曹春林：痰热清注射液研究思路
一、痰热清注射液的组方原则
1.中医理论与“依证随方确认提取有效成分”原则的有机结合
痰热清注射液是治疗风温肺热病以痰热阻肺证为主的复方中药注射剂，具有清热解毒、化痰解痉的功能，处方由熊胆粉、山羊角、金银花、黄芩、连翘五味中药组成。中医热病中的风温肺热病临床症状以痰、热、痉为主，它是感受风热病毒所引起的，四季皆有，而以冬春两季多发，发病急、转化快，多数就诊时己转为里证为主，如不及时控制，则常出现生命危险。双黄连注射液虽有一定清热解毒的功效，但化痰解痉作用欠缺，而且清热作用也不强，为此，我们选用熊胆粉和山羊角加强清热化痰解痉等功效，此两味动物药是卫生部批准的新开发中药材。熊胆粉是用胆汁引流术收取人工饲养熊的胆汁干燥而得，其功效和成分与熊胆相同。药理实验证明，该药具有清热、抗炎、镇咳、解痉等作用，山羊角的功效和成分与羚羊角近似，具有清热解毒、平肝熄风等功用，其中主要成分为角蛋白经酸水解后所得的水解物，经药理实验证明具有显著的清热镇静及免疫作用。初步临床试验结果表明，本注射液在清热、化痰、解痉等方面均优于双黄连注射液，而且十分安全，尚未发现不良反应。
, 百拇医药
2.依证随方确定有效成分
如何保证既发挥中医药组方用药的长处，又使研制出的中药注射剂安全有效呢？我们在组方时，就考虑到哪些中药适合做注射剂，即药材中的有效成分必须研究清楚，这样就能依证随方确定有效成分。每种药材最好确认出一种有效成分，如果有两种或数种成分有较好的有效性，则应分别提取精制。据考查，发生不良反应或疗效不显著的中药注射剂，大多数是由于未确认准主要有效成分，工艺粗糙，未提取纯化而所致的。因此在提取过程中，要尽量提纯所需有效成分，尽量去除不需要的成分，才能按照注射剂的要求配制出安全有效的中药注射剂。下面是本方中每味药的有效成分：
熊胆粉——总熊胆粉(熊去氧胆酸和鹅去氧胆酸)；
山羊角——总氨基酸；
黄芩——黄芩苷为主的黄酮类成分；
金银花——绿原酸；
, 百拇医药
连翘——连翘苷。
我们分别以高效液相、氨基酸分析液、薄层扫描仪等先进精密分析仪器检测其含量。
3.各有效成分提取精制的创新
①熊胆粉尚无制备注射剂的报道，熊去氧胆酸过去只作利胆排石药，而且为口服。我们根据熊去氧胆酸和鹅去氧胆酸的理化性质和生物活性，不但列为本注射剂的主要成分，而且巧用其钠盐具有天然表面活性剂的作用，作为本注射剂的增溶剂，使注射剂的澄明度更佳，稳定性更好。
②山羊角所含的角质蛋白不溶于水，我们大胆采用酸水解法，制得可溶于水的水解物，在水解条件上进行了酸浓度、用量、水解时间的优选，选出了最佳工艺条件，使收率和纯度较高。
③金银花是花蕾，薄壁细胞多，质轻吸水量大，通过水煮提取带入杂质较多，我们用90℃热水浸提，改革石硫法，醇处理后的水溶液采用正丁醇萃取法减压回收溶剂后，残渣加水溶解，放置，滤过，水溶液采用喷雾干燥，这样改革后的工艺可使金银花提取物中绿原酸的含量提高近10倍。
, 百拇医药
④黄芩提取黄芩苷己有公认的成熟工艺，但我们经经验进一步证实，采用碱溶、精制、加醇结晶提取黄芩时，其溶液的PH值非常关键，如PH偏高，黄芩苷遇到乙醇会产生琥珀样的水合物沉淀，使黄芩苷大量丢失，收率显著降低。我们经多次试验，控制此工艺条件，可提得纯度好、收率高的黄芩甙。
