幽门螺杆菌过氧化氢酶基因的克隆、高效表达及活性评价
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第一军医大学南方医院全军消化病研究所 510515广州 白杨;张亚历;王继德;施里;张兆山;周殿元
参见附件(44kb)。
第一军医大学南方医院全军消化病研究所 510515广州 白杨;张亚历;王继德;施里;张兆山;周殿元
关键词:幽门螺杆菌;过氧化氢酶;高效表达
摘要:目的 构建高效表达幽门螺杆菌 (Hp)过氧化氢酶重组蛋白的候选菌株并测定其活性。方法 用PCR方法从Hp染色体DNA上扩增过氧化氢酶基因 ,将其定向插入表达载体 pET 2 2b(+)中 ,并在BL2 1(DE3)大肠杆菌中表达 ,进一步利用贝尔斯 西策尔斯法测定其活性。结果 DNA序列分析表明 ,所克隆的过氧化氢酶基因序列与基因库公布的一致。在 37°C诱导表达 3h后 ,过氧化氢酶重组蛋白表达量占菌体总蛋白的 2 4 .4 % ,并显示了良好的活性。结论 本研究获得了表达高活性Hp过氧化氢酶的克隆 ,为深入研究其相关功能奠定了良好基础。
第一军医大学南方医院全军消化病研究所 510515广州 白杨;张亚历;王继德;施里;张兆山;周殿元
关键词:幽门螺杆菌;过氧化氢酶;高效表达
摘要:目的 构建高效表达幽门螺杆菌 (Hp)过氧化氢酶重组蛋白的候选菌株并测定其活性。方法 用PCR方法从Hp染色体DNA上扩增过氧化氢酶基因 ,将其定向插入表达载体 pET 2 2b(+)中 ,并在BL2 1(DE3)大肠杆菌中表达 ,进一步利用贝尔斯 西策尔斯法测定其活性。结果 DNA序列分析表明 ,所克隆的过氧化氢酶基因序列与基因库公布的一致。在 37°C诱导表达 3h后 ,过氧化氢酶重组蛋白表达量占菌体总蛋白的 2 4 .4 % ,并显示了良好的活性。结论 本研究获得了表达高活性Hp过氧化氢酶的克隆 ,为深入研究其相关功能奠定了良好基础。
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