络病与心脑血管疾病相关性研究及治疗新进展 通心络胶囊对脑梗塞外周血粒细胞Cd11/Cd18表达影响的临床研究
作者简介：周华东
教授
第三军医大学大坪医院教授，主任医师，博士生导师。近年来承担国家自然科学基金等省、部级科研课题7项，在国内外学术期刊发表论文20余篇，获得省、部级以上科技进步奖2项，获得国家专利1项，现任重庆市中西医结合学会神经病学专业委员会主任委员与《中华老年心脑血管病杂志》编委。
摘要
目的：通过外周血粒细胞CD11/CD18的变化，探讨通心络胶囊治疗脑梗塞早期的临床作用。方法：使用通心络胶囊治疗30例脑梗塞患者，并与30例未使用通心络胶囊的脑梗塞患者进行对照，通过流式细胞仪和图象分析系统，观察外周血粒细胞CD11a/CD18和CD11b/CD18的表达。结果：通心络胶囊在脑梗塞早期可使CD11/CD18表达明显下降。结论：通心络胶囊对脑梗塞患者早期有明确的治疗作用。
, 百拇医药
研究
脑梗塞是目前的常见病、多发病，致残率高，严重危害人类的健康。目前对脑梗塞早期的治疗尤为重视。已有文献报道，粘附分子CD11/CD18的表达与脑梗塞的发生、发展密切相关。另有研究证实中药通心络胶囊对脑梗塞的康复期治疗有较好的效果，但其用于脑梗塞早期治疗的临床研究尚未开展。本研究通过外周血粒细胞CD11a/CD11b表达的变化，探讨通心络胶囊对脑梗塞患者的早期治疗作用。
资料与方法
一. 资料
本研究随机抽取脑梗塞患者60例，均按中华医学会脑血管病专业委员会制定的脑血管病诊断标准，并经头颅CT或MRI检查确诊。将患者随机分为两组：通心络胶囊治疗组30例，男性16例，女性14例，年龄49～83岁，平均年龄69.3岁。起病后当天开始服用通心络胶囊，每次0.38 g，每日3次，连续服用14天；对照组30例，男性13例，女性17例，年龄50～71岁，平均年龄66.8岁，不服用通心络胶囊。所有入选患者均排除卒中史、肿瘤及自身免疫性疾病。并发各种感染体温>37.2℃；白细胞计数>10×109/L，中性白细胞>70%)和有严重合并症(心肌梗死、上消化道出血、糖尿病)的患者均不能入选。
, 百拇医药
二. 方法
分别于起病后第3天、第7天和第14天，抽取两组患者静脉血2mk，肝素抗凝，用右旋糖酐沉降及Percokk梯度法分离多形核粒细胞(PMNS)，离心后备用。取k00 μk分离的PMNS悬浮液加入鼠抗人CDkka/CD18和CDkkb/CD18单克隆抗体20 μk(法国Immunotech公司)；阳性对照组加入磷酸盐缓冲液(PBS)，25℃室温放置15 min，过夜后，加500 μk红细胞裂解液(0.38% NH4 0.05 mmok Na2 EDTA 0.1%K2HCO3 pH7.3)混匀后室温放置10 min，离心后去上清液，用0.1 mok/L PBS(pH7.4)清洗1次后加20 μk 异硫氰酸荧光素标记的二抗，室温放置3 min，离心PSB清洗2次，然后在流式细胞仪(Ekite ESPCoukter CO.USA)上测量CDkka/CD18和CDkkb/CD18免疫阳性细胞数，在Cekk Quest软件下，采用二维点力图Gate白细胞分解，一维直方图进行特异性荧光分析，在5000个白细胞中计算免疫阳性细胞数及百分率。实验数据以均数±标准差(x±s)表示，组间比较用t检验。
, 百拇医药
结果
一.对外周血多形核粒细胞CD11a/CD18表达的影响
30例脑梗塞患者起病后当天开始服用通心络胶囊，治疗14天，分别于第3天、第7天和第14天测患者外周血多形核粒细胞CD11a/CD18的表达。服用通心络的脑梗塞患者与未服用通心络的脑梗塞患者比较，CD11a/CD18的表达明显降低(P<0.01)见表1。
表1 两组患者多形核粒细胞CD11a/CD18表达比较(%)
组别
例数
第3天
第7天
, 百拇医药
第14天
CD11a/CD18
通心络组
30
23.91±2.75*
13.82±2.27*
7.17±2.73*
对照组
30
38.86±5.26
19.28±3.58
9.36±3.41
, 百拇医药
注：*与对照对比较，P<0.01。
二. 对外周血多形核粒细胞CD11b/CD18表达的影响
30例脑梗塞患者起病后当天开始服用通心络胶囊，治疗14天，分别于第3天、第7天和第14天测患者外周血多形核粒细胞CD11b/CD18的表达。服用通心络的脑梗塞患者与未服用通心络的脑梗塞患者比较，CD11b/CD18的表达明显降低(P<0.01)见表2。
表2 两组患者形核粒细胞CD11b/CD18表达的比较(%)
组别
例数
第3天
第7天
