir tablets was given separately to 10 volunteers in an open randomized cross-over test. RESULTS：After taking a single oral dose of 600mg Acyclovir test tablets and reference tablets， the AUC0→∞ of Acyclovir of the two formulations were 5.31±0.75μg/ml×h and 5.44±0.99μg/ml×h； Tmax were (1.90±0.39)h and (1.95±0.37)h；Cmax were 1.12±0.19μg/ml and 1.15±0.16μg/ml respectively. CONCLUSION：The results of statistical analysis showed that there were no significant differences in the AUC0→∞、Tmax and Cmax of Acyclovir between the two formulations(P>0.05) and two Acyclovir tablets were bioequivalent
, http://www.100md.com
KEY WORDS： Acyclovir tablet；pharmacokinetics；bioequivalence
阿昔洛韦是广谱抗病毒药，能选择性抑制病毒DNA聚合酶，阻止病毒DNA合成，比阿糖胞苷约强160倍，对单纯疱疹病毒Ⅰ、Ⅱ型最强，对水痘、带状疱疹病毒、巨型细胞病毒、E-B病毒也有抑制作用。用于疱疹性角膜炎、单纯疱疹、疱疹性脑炎、带状疱疹等，用途十分广泛[1～3]。本实验对两种国产阿昔洛韦片进行了药物动力学与生物等效性评价，以期为临床合理用药提供依据。
1 材料与方法
1.1 药品与试剂
阿昔洛韦对照品(中国药品生物制品检定所)；阿昔洛韦片供试品(由陕西康惠制药有限公司试制，100mg/片，批号980801)；阿昔洛韦片标准参比制剂(由中国湖北益康制药厂出品，100mg/片，批号990406)；内标吡嗪酰胺(由四川抗菌素工业研究所提供)；甲醇为色谱试剂；水为超纯水；其余试剂均为分析纯。
, http://www.100md.com
1.2 主要仪器
Alliance高效液相色谱仪(包括2690溶剂输送系统，996二极管阵列检测器，Millennium32数据处理软件)；YW-80A漩涡混合器(上海医科大学仪器厂)；TGL-16高速离心机(上海医用仪器厂)；实达-586计算机；3p87药物动力学程序(中国药理学会编)。
1.3 研究对象
10名健康男性，年龄20a～22a，平均(21.1±0.6)a；体重58kg～68kg，平均(61.5±3.3)kg。在充分了解本试验的目的与方法及了解该产品的药理与毒副作用，经自愿签署“志愿受试者志愿书”后成为本试验志愿受试者。经志愿受试者本人及家族病史调查，受试者无肝、肾功能及心脏功能异常，近2wk未使用过任何药物，本人及家族无过敏体质；对志愿受试者进行肝、肾功能及心电图检查，均正常。
1.4 血浆中阿昔洛韦测定方法
, 百拇医药
1.4.1 色谱条件：色谱柱：Phenomenex LUNA C18(5μm，250×4.6mm)柱，柱温40℃。流动相：水∶甲醇∶乙酸=400∶20∶0.05，流速：1.2ml/min。测定波长：254nm。
1.4.2 血浆样品的处理与测定：精密量取血浆样品1.0ml，置5ml具塞离心试管中，精密加入110.8μg/ml内标吡嗪酰胺溶液10μl，混匀，加入10%高氯酸溶液0.4ml，旋涡混合2min，12 000r条件下离心10min，取上清液20μl进样，在上述色谱条件下分离测定，记录色谱图、内标峰面积(Ai)与阿昔洛韦峰面积(As)。
1.4.3 标准曲线制备方法：精密量取空白血浆1.0ml，置8支5ml具塞离心试管中，分别加入不同浓度的阿昔洛韦对照品溶液10μl，混匀，按血浆样品的处理与测定方法，从“精密加入110.8μg/ml内标溶液10μl”起进行处理和分离测定。
