头孢地尼(CI-983, FK482) 对质粒介导的广谱β-内酰胺酶的稳定性
摘要
从大肠杆菌原始临床分离株的接合株中，我们纯化了14种质粒编码的广谱β-内酰胺酶。以氨苄青霉素、羧苄青霉素、头孢噻啶、头孢氨苄、头孢呋辛、头孢克肟、头孢地尼、头孢他啶和头孢噻肟作为底物，加入这些酶中的8种以及窄谱β-内酰胺酶TEM-1，分别测定以上各种抗生素的最大反应速率(Vmax)、米氏常数(Km)和相对效能(Vmax/Km)。还测定了另外6种酶对氨苄青霉素、羧苄青霉素、头孢噻啶、头孢氨苄、头孢呋辛、头孢克肟、头孢地尼、头孢他啶和头孢噻肟的相对水解率。对于所有被试验的酶，头孢地尼的Vmax/Km或相对水解率等于或者低于氨苄青霉素、头孢噻啶、头孢氨苄和头孢噻肟的值。总之，头孢地尼对这15种所试验的β-内酰胺酶比头孢呋辛和头孢克肟更加稳定。
目前，口服头孢菌素类抗生素种类较少。早期的口服头孢菌素，如头孢拉定和头孢氨苄，对某些感染有效，但是，它们均易被β-内酰胺酶水解；另外一种类似的药物，如头孢克洛，对流感嗜血杆菌的活性较强，但也容易被β-内酰胺酶水解。因为这些头孢菌素均易被许多β-内酰胺酶水解，所以都被归于所谓的“第一代”头孢菌素。头孢地尼是一种带有一个C-3乙烯基的氨基噻唑羟亚氨基头孢菌素，这一结构使得它适合口服给药。
, http://www.100md.com
Neu等人的一项研究分析了一系列β-内酰胺类抗生素的最小抑菌浓度，结果显示头孢地尼有特有的抵抗β-内酰胺酶水解的能力。本研究观察了头孢地尼和其他头孢菌素类对质粒编码的广谱β-内酰胺酶的稳定性。这些酶也能水解后来开发的广谱头孢菌素如头孢他啶和头孢噻肟。本研究中所试验的β-内酰胺酶是TEM-1、TEM-3、TEM-4、TEM-5、TEM-7、TEM-10、TEM-E1、TEM-E2、TEM-E3、TEM-E4、SHV-2、HV-3、SHV-5和BIL-1。这一系列β-内酰胺酶中至少包括了每组广谱β-内酰胺酶中的各一种。
结果
一、 细菌菌株
用于稳定性分析的β-内酰胺酶分离自大肠杆菌菌株(见表1)。
表1. 本研究所用的产β-内酰胺酶的菌株
, 百拇医药
菌株
质粒编码
β-内酰胺酶
大肠杆菌K-12
J53-2
TEM-1
大肠杆菌K-12
C600
TEM-3
大肠杆菌K-12
J53-2
TEM-4
大肠杆菌K-12
, 百拇医药
J53-2
TEM-5
大肠杆菌K-12
J53-2
TEM-6
大肠杆菌
BM694
TEM-7
大肠杆菌K-12
J53-2
TEM-10
大肠杆菌K-12
, 百拇医药 J53-2
TEM-E1
大肠杆菌K-12
J53-2
TEM-E2
大肠杆菌K-12
J53-2
TEM-E3
大肠杆菌K-12
J53-2
TEM-E4
大肠杆菌K-12
, 百拇医药 J53-2
SHV-2
大肠杆菌K-12
J53-2
SHV-3
大肠杆菌K-12
J53-2
SHV-5
大肠杆菌K-12
J53-2
BIL-1
二、β-内酰胺酶的制备
, 百拇医药 β-内酰胺酶样品是从1 L在37℃下的营养肉冻培养基中过夜生长的菌液中制备的。经过在4℃下以6 000 g离心15 min而采集细胞。所得的小颗粒在25 mM的磷酸钠缓冲液(pH为7.0)中洗涤，然后再次进行离心。最后所得的小颗粒在1 mk的25 mM的磷酸钠缓冲液(pH为7.0)中再悬浮后，再在0℃下进行两次各30s的超声(8 μm)照射，在这两次超声照射之间有1 min的冷却过程。所得的溶菌液在4℃下以32 000 g离心30 min。将所得的β-内酰胺酶的粗产物放入一个Sephadex G-75层析柱(2 cm2×90 cm)，用25 mM的磷酸钠缓冲液(pH为7.0)在15 mk/h下洗脱。收集最大的β-内酰胺酶部分，用于动力学测定，并对制得的β-内酰胺酶的一致性采用等电位聚焦的方法进行分析。