, 百拇医药
第14天
CD11b/CD18
通心络组
30
39.53±4.71*
16.81±3.15*
11.74±3.14*
对照组
30
56.07±5.80
21.54±2.75
13.62±2.27
, 百拇医药
注：*与对照对比较，P<0.01。
讨论
急性脑血管病与恶性肿瘤、心脏病是目前威胁人类健康的三大疾病。脑出血起病急，病情重，死亡率高，而脑梗塞存在更高的致残率，因此，对脑梗塞的早期救治显得尤为重要。国内外提出了超早期溶栓、降纤等一系列治疗方案，但尚未找到治疗脑梗塞的根本方法，特别是进展性卒中的发生还难以控制。脑梗塞的早期治疗与预后也是密切相关的，早期治疗效果不好，后期康复就难以达到理想的效果，所以目前国内外学者对脑梗塞早期救治的基础与临床研究尤为重视。
CD11/CDk8为细胞表面粘附蛋白，包括CD11a/CD18和CD11b/CD18，CD11a/CD18又称为淋巴细胞功能相关抗原-1，(kymphocyte function associated antigen 1 LFA-1)，CD11b/CD18又称为巨噬细胞分化抗原-1 macrophage differentiation antigen-1 Mac-1。多形核粒细胞PMNS可介导白细胞聚集与浸入脑组织。PMNS占外周血的50%～70%。PMNS膜表面的黏附分子表达对脑梗塞早期病情的发生和发展有重要的监测作用。
, 百拇医药
通心络胶囊是吴以岭教授首创运用中医络病理论研制而成的中药复方制剂，由人参、全蝎、蜈蚣、水蛭、土鳖虫、蝉蜕、赤芍、冰片等药组成，组方颇具特色，五虫并用，补气药、虫类通络药与活血化瘀类药合并应用。通心络胶囊的研制成功填补了络病治疗方药的空白，2000年荣获国家科技部科技进步二等奖。目前通心络胶囊用于冠心病治疗的文献较多，对脑梗塞的治疗临床观察主要集中在康复期的治疗，对于脑梗塞的早期治疗尚未见文献报道。
本研究使用通心络胶囊对脑梗塞患者进行早期治疗，并与对照组比较，通过脑梗塞患者外周血粒细胞粘附分子CD11/CD18的表达，证实通心络胶囊对脑梗塞患者外周血粘附分子CD11a/CD18和CD11b/CD18的表达有明显的抑制作用。所以本项研究得出的结论是：通心络胶囊对早期脑梗塞患者有明显的治疗作用，这对临床救治脑梗塞患者具有重要的参考价值。, http://www.100md.com
教授
第三军医大学大坪医院教授，主任医师，博士生导师。近年来承担国家自然科学基金等省、部级科研课题7项，在国内外学术期刊发表论文20余篇，获得省、部级以上科技进步奖2项，获得国家专利1项，现任重庆市中西医结合学会神经病学专业委员会主任委员与《中华老年心脑血管病杂志》编委。
摘要
目的：通过外周血粒细胞CD11/CD18的变化，探讨通心络胶囊治疗脑梗塞早期的临床作用。方法：使用通心络胶囊治疗30例脑梗塞患者，并与30例未使用通心络胶囊的脑梗塞患者进行对照，通过流式细胞仪和图象分析系统，观察外周血粒细胞CD11a/CD18和CD11b/CD18的表达。结果：通心络胶囊在脑梗塞早期可使CD11/CD18表达明显下降。结论：通心络胶囊对脑梗塞患者早期有明确的治疗作用。
, 百拇医药
研究
脑梗塞是目前的常见病、多发病，致残率高，严重危害人类的健康。目前对脑梗塞早期的治疗尤为重视。已有文献报道，粘附分子CD11/CD18的表达与脑梗塞的发生、发展密切相关。另有研究证实中药通心络胶囊对脑梗塞的康复期治疗有较好的效果，但其用于脑梗塞早期治疗的临床研究尚未开展。本研究通过外周血粒细胞CD11a/CD11b表达的变化，探讨通心络胶囊对脑梗塞患者的早期治疗作用。
资料与方法
一. 资料
本研究随机抽取脑梗塞患者60例，均按中华医学会脑血管病专业委员会制定的脑血管病诊断标准，并经头颅CT或MRI检查确诊。将患者随机分为两组：通心络胶囊治疗组30例，男性16例，女性14例，年龄49～83岁，平均年龄69.3岁。起病后当天开始服用通心络胶囊，每次0.38 g，每日3次，连续服用14天；对照组30例，男性13例，女性17例，年龄50～71岁，平均年龄66.8岁，不服用通心络胶囊。所有入选患者均排除卒中史、肿瘤及自身免疫性疾病。并发各种感染体温>37.2℃；白细胞计数>10×109/L，中性白细胞>70%)和有严重合并症(心肌梗死、上消化道出血、糖尿病)的患者均不能入选。
, 百拇医药
二. 方法
