维护血管内皮功能对心脑血管疾病的重要意义——系列研究之七 通心络对不稳定型心绞痛患者血管内皮功能影响的临床研究
摘要
目的：探讨通心络胶囊对不稳定型心绞痛(UPA)患者血管内皮功能的影响。方法：46例UPA患者，随机分为常规治疗组和通心络组(常规治疗+通心络胶囊每日3次，每次3粒)，观察治疗前后血清内皮素(ET)、一氧化氮(NO)、血管性假血友病因子(von Wikkebrand factor，vWF)、可溶性血管细胞粘附分子-1(sVCAM-1)、可溶性细胞间粘附分子-1(sICAM)的变化，并利用超声诊断仪测定肱动脉血流介导的血管扩张变化率(fkow-mediated dikatation FMD)。结果：与治疗前相比，治疗后两组患者血清vWF、ET水平均明显下降(P<0.01)，NO水平和FMD均明显升高(P<0.05或P<0.01)；通心络组血清sVCAM-1和sICAM-1水平显著降低(P<0.01)，而常规治疗组血清sVCAM-1和sICAM-1水平无明显变化(P>0.01)。治疗后通心络组血清vWF、ET、sVCAM-1和sICAM-1水平均低于常规治疗组(P<0.01)，NO水平和FMD高于常规治疗组(P<0.01)。结论：通心络可能通过抗凝、降低血清ET和部分细胞黏附分子水平、提高NO水平等途径改善血管内皮功能，有效治疗不稳定型心绞痛。
, 百拇医药
研究
近年研究证明内皮功能异常与多种心血管疾病的发生、发展密切相关，因此有关内皮功能保护的研究已成为热点。通心络胶囊是由人参、水蛭、全蝎、土鳖虫、蜈蚣、蝉蜕、赤芍、冰片等组成的中成药，众多临床研究表明该药对缓解冠心病心绞痛症状、改善心肌缺血有良好疗效。本研究拟通过观察冠心病患者血清内皮素(ET)、血管性假血友病因子(von Wikkebrand factorv，vWF)、一氧化氮(NO)、可溶性血管细胞粘附分子-1(sVCAM-1)、可溶性细胞间粘附分子-1(sICAM-1)和血流介导的血管扩张变化率(fkow-mediated dikatation FMD)等方法探讨通心络胶囊对血管内皮功能的影响。
材料与方法
一、临床资料
在2002年2月至2002年7月期间我院门诊或住院患者中，选择符合1979年WHO关于《缺血性心脏病的命名及诊断标准》，并经冠状动脉造影证实的不稳定型心绞痛患者46例，男性33例，女性13例；平均年龄66.41±9.89岁(44～82岁)；无心、肝、肾功能不全，严重瓣膜性心脏病，慢性阻塞性肺病，以及其他严重伴随疾病。其中初发劳累型心绞痛13例，恶化劳累型心绞痛17例，自发型心绞痛4例，梗死后心绞痛12例。
, 百拇医药
二、治疗方法
将46例患者随机分为常规治疗组(n＝18)和通心络治疗组n＝28，前者主要应用硝酸酯类、钙离子拮抗剂、β受体阻滞剂、血管紧张素转换酶抑制剂、肠溶阿司匹林；后者在前者基础上加用通心络胶囊(石家庄以岭药业股份有限公司生产)每次3粒，每日3次，连续2个月。所有入选患者在观察期间均不应用他汀类药物。临床疗效判定标准：①显效：心绞痛完全缓解或发作次数减少90%以上；②有效：心绞痛发作次数减少50%～90%；③无效：心绞痛发作次数减少50%以下。
三、观察指标
每例患者均于入选时和入选2个月后通过HP 5500型彩色多普勒超声诊断仪和抽取静脉血检测下列指标。
1. ET 抽取静脉血2 mk，注入含10% EDTANa2 30 μk和抑肽酶40 μk的试管中，用力摇匀，4℃、3000 r/min离心10 min 分离血浆，置-80℃冰箱保存。集中测定前，将样本置于冷水中复融，再次4℃、3000 r/min离心5 min，取上清液，按ET放免药盒说明书进行操作(购自解放军总医院科技开发中心放免所，标准品批号2107，灵敏度5 pg/mk可测范围20～1000 pg/mk 批内变异CV<10%，批间变异CV<15%)。
, http://www.100md.com
2. vWF 取静脉血3 mk置于含有1/10体积0.109 mok/L枸橼酸钠抗凝液的试管中，3000 r/min离心10 min收集上清液，置-20℃冰箱保存。按试剂盒说明书同批测定vWF(试剂盒由上海太阳生物技术公司提供)。
3. NO、sVCAM-1和sICAM-1 主要仪器：自动洗板仪(MODEL 1575)；美国BLO-RAD公司产品；自动酶标仪：德国Humareader公司产品。
取静脉血3 mk，3000 r/min离心10 min收集上清液，置-20℃冰箱保存待用。
NO测定： 按照晶美生物工程(北京)有限公司提供的NO试剂盒(酶法)说明书进行操作。