⑤连翘采用成熟的果壳，即“老翘”的水提取液经浓缩至一定体积，离心，上清液以D101大孔树脂吸附水洗后，以低浓度醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，浓缩液亦采用正丁醇萃取，加水溶解后放置、喷雾干燥等工艺，使连翘提取物中连翘苷的含量大为提高，带入的杂质明显减少。
总之，在痰热清注射液5味药材提取精制的工艺中，均有技术创新之处，结合“依证随方确认提取有效成分”的原则，应用生物化学、植物化学等技术，使制得的注射剂有效成分含量高，达总固体物的60%以上，带入杂质少，达到了国家二类新药的要求。
二、痰热清采用了先进的提取设备
, http://www.100md.com
本项目在工艺和技术设备上有重大改进，应用现代制药技术、设备，使工艺更趋完美，符合现代中药产业化实施要求。
1.大孔树脂吸附和液-液萃取联用技术的应用
根据有效成分的理化性质，采用不同极性的树脂进行吸附和不同浓度的醇溶液进行洗脱。可从提取药液中有选择地吸附其中的有效成分，去除无效成分，使有效成分高度集中，再加上液—液萃取，使提取物仅为生药材的3%左右，而一般注射剂提取物均高于6%以上，这为减少杂质，减小剂量，稳定质量，制成现代剂型提供了保证。同时，采用大孔树脂吸附和液-液萃取技术，还能有效地去除药品中的重金属和其他离子，这对注射剂尤为重要。
2.喷雾干燥技术的应用
喷雾干燥技术在口服制剂中应用较多，其特点为：集混合、喷雾、干燥多功能为一体，直接将液态物料一步制成颗粒，提高溶解速度，保证药品疗效。而痰热清注射液在提取中也采用了喷雾干燥技术，在生产过程中，设备完全处于密闭负压下工作，有快速干燥，减少污染的特点，其各项指标均达到内控标准，优于单纯的常压干燥和减压干燥。
, 百拇医药
3.减压浓缩技术的应用
减压浓缩技术虽早有运用，但大多是用于低沸点溶剂的回收，而相对于高沸点溶剂的回收还是一种较新的工艺。此技术扩大了中药提取溶剂应用的范围，通过低温、低压下对溶剂的回收，避免了有效成分的破坏和有机溶剂的残留，保证了药品的疗效，减少副作用。
在中医理论和“依证随方确认提取有效成分”原则的指导下，应用大孔树脂吸附、液-液萃取、减压浓缩及喷雾干燥等现代制药技术后，使该项目产品的工艺技术水平突破了传统的水提醇沉或醇提水沉精制技术，有效成分含量大大提高，确保了产品的疗效和稳定性。这种方法为我国新药研制尤其是中药注射剂和其它二类药的研制开发提供了新的思路，能使最终的产品达到有效成分可测，杂质可控的目的。
三、痰热清注射液质量的先进性
1.先进的检测手段
, http://www.100md.com
中药注射剂指纹图谱是指中药注射剂经适当处理后采用一定的分析手段，得到能够标示该注射剂特性的共有峰的色谱或光谱图谱。痰热清是国家药监局成立后审批的采用中药注射剂指纹图谱控制产品质量的第一个产品。通过指纹图谱主要特征峰的面积或比例，从而使产品的质量得到了有效的控制，确保了中药注射剂质量的相对稳定，这也是中药产品最先进的质控手段，并与国外的质控标准接轨。
2.先进的检验设备
为确保痰热清的质量，企业配备了高效液相仪、薄层扫描仪、气相色谱仪、日本产紫外分光光度仪、十万分之一的光电分析天平等精密仪器，确保了检测数据的准确。
3.建立完善的质量管理体系
根据GMP要求，我们始终把痰热清的生产质量放在第一位，贯彻以人为本的质量管理模式，从原材料到成品出厂，层层把关，建立健全比较完善的质量管理体系，从根本上保证了痰热清的高品质和高稳定性。, http://www.100md.com(郭 明)