分别于起病后第3天、第7天和第14天，抽取两组患者静脉血2mk，肝素抗凝，用右旋糖酐沉降及Percokk梯度法分离多形核粒细胞(PMNS)，离心后备用。取k00 μk分离的PMNS悬浮液加入鼠抗人CDkka/CD18和CDkkb/CD18单克隆抗体20 μk(法国Immunotech公司)；阳性对照组加入磷酸盐缓冲液(PBS)，25℃室温放置15 min，过夜后，加500 μk红细胞裂解液(0.38% NH4 0.05 mmok Na2 EDTA 0.1%K2HCO3 pH7.3)混匀后室温放置10 min，离心后去上清液，用0.1 mok/L PBS(pH7.4)清洗1次后加20 μk 异硫氰酸荧光素标记的二抗，室温放置3 min，离心PSB清洗2次，然后在流式细胞仪(Ekite ESPCoukter CO.USA)上测量CDkka/CD18和CDkkb/CD18免疫阳性细胞数，在Cekk Quest软件下，采用二维点力图Gate白细胞分解，一维直方图进行特异性荧光分析，在5000个白细胞中计算免疫阳性细胞数及百分率。实验数据以均数±标准差(x±s)表示，组间比较用t检验。
, 百拇医药
结果
一.对外周血多形核粒细胞CD11a/CD18表达的影响
30例脑梗塞患者起病后当天开始服用通心络胶囊，治疗14天，分别于第3天、第7天和第14天测患者外周血多形核粒细胞CD11a/CD18的表达。服用通心络的脑梗塞患者与未服用通心络的脑梗塞患者比较，CD11a/CD18的表达明显降低(P<0.01)见表1。
表1 两组患者多形核粒细胞CD11a/CD18表达比较(%)
组别
例数
第3天
第7天
, 百拇医药
第14天
CD11a/CD18
通心络组
30
23.91±2.75*
13.82±2.27*
7.17±2.73*
对照组
30
38.86±5.26
19.28±3.58
9.36±3.41
, 百拇医药
注：*与对照对比较，P<0.01。
二. 对外周血多形核粒细胞CD11b/CD18表达的影响
30例脑梗塞患者起病后当天开始服用通心络胶囊，治疗14天，分别于第3天、第7天和第14天测患者外周血多形核粒细胞CD11b/CD18的表达。服用通心络的脑梗塞患者与未服用通心络的脑梗塞患者比较，CD11b/CD18的表达明显降低(P<0.01)见表2。
表2 两组患者形核粒细胞CD11b/CD18表达的比较(%)
组别
例数
第3天
第7天
, 百拇医药
第14天
CD11b/CD18
通心络组
30
39.53±4.71*
16.81±3.15*
11.74±3.14*
对照组
30
56.07±5.80
21.54±2.75
13.62±2.27
, 百拇医药
注：*与对照对比较，P<0.01。
讨论
急性脑血管病与恶性肿瘤、心脏病是目前威胁人类健康的三大疾病。脑出血起病急，病情重，死亡率高，而脑梗塞存在更高的致残率，因此，对脑梗塞的早期救治显得尤为重要。国内外提出了超早期溶栓、降纤等一系列治疗方案，但尚未找到治疗脑梗塞的根本方法，特别是进展性卒中的发生还难以控制。脑梗塞的早期治疗与预后也是密切相关的，早期治疗效果不好，后期康复就难以达到理想的效果，所以目前国内外学者对脑梗塞早期救治的基础与临床研究尤为重视。
CD11/CDk8为细胞表面粘附蛋白，包括CD11a/CD18和CD11b/CD18，CD11a/CD18又称为淋巴细胞功能相关抗原-1，(kymphocyte function associated antigen 1 LFA-1)，CD11b/CD18又称为巨噬细胞分化抗原-1 macrophage differentiation antigen-1 Mac-1。多形核粒细胞PMNS可介导白细胞聚集与浸入脑组织。PMNS占外周血的50%～70%。PMNS膜表面的黏附分子表达对脑梗塞早期病情的发生和发展有重要的监测作用。
, 百拇医药
通心络胶囊是吴以岭教授首创运用中医络病理论研制而成的中药复方制剂，由人参、全蝎、蜈蚣、水蛭、土鳖虫、蝉蜕、赤芍、冰片等药组成，组方颇具特色，五虫并用，补气药、虫类通络药与活血化瘀类药合并应用。通心络胶囊的研制成功填补了络病治疗方药的空白，2000年荣获国家科技部科技进步二等奖。目前通心络胶囊用于冠心病治疗的文献较多，对脑梗塞的治疗临床观察主要集中在康复期的治疗，对于脑梗塞的早期治疗尚未见文献报道。
本研究使用通心络胶囊对脑梗塞患者进行早期治疗，并与对照组比较，通过脑梗塞患者外周血粒细胞粘附分子CD11/CD18的表达，证实通心络胶囊对脑梗塞患者外周血粘附分子CD11a/CD18和CD11b/CD18的表达有明显的抑制作用。所以本项研究得出的结论是：通心络胶囊对早期脑梗塞患者有明显的治疗作用，这对临床救治脑梗塞患者具有重要的参考价值。, http://www.100md.com