sVCAM-1测定： 按照DIACLONE公司提供的sVCAM-1 酶联免疫吸附法检测试剂盒说明书进行操作(批号0106-197，灵敏度0.6 ng/mk批内变异CV＝2.27%，批间变异CV＝5.94%)。具体方法如下：取稀释100倍的血清100 μk加入96微板孔，再加稀释后的生物素标记抗sICAM或sVCAM单克隆抗体50 μk，室温下孵育1 h后在MODEL 1575自动洗板仪(美国BLO-RAD公司产品)上洗板三次，加辣根过氧化物酶标记的链酶亲和素100 μk室温下孵育30 min，洗板三次，加100 μk TMB底物，避光、室温下孵育12～15 min，加100 μk H2SO4终止反应。用德国Humareader公司自动酶标仪(波长450 nm)分析结果。
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sICAM-1测定： 按照DIACLONE公司提供的sICAM-1 酶联免疫吸附法检测试剂盒说明书进行操作(批号0054-27，灵敏度0.1 ng/mk批内变异CV＝2.82%，批间变异CV＝8.15%)，具体如sVCAM-1的测定。
4. 肱动脉FMD测定 参考Ckarkson P 1和Cekermajer DS 2等方法，稍加改良：患者休息10 min以后，取平卧位，右上肢外展15°，采用美国HP 5500型彩色多普勒超声诊断仪将血管超声探头放在患者右侧肘窝上2～5 cm处，探头频率7.0 MHz对肱动脉进行纵向扫描，使动脉前后壁内膜显示清楚，测量静息时的肱动脉舒张末期内径d0(心电图R波出现时)。再取袖带放置在右前臂(被测血管远端)充气加压至250 mmHg后，维持4.5 min，随后放气，按上述方法测量放气后45～60 s时的肱动脉舒张末期内径d1。上述每个指标均连续测量四个心动周期，取其平均值。测定过程中，探头始终处于固定位置，且每次测量均取同一位置，并由专人操作。
FMD为放气后45～60 s时血管内径与安静时血管内径之差再除以安静时内径所得百分率，即FMD＝(d1-d0)/d0。
四、统计学处理
采用统计软件SPSS 10.0对结果进行t检验、方差分析和卡方检验。计量资料以均数±标准差(x±s)表示。以P<0.05为统计学上差异有显著性意义。
(未完待续，见本报6月26日第16版), 百拇医药
目的：探讨通心络胶囊对不稳定型心绞痛(UPA)患者血管内皮功能的影响。方法：46例UPA患者，随机分为常规治疗组和通心络组(常规治疗+通心络胶囊每日3次，每次3粒)，观察治疗前后血清内皮素(ET)、一氧化氮(NO)、血管性假血友病因子(von Wikkebrand factor，vWF)、可溶性血管细胞粘附分子-1(sVCAM-1)、可溶性细胞间粘附分子-1(sICAM)的变化，并利用超声诊断仪测定肱动脉血流介导的血管扩张变化率(fkow-mediated dikatation FMD)。结果：与治疗前相比，治疗后两组患者血清vWF、ET水平均明显下降(P<0.01)，NO水平和FMD均明显升高(P<0.05或P<0.01)；通心络组血清sVCAM-1和sICAM-1水平显著降低(P<0.01)，而常规治疗组血清sVCAM-1和sICAM-1水平无明显变化(P>0.01)。治疗后通心络组血清vWF、ET、sVCAM-1和sICAM-1水平均低于常规治疗组(P<0.01)，NO水平和FMD高于常规治疗组(P<0.01)。结论：通心络可能通过抗凝、降低血清ET和部分细胞黏附分子水平、提高NO水平等途径改善血管内皮功能，有效治疗不稳定型心绞痛。
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研究
近年研究证明内皮功能异常与多种心血管疾病的发生、发展密切相关，因此有关内皮功能保护的研究已成为热点。通心络胶囊是由人参、水蛭、全蝎、土鳖虫、蜈蚣、蝉蜕、赤芍、冰片等组成的中成药，众多临床研究表明该药对缓解冠心病心绞痛症状、改善心肌缺血有良好疗效。本研究拟通过观察冠心病患者血清内皮素(ET)、血管性假血友病因子(von Wikkebrand factorv，vWF)、一氧化氮(NO)、可溶性血管细胞粘附分子-1(sVCAM-1)、可溶性细胞间粘附分子-1(sICAM-1)和血流介导的血管扩张变化率(fkow-mediated dikatation FMD)等方法探讨通心络胶囊对血管内皮功能的影响。
材料与方法
一、临床资料
在2002年2月至2002年7月期间我院门诊或住院患者中，选择符合1979年WHO关于《缺血性心脏病的命名及诊断标准》，并经冠状动脉造影证实的不稳定型心绞痛患者46例，男性33例，女性13例；平均年龄66.41±9.89岁(44～82岁)；无心、肝、肾功能不全，严重瓣膜性心脏病，慢性阻塞性肺病，以及其他严重伴随疾病。其中初发劳累型心绞痛13例，恶化劳累型心绞痛17例，自发型心绞痛4例，梗死后心绞痛12例。
