新型白蛋白微泡经超声介导破裂促进Egfp基因在Cos-7细胞的表达
目前基因治疗研究领域不断拓宽，但安全、有效的基因载体及良好的靶向性是基因治疗成功的重要难点之一。新近研究表明，白蛋白微泡可以把寡核苷酸导入狗的肾脏。其机制可能超声所致微泡破裂产生的振荡促进DNA分子穿透内皮细胞的细胞膜，同时向细胞内传送的振荡波可促进DNA从内吞泡逸出并进入细胞核。超声参数是细胞转化效率的重要条件，优化超声参数才有可能提高转化效率和应用于临床基因治疗。江苏省无锡市第一人民医院心内科和南京医科大学动脉粥样硬化研究中心的研究人员通过检测白蛋白微泡和超声破泡技术转化标记基因的定向效果和转导效率，探索有效表达标记基因所需表达载体剂量和超声强度及时间，为临床开展高效、定向和无创的基因治疗提供可靠的理论根据和实践经验。
方法：实验中选择绿色荧光蛋白基因EGFP为标记基因，以自制的白蛋白微泡为载体，用超声介导微泡破裂的方法在体外进行Cos-7细胞的基因转化。同时以脂质体为对照，激光共聚焦显微镜和流式细胞计数仪分别定性和定量观察细胞转化效率，锥虫蓝染色观察细胞的活性。结果：
体外试验发现0.8兆赫、1.0瓦/平方厘米、10%占空比、60秒超声介导10%白蛋白微泡破裂可以有效稳定地转化EGFP基因在Cos-7细胞表达，且对细胞无毒副作用。
结论：自制白蛋白微泡是一种安全、有效的新型基因载体。在一定超声条件控制下，它能增强基因的转导与表达，有良好的靶向性。该技术有应用于临床基因治疗的广阔前景。
摘自《中华超声影像学杂志》2003年第12卷第4期, http://www.100md.com
方法：实验中选择绿色荧光蛋白基因EGFP为标记基因，以自制的白蛋白微泡为载体，用超声介导微泡破裂的方法在体外进行Cos-7细胞的基因转化。同时以脂质体为对照，激光共聚焦显微镜和流式细胞计数仪分别定性和定量观察细胞转化效率，锥虫蓝染色观察细胞的活性。结果：
体外试验发现0.8兆赫、1.0瓦/平方厘米、10%占空比、60秒超声介导10%白蛋白微泡破裂可以有效稳定地转化EGFP基因在Cos-7细胞表达，且对细胞无毒副作用。
结论：自制白蛋白微泡是一种安全、有效的新型基因载体。在一定超声条件控制下，它能增强基因的转导与表达，有良好的靶向性。该技术有应用于临床基因治疗的广阔前景。
摘自《中华超声影像学杂志》2003年第12卷第4期, http://www.100md.com