三、β-内酰胺酶分析
采用Perkin-Ekmer Lambda2型分光光度仪，根据β-内酰胺类抗生素底物光吸收度的减少量确定β-内酰胺酶的活性。
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四、底物的测定
通过测定8种β-内酰胺类抗生素在固定浓度(0.1 mM)时的水解 确定β-内酰胺酶的底物分布。水解率以与氨苄青霉素的相对值表示。
五、Vmax、Km和相对效能(Vmax/Km)的测定
在0.01 mM和0.1 mM的浓度之间测定头孢菌素的水解率；青霉素的水解率则在0.1 mM和1 mM的浓度之间测定。然后用Lineweaver-Burk方法计算β-内酰胺类抗生素被β-内酰胺酶水解的最大反应速率(Vmax)、米氏常数(Km)。结果以相对效能(Vmax/Km)的形式表示，并用Bush和Sykes的方法用氨苄青霉素进行标准化。
所有β-内酰胺酶都进行了纯化，且每种纯化的酶都具有一个等电点(PI)值，该PI值与文献报道一致。没有存在染色体β-内酰胺酶的证据。Vmax表示该酶对一种结合于酶的活性部位的药物的水解能力。对9种β-内酰胺类底物和8种广谱β-内酰胺酶(见表2)及窄谱的β-内酰胺酶TEM-1(作为对照)，我们都获得了其相对于氨苄青霉素的Vmax值。头孢地尼的Vmax值总是比氨苄青霉素和头孢噻啶的值低。这些较低的Vmax值表明，与其他表2中显示的试验药物相比，头孢地尼对于β-内酰胺酶的水解作用更稳定。
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表2. 8种广谱β-内酰胺酶对9种β-内酰胺类抗生素的相对Vmax值
β-内酰
胺酶
相对Vmax值*
氨苄
青霉素
羧苄
青霉素
头孢
噻啶
头孢
氨苄
, 百拇医药
头孢
呋辛
头孢
克肟
头孢
地尼
头孢
他啶
头孢
噻肟
TEM-1(对照)
100
11
, http://www.100md.com 32
0.72
UM
UM
UM
UM
0.06
TEM-3
100
…
454
151
95
284
, 百拇医药
21
9.1
536
TEM-5
100
51
410
37
102
124
96
135
26
, 百拇医药 TEM-10
100
48
58
3.0
2.0
12
1.5
30
2.2
TEM-E2
100
32
, 百拇医药 87
3.19
UM
13
0.23
0.87
0.84
TEM-E3
100
51
61
5.3
95
, 百拇医药 28
2.4
44
1.9
TEM-E4
100
38
98
12.5
1.3
0.37
4.2
6.3
, 百拇医药 2.1
SHV-3
100
15
119
11.2
5.6
2.1
0.5
1.0
12
BIL-1
UM
, 百拇医药 UM
50
100
UM
UM
UM
UM
UM
注： UM：由于水解率过低而无法测定；… ：未测定；：为与氨苄青霉素的值相比较所得的值，但 BIL-1例外，后者是与nitrocefin的值相比较所得的值。
水解率只能在药物与酶结合后才能测定酶的活性。Km值可以说明底物与酶结合的亲和力：此值越大，则对底物的亲和力越小。8种广谱β-内酰胺酶对9种β-内酰胺类抗生素的Km值见表3。
, 百拇医药
表3. 8种广谱β-内酰胺酶对9种β-内酰胺类抗生素的Km值
β-内酰
胺酶