1.中医理论与“依证随方确认提取有效成分”原则的有机结合
痰热清注射液是治疗风温肺热病以痰热阻肺证为主的复方中药注射剂，具有清热解毒、化痰解痉的功能，处方由熊胆粉、山羊角、金银花、黄芩、连翘五味中药组成。中医热病中的风温肺热病临床症状以痰、热、痉为主，它是感受风热病毒所引起的，四季皆有，而以冬春两季多发，发病急、转化快，多数就诊时己转为里证为主，如不及时控制，则常出现生命危险。双黄连注射液虽有一定清热解毒的功效，但化痰解痉作用欠缺，而且清热作用也不强，为此，我们选用熊胆粉和山羊角加强清热化痰解痉等功效，此两味动物药是卫生部批准的新开发中药材。熊胆粉是用胆汁引流术收取人工饲养熊的胆汁干燥而得，其功效和成分与熊胆相同。药理实验证明，该药具有清热、抗炎、镇咳、解痉等作用，山羊角的功效和成分与羚羊角近似，具有清热解毒、平肝熄风等功用，其中主要成分为角蛋白经酸水解后所得的水解物，经药理实验证明具有显著的清热镇静及免疫作用。初步临床试验结果表明，本注射液在清热、化痰、解痉等方面均优于双黄连注射液，而且十分安全，尚未发现不良反应。
, 百拇医药
2.依证随方确定有效成分
如何保证既发挥中医药组方用药的长处，又使研制出的中药注射剂安全有效呢？我们在组方时，就考虑到哪些中药适合做注射剂，即药材中的有效成分必须研究清楚，这样就能依证随方确定有效成分。每种药材最好确认出一种有效成分，如果有两种或数种成分有较好的有效性，则应分别提取精制。据考查，发生不良反应或疗效不显著的中药注射剂，大多数是由于未确认准主要有效成分，工艺粗糙，未提取纯化而所致的。因此在提取过程中，要尽量提纯所需有效成分，尽量去除不需要的成分，才能按照注射剂的要求配制出安全有效的中药注射剂。下面是本方中每味药的有效成分：
熊胆粉——总熊胆粉(熊去氧胆酸和鹅去氧胆酸)；
山羊角——总氨基酸；
黄芩——黄芩苷为主的黄酮类成分；
金银花——绿原酸；
, 百拇医药
连翘——连翘苷。
我们分别以高效液相、氨基酸分析液、薄层扫描仪等先进精密分析仪器检测其含量。
3.各有效成分提取精制的创新
①熊胆粉尚无制备注射剂的报道，熊去氧胆酸过去只作利胆排石药，而且为口服。我们根据熊去氧胆酸和鹅去氧胆酸的理化性质和生物活性，不但列为本注射剂的主要成分，而且巧用其钠盐具有天然表面活性剂的作用，作为本注射剂的增溶剂，使注射剂的澄明度更佳，稳定性更好。
②山羊角所含的角质蛋白不溶于水，我们大胆采用酸水解法，制得可溶于水的水解物，在水解条件上进行了酸浓度、用量、水解时间的优选，选出了最佳工艺条件，使收率和纯度较高。
③金银花是花蕾，薄壁细胞多，质轻吸水量大，通过水煮提取带入杂质较多，我们用90℃热水浸提，改革石硫法，醇处理后的水溶液采用正丁醇萃取法减压回收溶剂后，残渣加水溶解，放置，滤过，水溶液采用喷雾干燥，这样改革后的工艺可使金银花提取物中绿原酸的含量提高近10倍。
, 百拇医药
④黄芩提取黄芩苷己有公认的成熟工艺，但我们经经验进一步证实，采用碱溶、精制、加醇结晶提取黄芩时，其溶液的PH值非常关键，如PH偏高，黄芩苷遇到乙醇会产生琥珀样的水合物沉淀，使黄芩苷大量丢失，收率显著降低。我们经多次试验，控制此工艺条件，可提得纯度好、收率高的黄芩甙。
