冬凌草甲素诱导Hela细胞凋亡的研究
冬凌草甲素是植物冬凌草中的一种四环二萜类化合物,许多研究表明它具有抑制HeLa或HL-60细胞生长的作用,但对其抑制HeLa生长的作用机制不明。沈阳药科大学中日医药研究所等单位的研究人员以HeLa为材料,应用荧光显微镜、琼脂糖电泳技术,研究了冬凌草甲素抑制HeLa细胞生长的作用机制。
方法:取处于对数生长期的HeLa细胞,接种于96孔培养板中,培养10小时后,加入不同浓度的oridonin及caspase抑制剂,每个浓度设平行孔3个,对照孔加入不含药物的0.1%DMSO的培养液,于37℃,0.05CO2条件下继续培养12、24、36、48小时,做体外药物敏感性实验。进行细胞形态学观察、LDH(乳酸脱氢酶)的活力测定、细胞DNA提取及电泳观察和caspase-3和-8活力测定。结果:冬凌草甲素能显著诱导HeLa细胞发生凋亡,其作用呈明显的量效关系和时间依赖性。形态学观察可见凋亡小体的形成,琼脂糖凝胶电泳可见凋亡典型的DNA梯带;caspase家族抑制剂,cas鄄pase-1和-3抑制剂能抑制冬凌草甲素诱导HeLa细胞的凋亡,68.7微摩尔/升冬凌草甲素作用HeLa细胞12小时使caspase-3的活力提高两倍。
结论:适宜浓度以下,冬凌草甲素(68.7微摩尔/升)诱导HeLa细胞凋亡具有浓度与时间依赖性,大剂量(137.4微摩尔/升)时,冬凌草甲素诱导HeLa细胞坏死的程度强于凋亡,且通过激活caspase途径诱导HeLa细胞凋亡。, 百拇医药
方法:取处于对数生长期的HeLa细胞,接种于96孔培养板中,培养10小时后,加入不同浓度的oridonin及caspase抑制剂,每个浓度设平行孔3个,对照孔加入不含药物的0.1%DMSO的培养液,于37℃,0.05CO2条件下继续培养12、24、36、48小时,做体外药物敏感性实验。进行细胞形态学观察、LDH(乳酸脱氢酶)的活力测定、细胞DNA提取及电泳观察和caspase-3和-8活力测定。结果:冬凌草甲素能显著诱导HeLa细胞发生凋亡,其作用呈明显的量效关系和时间依赖性。形态学观察可见凋亡小体的形成,琼脂糖凝胶电泳可见凋亡典型的DNA梯带;caspase家族抑制剂,cas鄄pase-1和-3抑制剂能抑制冬凌草甲素诱导HeLa细胞的凋亡,68.7微摩尔/升冬凌草甲素作用HeLa细胞12小时使caspase-3的活力提高两倍。
结论:适宜浓度以下,冬凌草甲素(68.7微摩尔/升)诱导HeLa细胞凋亡具有浓度与时间依赖性,大剂量(137.4微摩尔/升)时,冬凌草甲素诱导HeLa细胞坏死的程度强于凋亡,且通过激活caspase途径诱导HeLa细胞凋亡。, 百拇医药