Km值(μM)
氨苄
青霉素
羧苄
青霉素
头孢
噻啶
头孢
氨苄
, 百拇医药
头孢
呋辛
头孢
克肟
头孢
地尼
头孢
他啶
头孢
噻肟
TEM-1(对照)
167
100
, http://www.100md.com 167
166
UM
UM
UM
UM
286
TEM-3
63
…
100
333
250
250
, 百拇医药
118
167
11
TEM-5
69
38
143
77
250
125
200
330
21
, 百拇医药 TEM-10
111
39
100
200
167
66
200
100
15
TEM-E2
119
83
, 百拇医药 500
333
UM
1000
77
500
181
TEM-E3
91
38
91
333
250
, 百拇医药 250
118
167
11
TEM-E4
29
72
80
200
200
17
500
1500
, 百拇医药 77
SHV-3
83
111
59
30
500
100
16.7
500
25
BIL-1
UM
, 百拇医药 UM
166
118
UM
UM
UM
UM
UM
注： UM：由于水解率过低而无法测定；…
：
对于一些酶来说，头孢地尼的Km值比试验中所用的其他药物高，但对另外一些酶则情况刚好相反。总的来说，酶对头孢地尼的亲和力是较低的。
相对效能(Vmax/Km)则将两个参数都计算在内。如果Vmax 高或酶对药物的亲和力很高(Km低)，该酶的效能则较高。相对效能测定结果(见表4)表明，所有酶水解头孢地尼的效能均比水解氨苄青霉素、羧苄青霉素、头孢噻啶、头孢氨苄和头孢噻肟的效能低。在多数情况下，头孢地尼比头孢克肟稳定。
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表4. 8种广谱β-内酰胺酶水解9种β-内酰胺类抗生素的
相对效能(Vmax/Km)
β-内酰
胺酶
相对效能(Vmax/Km)*
氨苄
青霉素
羧苄
青霉素
头孢
噻啶
头孢
, http://www.100md.com
氨苄
头孢
呋辛
头孢
克肟
头孢
地尼
头孢
他啶
头孢
噻肟
TEM-1(对照)
100
, 百拇医药 18
23
0.87
UM
UM
UM
UM
0.04
TEM-3
100
…
285
38
48
, 百拇医药
89
27
7.4
269
TEM-5
100
93
198
37
28
77
37
28
, http://www.100md.com 85
TEM-10
100
137
64
1.7
1.3
12
0.83
33
16
TEM-E2
100
, 百拇医药 32
20
1.1
UM
0.37
0.36
0.21
0.55
TEM-E3
100
122
61
5.7
, 百拇医药
1.0
31
5.7
24
16
TEM-E4
100
15
36
1.84
0.19
0.65
0.25
, 百拇医药
0.12
0.79
SHV-3
100
11
168
31
34
1.76
1.8
0.17
38
BIL-1
, 百拇医药
UM
UM
60
54
UM
UM
UM
UM
UM
注：UM：由于水解率过低而无法测定；… ：未测定；：与氨苄青霉素的值相比较所得的值，但BIL-1例外，后者是与头孢氨苄的值相比较所得的值。
我们还测定了固定底物浓度(头孢菌素类浓度为10-4M，青霉素类浓度为10-3M)的相对水解率 (见表5)，这些值虽然比表1所示的Vmax值准确度低，但是它们说明酶有水解这些底物的能力。对于表5所列的所有β-内酰胺酶，头孢地尼都比氨苄青霉素、头孢噻啶、头孢氨苄、头孢呋辛、头孢噻肟或头孢克肟稳定。而且，对于所试验的6种β-内酰胺酶中的3种，头孢地尼的相对水解率均比头孢他啶低。结果强烈地支持表2中所显示的：与大多数头孢菌素相比，头孢地尼是一种对广谱β-内酰胺酶极其稳定的底物。