⑤连翘采用成熟的果壳，即“老翘”的水提取液经浓缩至一定体积，离心，上清液以D101大孔树脂吸附水洗后，以低浓度醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，浓缩液亦采用正丁醇萃取，加水溶解后放置、喷雾干燥等工艺，使连翘提取物中连翘苷的含量大为提高，带入的杂质明显减少。
总之，在痰热清注射液5味药材提取精制的工艺中，均有技术创新之处，结合“依证随方确认提取有效成分”的原则，应用生物化学、植物化学等技术，使制得的注射剂有效成分含量高，达总固体物的60%以上，带入杂质少，达到了国家二类新药的要求。
二、痰热清采用了先进的提取设备
, http://www.100md.com
本项目在工艺和技术设备上有重大改进，应用现代制药技术、设备，使工艺更趋完美，符合现代中药产业化实施要求。
1.大孔树脂吸附和液-液萃取联用技术的应用
根据有效成分的理化性质，采用不同极性的树脂进行吸附和不同浓度的醇溶液进行洗脱。可从提取药液中有选择地吸附其中的有效成分，去除无效成分，使有效成分高度集中，再加上液—液萃取，使提取物仅为生药材的3%左右，而一般注射剂提取物均高于6%以上，这为减少杂质，减小剂量，稳定质量，制成现代剂型提供了保证。同时，采用大孔树脂吸附和液-液萃取技术，还能有效地去除药品中的重金属和其他离子，这对注射剂尤为重要。
2.喷雾干燥技术的应用
喷雾干燥技术在口服制剂中应用较多，其特点为：集混合、喷雾、干燥多功能为一体，直接将液态物料一步制成颗粒，提高溶解速度，保证药品疗效。而痰热清注射液在提取中也采用了喷雾干燥技术，在生产过程中，设备完全处于密闭负压下工作，有快速干燥，减少污染的特点，其各项指标均达到内控标准，优于单纯的常压干燥和减压干燥。
, 百拇医药
3.减压浓缩技术的应用
减压浓缩技术虽早有运用，但大多是用于低沸点溶剂的回收，而相对于高沸点溶剂的回收还是一种较新的工艺。此技术扩大了中药提取溶剂应用的范围，通过低温、低压下对溶剂的回收，避免了有效成分的破坏和有机溶剂的残留，保证了药品的疗效，减少副作用。
在中医理论和“依证随方确认提取有效成分”原则的指导下，应用大孔树脂吸附、液-液萃取、减压浓缩及喷雾干燥等现代制药技术后，使该项目产品的工艺技术水平突破了传统的水提醇沉或醇提水沉精制技术，有效成分含量大大提高，确保了产品的疗效和稳定性。这种方法为我国新药研制尤其是中药注射剂和其它二类药的研制开发提供了新的思路，能使最终的产品达到有效成分可测，杂质可控的目的。
三、痰热清注射液质量的先进性
1.先进的检测手段
, http://www.100md.com
中药注射剂指纹图谱是指中药注射剂经适当处理后采用一定的分析手段，得到能够标示该注射剂特性的共有峰的色谱或光谱图谱。痰热清是国家药监局成立后审批的采用中药注射剂指纹图谱控制产品质量的第一个产品。通过指纹图谱主要特征峰的面积或比例，从而使产品的质量得到了有效的控制，确保了中药注射剂质量的相对稳定，这也是中药产品最先进的质控手段，并与国外的质控标准接轨。
2.先进的检验设备
为确保痰热清的质量，企业配备了高效液相仪、薄层扫描仪、气相色谱仪、日本产紫外分光光度仪、十万分之一的光电分析天平等精密仪器，确保了检测数据的准确。
3.建立完善的质量管理体系
根据GMP要求，我们始终把痰热清的生产质量放在第一位，贯彻以人为本的质量管理模式，从原材料到成品出厂，层层把关，建立健全比较完善的质量管理体系，从根本上保证了痰热清的高品质和高稳定性。, http://www.100md.com(郭 明)