, http://www.100md.com 1.4.4 回收率试验：分别于1.0ml的空白血浆中加入高、中、低3种浓度的阿昔洛韦对照品溶液10μl，混匀，得高、中、低3种不同阿昔洛韦浓度的血浆样品，按血浆样品的处理与测定方法操作，依法测定回收率。
1.4.5 精密度试验：分别于1.0ml的空白血浆中加入高、中、低3种浓度的阿昔洛韦对照品溶液10μl，混匀，得高、中、低3种不同阿昔洛韦浓度的血浆样品，按血浆样品的处理与测定方法操作，测定日内与日间(5d内)精密度。
1.5 相对生物利用度实验的设计与方法
采用随机交叉试验设计方法设计实验。将10名志愿受试者随机分为2组，禁食12h后，分别口服600mg阿昔洛韦片供试品与标准参比制剂，服药后在规定时间点肘静脉采血约4ml，采血点均为服药前取空白血，服药后0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、4.0、6.0、8.0、12.0、16.0h取样品血。间隔1wk后交叉服药，同样时间点肘静脉采血。血样立即分取血浆，血浆置—20℃冰柜放置供测定。服药后3h内禁食并禁止饮水，受试期间受试者禁烟、酒、茶，进食统一餐。
, 百拇医药
2 结果
2.1 血浆中阿昔洛韦的测定方法
按选定的色谱条件，测得的空白血浆与血浆样品的色谱图，分别见图1、图2。由图可见，血浆中物质几乎不影响阿昔洛韦与吡嗪酰胺的分离测定。血浆中的阿昔洛韦与吡嗪酰胺的保留时间分别为6.49min、7.07min。将标准曲线制备项下测得的不同浓度阿昔洛韦系列溶液的As和Ai，计算Y(Y=As/Ai)，以Y值为纵坐标，阿昔洛韦浓度C(μg/ml)为横坐标，直线回归，得标准曲线方程：Y=0.2 006+1.348×10-3C，γ=0.9 995。结果表明，血浆中阿昔洛韦浓度在0.025～2.0μg/ml范围内，浓度与峰面积比有良好的线性关系。3种浓度的平均回收率为(99.12±4.07)%(n=15)。日内相对标准差≤5.10%，日间相对标准差≤5.7%。以s/n=3∶1计，方法的最低检测浓度为0.025μg/ml。
图1 空白血浆色谱图 图2 血浆样品、内标色谱图
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2.2 阿昔洛韦片的药物动力学及相对生物利用度的测定结果
10名志愿受试者单剂量口服600mg阿昔洛韦片供试品与标准参比制剂均值的药-时曲线分别见图3和图4。
图3 单剂量口服阿昔洛韦片供试品600mg均值药-时曲线
图4 单剂量口服阿昔洛韦片标准参比制剂600mg均值药-时曲线
经3p87药动学程序对经时血药浓度数据进行处理，采用非室模型以统计矩计算AUC0→∞，其余药动学参数按一级吸收一室模型拟合计算，结果见表1。
表1 口服单剂量阿昔洛韦片供试品与标准参比制剂600mg的药动学参数
参比品 供试品
, 百拇医药 AUC0→∞[(μg/ml)×h] 5.438±0.986 5.310±0.747
Tmax(h) 1.95±0.37 1.99±0.39
Tmax(μg/ml) 1.15±0.16 1.12±0.19
Ka(1/h) 1.36±0.63 0.82±0.24
Ke(1/h) 0.32±0.06 0.38±0.09
T1/2(h) 2.24±0.37 1.91±0.45
V/F(L) 389.02±70.78 332.54±62.49
F(%) 98.62±10.09
2.3 统计分析
对口服600mg阿昔洛韦片供试品及标准参比制剂的AUC0→∞、Cmax及TS进行统计分析，均无显著性差异(P>0.05)，表明二者为生物等效制剂。
3 讨论
试验用剂量参考阿昔洛韦片临床所用剂量(每日200mg～1 000mg)及分析方法的灵敏度确定。配对t检验与双单侧t检验是制剂生物等效性评价常用的两种统计方法，本试验以两种方法进行统计分析，结果一致。实验所得药物动力学参数与文献[4]报道基本一致。摘自：中国药房, http://www.100md.com