猪带绦虫抗原基因TS76的克隆及原核表达
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四川大学草原生物防治工程国家实验室;成都;610064 沈斌;高荣;孟民杰;沈翼;武梅;李江凌;龙章富 ;魏
参见附件(81kb)。
四川大学草原生物防治工程国家实验室;成都;610064 沈斌;高荣;孟民杰;沈翼;武梅;李江凌;龙章富 ;魏竹波;王克非;朱锦;付玉梅;卓麟;何绍江;刘世贵
关键词:猪带绦虫;抗原基因;克隆;表达
摘要:目的 测定和分析自猪囊尾蚴表达型cDNA文库中筛选出的cDNA克隆 (TS76 )的序列 ,并进行该片段的原核表达研究。方法 采用PCR扩增重组 (噬菌体 (TS76中的TS76cDNA片段 ,亚克隆至 pUC18,得到的重组子用于测序 ,并对测定结果进行分析及同源性比较 ;将TS76片段亚克隆到原核表达载体pGEX - 1(T中 ,免疫印迹方法筛选得到能正确表达TS76片段的重组子 pGTS76 ;制备pGTS76原核表达产物 ,进行浓度梯度SDS -PAGE和Westernblotting分析。 结果 TS76克隆含 5 16对核苷酸 ,编码含 83个氨基酸残基的多肽 ,与EMBL数据库中的猪囊虫免疫原性蛋白质mRNA有 383bp的同源区。
四川大学草原生物防治工程国家实验室;成都;610064 沈斌;高荣;孟民杰;沈翼;武梅;李江凌;龙章富 ;魏竹波;王克非;朱锦;付玉梅;卓麟;何绍江;刘世贵
关键词:猪带绦虫;抗原基因;克隆;表达
摘要:目的 测定和分析自猪囊尾蚴表达型cDNA文库中筛选出的cDNA克隆 (TS76 )的序列 ,并进行该片段的原核表达研究。方法 采用PCR扩增重组 (噬菌体 (TS76中的TS76cDNA片段 ,亚克隆至 pUC18,得到的重组子用于测序 ,并对测定结果进行分析及同源性比较 ;将TS76片段亚克隆到原核表达载体pGEX - 1(T中 ,免疫印迹方法筛选得到能正确表达TS76片段的重组子 pGTS76 ;制备pGTS76原核表达产物 ,进行浓度梯度SDS -PAGE和Westernblotting分析。 结果 TS76克隆含 5 16对核苷酸 ,编码含 83个氨基酸残基的多肽 ,与EMBL数据库中的猪囊虫免疫原性蛋白质mRNA有 383bp的同源区。
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