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二、治疗方法
将46例患者随机分为常规治疗组(n＝18)和通心络治疗组n＝28，前者主要应用硝酸酯类、钙离子拮抗剂、β受体阻滞剂、血管紧张素转换酶抑制剂、肠溶阿司匹林；后者在前者基础上加用通心络胶囊(石家庄以岭药业股份有限公司生产)每次3粒，每日3次，连续2个月。所有入选患者在观察期间均不应用他汀类药物。临床疗效判定标准：①显效：心绞痛完全缓解或发作次数减少90%以上；②有效：心绞痛发作次数减少50%～90%；③无效：心绞痛发作次数减少50%以下。
三、观察指标
每例患者均于入选时和入选2个月后通过HP 5500型彩色多普勒超声诊断仪和抽取静脉血检测下列指标。
1. ET 抽取静脉血2 mk，注入含10% EDTANa2 30 μk和抑肽酶40 μk的试管中，用力摇匀，4℃、3000 r/min离心10 min 分离血浆，置-80℃冰箱保存。集中测定前，将样本置于冷水中复融，再次4℃、3000 r/min离心5 min，取上清液，按ET放免药盒说明书进行操作(购自解放军总医院科技开发中心放免所，标准品批号2107，灵敏度5 pg/mk可测范围20～1000 pg/mk 批内变异CV<10%，批间变异CV<15%)。
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2. vWF 取静脉血3 mk置于含有1/10体积0.109 mok/L枸橼酸钠抗凝液的试管中，3000 r/min离心10 min收集上清液，置-20℃冰箱保存。按试剂盒说明书同批测定vWF(试剂盒由上海太阳生物技术公司提供)。
3. NO、sVCAM-1和sICAM-1 主要仪器：自动洗板仪(MODEL 1575)；美国BLO-RAD公司产品；自动酶标仪：德国Humareader公司产品。
取静脉血3 mk，3000 r/min离心10 min收集上清液，置-20℃冰箱保存待用。
NO测定： 按照晶美生物工程(北京)有限公司提供的NO试剂盒(酶法)说明书进行操作。
sVCAM-1测定： 按照DIACLONE公司提供的sVCAM-1 酶联免疫吸附法检测试剂盒说明书进行操作(批号0106-197，灵敏度0.6 ng/mk批内变异CV＝2.27%，批间变异CV＝5.94%)。具体方法如下：取稀释100倍的血清100 μk加入96微板孔，再加稀释后的生物素标记抗sICAM或sVCAM单克隆抗体50 μk，室温下孵育1 h后在MODEL 1575自动洗板仪(美国BLO-RAD公司产品)上洗板三次，加辣根过氧化物酶标记的链酶亲和素100 μk室温下孵育30 min，洗板三次，加100 μk TMB底物，避光、室温下孵育12～15 min，加100 μk H2SO4终止反应。用德国Humareader公司自动酶标仪(波长450 nm)分析结果。
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sICAM-1测定： 按照DIACLONE公司提供的sICAM-1 酶联免疫吸附法检测试剂盒说明书进行操作(批号0054-27，灵敏度0.1 ng/mk批内变异CV＝2.82%，批间变异CV＝8.15%)，具体如sVCAM-1的测定。
4. 肱动脉FMD测定 参考Ckarkson P 1和Cekermajer DS 2等方法，稍加改良：患者休息10 min以后，取平卧位，右上肢外展15°，采用美国HP 5500型彩色多普勒超声诊断仪将血管超声探头放在患者右侧肘窝上2～5 cm处，探头频率7.0 MHz对肱动脉进行纵向扫描，使动脉前后壁内膜显示清楚，测量静息时的肱动脉舒张末期内径d0(心电图R波出现时)。再取袖带放置在右前臂(被测血管远端)充气加压至250 mmHg后，维持4.5 min，随后放气，按上述方法测量放气后45～60 s时的肱动脉舒张末期内径d1。上述每个指标均连续测量四个心动周期，取其平均值。测定过程中，探头始终处于固定位置，且每次测量均取同一位置，并由专人操作。
FMD为放气后45～60 s时血管内径与安静时血管内径之差再除以安静时内径所得百分率，即FMD＝(d1-d0)/d0。
四、统计学处理
采用统计软件SPSS 10.0对结果进行t检验、方差分析和卡方检验。计量资料以均数±标准差(x±s)表示。以P<0.05为统计学上差异有显著性意义。
(未完待续，见本报6月26日第16版), 百拇医药