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P3实验室锁定SARS存活期:对热敏感 最多存活2天
http://www.100md.com 2003年5月27日 刘莉 新华网
     对于SARS病毒的存活时间,国内外众说纷纭,有的说3、4个小时,有的说24小时,还有的说在24小时以上的,那么SARS病毒到底在体外能存活多长时间?走进P3实验室,看SARS病毒在体外能活多久……

    演绎SARS存活期课题组在干什么

    4月底,从科技攻关组接到任务;5月1日,课题组正式成立;2日全体成员开会;

    3日进入P3实验室。实验记录从5月3日开始……

    李敬云翻开面前放着的一个已经用去了大半的、黄皮实验记录本,里面是整齐的表格和工整的文字记录。“非常时期的非常速度,从来没有一个课题像这个课题抓得这么紧。”

    李敬云,军事医学科学院微生物流行病研究所研究员,“SARS病毒体外环境生存和抵抗能力研究”课题负责人。
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    目前,国内外对SARS病毒存活时间众说纷纭,有的说3、4个小时,有的说24小时以上,但都均缺乏可靠的依据。更有甚者,寄远离非典的希望于一天天升高的气温。那么SARS病毒到底能在体外存活多久?这是老百姓们普遍关心的问题,也是“全国防治非典科技攻关组”流行病学研究组的一个重要课题。

    “我们的课题组包括原来艾滋病室的5个人和消毒室的两位同志。因为我们的实验需要严格按照消毒技术规范操作,观察病原体有一套规范的方法,所以需要他们的帮助。”

    5月22日我去采访时,实验已经接近尾声,最后一批标本今天要全部看完。

    通过20多天的实验和观测,他们发现,SRAS病毒抵抗力强,但确实具有不耐干燥、不耐热的特性。在木头、布等吸水的材料上,病毒能存活4-6小时;在玻璃、金属、塑料等不吸水的材料上,能存活2天。他们选取了几个人们日常生活中常见的温度,进行测定,发现SARS病毒对热敏感。当温度达到56摄氏度时,30分钟,病毒就不能存活。但是对于寄希望于气温升高病毒消亡的说法,李敬云觉得可能性不大,因为自然界的温度再升高也不可能达到使病毒致命的56摄氏度。
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    在实验室里他们首先要做的工作是用原有的病毒株(毒种)培养大量用于实验的病毒。因为病毒没有代谢能力,它必须有一个家(宿主)才能存活,研究人员就把它接种到大量正常的活细胞中。

    在48小时后,把这些培养出的病毒稀释成一定量,按照国际上公认的病毒感染量,把它放进事先准备好的放有血、粪便、金属、塑料……等不同介质的细胞培养板上,制成模拟标本,放置1小时、2小时、1天、2天……时间后,取出一定量标本放入细胞培养板上,在显微镜下看标本中的SARS病毒的滴度(每毫升中病毒的数量),据此推断病毒的存活时间。在不同温度下,病毒的滴度也要用同样的方法测定,为了保证实验结果的正确性,全部实验都需要重复3次。

    研究课题能做什么

    见到李敬云时,她刚刚和同事一起坐单位的班车从招待所到单位。因为天天和危险的SARS病毒打交道,为了防止一旦感染再传染给其他人,从4月底开始,他们就住进了单位统一安排的招待所,到现在都已经20多天没回过家了。课题组另外4位研究人员和我匆匆地打过招呼后,就又赶去P3实验室了。
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    目前已经确定SARS病毒可以通过飞沫传播,但这并不能解释所有病例的发病原因,是否存在粪口传播(病人的粪便污染土壤、水源等外环境,经口传播)、间接接触传播等。要证实有没有这些途径,要做大量的工作,包括流行病学的研究,需要大量实验室里的证据,而李敬云他们做的正是这个工作。

    “病毒到底在体外能存活多长时间?在病人的排泄物里,病人污染过的环境里到底能活多久?这关系到对传播途径的推测。比如,有没有可能通过间接接触传播。”说着,她拿起桌上的纸杯子,“比如这个杯子,病人用过,你再用会不会被感染?这就要看病毒在这样的一个环境里能生存多长时间。”

    作为军事医学科学院微生物流行病研究所艾滋病室的主任,“非典”出现之前,李主任和她的同事们一直在对艾滋病病毒进行研究。所以,她喜欢用艾滋病病毒和SARS病毒作比较。“像我们以前研究的艾滋病病毒,它离开人体后就死掉,构不成传播的能力,所以你跟病人一起吃饭、喝茶都不会有问题。但是这个病毒我们对它不了解,很迫切的需要做这样一个工作来证实,分析SARS病毒有没有可能通过间接途径来传播。”
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    如果病毒离开人体很快就死掉了,就没必要进行大量的消毒工作;相反,如果病毒能够大量存在很长时间,就要严格全面的进行消毒。对于现场的封控也需要有实验结果的指导。一栋楼,一个房间,封多少天合适,要不要配合其他消毒措施。这些问题都需要先回答“病毒在体外能存活多久?”的问题。

    可以说这是一个跟SARS的防治、临床一线以及流行病学的研究都紧密联系的课题,对于科学的决策具有重要参考价值。从目前的实验结果来看,SARS病毒在各种介质中都有较长时间的存活期,有可能构成粪口传播和间接接触传播。李主任说,这样看来前一段时间大家对门把手、栏杆进行消毒都是有必要的。

