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编号:10126044
内置生物人工肝细胞培养量的研究
http://www.100md.com 2003年2月12日 中华实验外科杂志
     生物人工肝已成为体外肝脏功能支持研究的方向,高效能生物反应器的构建是研究的首要步骤,合适的细胞数量和细胞状态是生物反应器的重要参数。南京大学医学院附属鼓楼医院肝胆外科设计了一种新型生物人工肝,以研究内置生物人工肝最适培养细胞数量。方法:应用改良两步胶原酶法分离肝细胞,构建内置生物人工肝,体外培养3天,检测活率及各种代谢合成功能指标。结果:各组细胞活率均维持90%以上,差异无显著性;安定代谢功能、尿素合成功能、蛋白合成功能类似,细胞数量少于5×106/毫升时,随细胞密度的增加而功能增强,细胞密度高于5×106/毫升上述功能维持一定水平,各功能在5×106/毫升组与1×105/毫升、5×105/毫升两组比较差异有非常显著性(P<0.01);葡萄糖-6磷酸酶和总RNA丰度表现出另一种趋势,细胞密度低于5×106/毫升,两者均维持较高水平,其后虽细胞密度增加,出现一定程度下降。总RNA丰度5×107/毫升组和密度低的4组比较,差异均有非常显著性(P<0.01)。细胞内p53含量在细胞量5×107/毫升时表达明显增强。

    本研究结果表明,在肝细胞数量低于5×106/毫升时,随细胞数量的增加,构建的人工肝代谢、尿素合成、蛋白合成功能逐渐增强,而密度再予以增加,这些功能仅基本维持于一定水平,这说明细胞5×106/毫升为最佳培养量。

    对于G-6-PD出现与尿素合成、蛋白合成不同走势,研究者认为与经换算成等量肝细胞有关。, 百拇医药