, http://www.100md.com
5. 6种广谱β-内酰胺酶水解8种β-内酰胺类抗生素的相对水解率
β-内
酰胺酶
相对水解率*
氨苄
青霉素
头孢
噻啶
头孢
氨苄
头孢
呋辛
, 百拇医药
头孢
克肟
头孢
地尼
头孢
他啶
头孢
噻肟
TEM-4
100
114
83
19
21
, 百拇医药
8.8
34
39
TEM-6
100
180
19
7.7
9.5
1.8
19
13
TEM-7
, 百拇医药
100
59
1.5
0.7
0.8
0.44
1.5
2.2
TEM-E1
100
123
26
5.4
, 百拇医药
12
5.3
2.0
5.8
SHV-2
100
55
11
5.4
1.8
0.63
UM
1.1
, 百拇医药
SHV-5
100
34
25
3.8
3.9
1.1
5.0
14
注：UM：由于水解率过低而无法测定；*：与氨苄青霉素的值相比较所得的值。
讨论
在本研究中，我们至少检测了8种不同的β-内酰胺类抗生素对于14种部分纯化的广谱β-内酰胺酶以及窄谱β-内酰胺酶TEM-1的稳定性。表4和表5的结果表明，总的来说，头孢地尼对于β-内酰胺酶的稳定性比氨苄青霉素、头孢噻啶、头孢氨苄和头孢噻肟高。而且，在表4和表5中列出的128个稳定性值中，只有13个值表现为其他化合物比头孢地尼更稳定(即数值较低)。在大部分情况下，对于15种β-内酰胺酶，头孢地尼都比头孢呋辛或头孢克肟更稳定。在所有经测试的β-内酰胺类抗生素中，头孢地尼是对TEM-6，TEM-7和TEM-10以及SHV-5酶最稳定的化合物。, http://www.100md.com(爱丁堡大学医学院医学微生物系 D.J.PAPNE和S.G.B.AMYES)
从大肠杆菌原始临床分离株的接合株中，我们纯化了14种质粒编码的广谱β-内酰胺酶。以氨苄青霉素、羧苄青霉素、头孢噻啶、头孢氨苄、头孢呋辛、头孢克肟、头孢地尼、头孢他啶和头孢噻肟作为底物，加入这些酶中的8种以及窄谱β-内酰胺酶TEM-1，分别测定以上各种抗生素的最大反应速率(Vmax)、米氏常数(Km)和相对效能(Vmax/Km)。还测定了另外6种酶对氨苄青霉素、羧苄青霉素、头孢噻啶、头孢氨苄、头孢呋辛、头孢克肟、头孢地尼、头孢他啶和头孢噻肟的相对水解率。对于所有被试验的酶，头孢地尼的Vmax/Km或相对水解率等于或者低于氨苄青霉素、头孢噻啶、头孢氨苄和头孢噻肟的值。总之，头孢地尼对这15种所试验的β-内酰胺酶比头孢呋辛和头孢克肟更加稳定。
目前，口服头孢菌素类抗生素种类较少。早期的口服头孢菌素，如头孢拉定和头孢氨苄，对某些感染有效，但是，它们均易被β-内酰胺酶水解；另外一种类似的药物，如头孢克洛，对流感嗜血杆菌的活性较强，但也容易被β-内酰胺酶水解。因为这些头孢菌素均易被许多β-内酰胺酶水解，所以都被归于所谓的“第一代”头孢菌素。头孢地尼是一种带有一个C-3乙烯基的氨基噻唑羟亚氨基头孢菌素，这一结构使得它适合口服给药。
, http://www.100md.com
Neu等人的一项研究分析了一系列β-内酰胺类抗生素的最小抑菌浓度，结果显示头孢地尼有特有的抵抗β-内酰胺酶水解的能力。本研究观察了头孢地尼和其他头孢菌素类对质粒编码的广谱β-内酰胺酶的稳定性。这些酶也能水解后来开发的广谱头孢菌素如头孢他啶和头孢噻肟。本研究中所试验的β-内酰胺酶是TEM-1、TEM-3、TEM-4、TEM-5、TEM-7、TEM-10、TEM-E1、TEM-E2、TEM-E3、TEM-E4、SHV-2、HV-3、SHV-5和BIL-1。这一系列β-内酰胺酶中至少包括了每组广谱β-内酰胺酶中的各一种。