    实验环境怎么样

    采访前听说这个课题的所有实验都是在P3实验室里做的,就开始查找有关P3的资料,发现有人把这种专门用来研究极易感染的病毒的实验室叫做“魔鬼实验室”,这种实验室采用定向负压系统,其核心区的压力达到-40Pa,这样实验室空气的流动,只能是通过高效过滤器从外面进来,而保证实验室内的空气不向外流动。同时配有生物安全柜,保证科研人员在做实验时不被病毒感染,同时不污染环境。
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    由于SARS病毒是一种传染性强的病毒,所以实验都必须在P3实验室进行。P3实验室是达到生物安全防护三级标准的实验室,也称生物安全3级实验室。据了解,目前我国达到P3级的实验室并不多。

    李主任说在P3工作,他们最怕的不是在里面做实验,而是进出P3实验室的各种繁琐程序。的确,一套防护设备穿戴下来就要半个多小时。而他们每天就要这样换上好几遍。

    整个P3实验室由更衣室、缓冲走廊、准备间、缓冲间1、缓冲间2、P3核心区组成。在实验室的四周装有高效空气过滤器。我算了一下,从标有BL-3的大门开始,到达实验室的核心区,总共有8道门,最里面的5道门是互锁的,也就是说,如果一道门没有关好,另一道门肯定打不开,这样避免空气的流通。

    通过缓冲走廊和准备间,终于到了P3实验室的核心区,这里是-40pa的压力,再加上厚厚的口罩,让人感觉呼吸都有些困难。有三位研究人员在做着实验。在只有十三四平方米的核心区里配有生物安全柜、电热细胞培养柜、显微镜和一个普通的实验台。生物安全柜顶上有一个直径0.5米左右的粗管子,直接通到房顶,李敬云介绍说,它也是负压状态的,一些主要的操作都需要在生物安全柜中进行。
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    P3实验室严格地实行人流物流分开。从P3实验室拿出的相关的物品必须通过高压灭菌锅消毒后,再用洁净袋充分包装,然后通过传递窗传到准备间。

    离开P3时,核心区的工作人员要相互间把全身从上到下消毒一遍才能走到缓冲间2。在这里除去外层防护服、口罩、外层手套,然后将这些放入灭菌容器或消毒袋内。关闭实验室门之后,再取下防护眼镜,将其放入传递窗进行消毒。然后,工作人员经过缓冲间1,退到准备间。在这里他们才可以取下身上所有的防护器具,立即在沐浴室洗澡后,才可离开实验室。

    23号采访时,李主任告诉我,实验已经基本结束,他们在做一些整理工作,估计最迟到5月29日,大家就可以了解到实验的全部结果。采访札记两天的采访有三件事给我留下了深刻的印象:

    程序的繁琐。P3实验室有严格、复杂的管理程序,为了保证与高危传染物打交道的P3级实验室的绝对安全,只有得到批准和持有磁卡通行证的人才能进入,而且所有出入的人员都由电脑记录在案。虽然知道会给他们的工作带来很大麻烦,我还是想进去亲身感受一下他们的工作环境。但李主任考虑再三还是决定带我去一个用于艾滋病病毒研究的P3实验室外面看一看。晚上打电话再次要求,李主任才同意再请示所里的领导。第二天中午11点多,李主任打来电话,再次确认我不带任何东西后,答应下午可以进去。
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    带我走进标着BL-3标志的大门,李敬云就在左边墙上挂着的本子上签上了“李敬云(带一人)”。门的右边,换掉脚上的鞋。又过两道门来到更衣室,需要穿戴到身上的有一套上下分开的防护服,李敬云告诉我领子上的带子一定要绑紧,这样可以保护脖子。两双一次性手套、两层帽子、四个口罩、一副类似绑腿的袜套,一件带帽子的连体防护服,再换一次鞋,套上鞋套,戴上防护镜方可结束,全部程序要半小时。而他们每天就要这样换上好几遍。

    全副武装后的闷热难耐。戴上四层口罩后,马上觉得憋气,身上出了一身汗,不得不站稳了喘喘气。最后穿上的那件连体防护服,李主任说,他们管这叫“猴服”,等我终于费劲地把拉链拉上,再戴上防护镜、最后换一次鞋套和一次性手套,就感觉到头上的汗顺着脖子流了下来,哪里有猴子的灵活,我感觉自己像是站在火炉旁的宇航员!再加上实验室中的大气压比外界低40Pa,氧气远不如外界充足,进去后呼吸也变得困难。有时在P3核心区工作,因为要处理的样本较多,呆在里面五六个小时也是常有的事,这就要求他们不吃、不喝、不上厕所。李敬云说每次做完实验都有一种从游泳池里出来的感觉。想做的第一件事就是美美地吸一口气。

    枯燥环境中的智慧。的确,P3实验室中的工作人员所面临的不仅仅是病毒带来的恐惧,实验室的工作环境也给他们带来了相当的不便。进入实验室的核心区后,防护眼镜很快就会起雾,但又不能用手进行清理。李主任说他们有个好办法,就是把头伸进冰柜里凉快凉快,让雾慢慢自己散去。在10步就能走完的小房间里,面对显微镜下大同小异的枯燥标本,他们常常一干就是半天。早一天摸清病毒的特性,就能早一天找到制服它的办法,李敬云和她的同事们在自己小小的实验室里,默默地努力着。, http://www.100md.com