结果
一、 细菌菌株
用于稳定性分析的β-内酰胺酶分离自大肠杆菌菌株(见表1)。
表1. 本研究所用的产β-内酰胺酶的菌株
, 百拇医药
菌株
质粒编码
β-内酰胺酶
大肠杆菌K-12
J53-2
TEM-1
大肠杆菌K-12
C600
TEM-3
大肠杆菌K-12
J53-2
TEM-4
大肠杆菌K-12
, 百拇医药
J53-2
TEM-5
大肠杆菌K-12
J53-2
TEM-6
大肠杆菌
BM694
TEM-7
大肠杆菌K-12
J53-2
TEM-10
大肠杆菌K-12
, 百拇医药 J53-2
TEM-E1
大肠杆菌K-12
J53-2
TEM-E2
大肠杆菌K-12
J53-2
TEM-E3
大肠杆菌K-12
J53-2
TEM-E4
大肠杆菌K-12
, 百拇医药 J53-2
SHV-2
大肠杆菌K-12
J53-2
SHV-3
大肠杆菌K-12
J53-2
SHV-5
大肠杆菌K-12
J53-2
BIL-1
二、β-内酰胺酶的制备
, 百拇医药 β-内酰胺酶样品是从1 L在37℃下的营养肉冻培养基中过夜生长的菌液中制备的。经过在4℃下以6 000 g离心15 min而采集细胞。所得的小颗粒在25 mM的磷酸钠缓冲液(pH为7.0)中洗涤，然后再次进行离心。最后所得的小颗粒在1 mk的25 mM的磷酸钠缓冲液(pH为7.0)中再悬浮后，再在0℃下进行两次各30s的超声(8 μm)照射，在这两次超声照射之间有1 min的冷却过程。所得的溶菌液在4℃下以32 000 g离心30 min。将所得的β-内酰胺酶的粗产物放入一个Sephadex G-75层析柱(2 cm2×90 cm)，用25 mM的磷酸钠缓冲液(pH为7.0)在15 mk/h下洗脱。收集最大的β-内酰胺酶部分，用于动力学测定，并对制得的β-内酰胺酶的一致性采用等电位聚焦的方法进行分析。
三、β-内酰胺酶分析
采用Perkin-Ekmer Lambda2型分光光度仪，根据β-内酰胺类抗生素底物光吸收度的减少量确定β-内酰胺酶的活性。
, http://www.100md.com
四、底物的测定
通过测定8种β-内酰胺类抗生素在固定浓度(0.1 mM)时的水解 确定β-内酰胺酶的底物分布。水解率以与氨苄青霉素的相对值表示。
五、Vmax、Km和相对效能(Vmax/Km)的测定
在0.01 mM和0.1 mM的浓度之间测定头孢菌素的水解率；青霉素的水解率则在0.1 mM和1 mM的浓度之间测定。然后用Lineweaver-Burk方法计算β-内酰胺类抗生素被β-内酰胺酶水解的最大反应速率(Vmax)、米氏常数(Km)。结果以相对效能(Vmax/Km)的形式表示，并用Bush和Sykes的方法用氨苄青霉素进行标准化。
所有β-内酰胺酶都进行了纯化，且每种纯化的酶都具有一个等电点(PI)值，该PI值与文献报道一致。没有存在染色体β-内酰胺酶的证据。Vmax表示该酶对一种结合于酶的活性部位的药物的水解能力。对9种β-内酰胺类底物和8种广谱β-内酰胺酶(见表2)及窄谱的β-内酰胺酶TEM-1(作为对照)，我们都获得了其相对于氨苄青霉素的Vmax值。头孢地尼的Vmax值总是比氨苄青霉素和头孢噻啶的值低。这些较低的Vmax值表明，与其他表2中显示的试验药物相比，头孢地尼对于β-内酰胺酶的水解作用更稳定。
, http://www.100md.com
表2. 8种广谱β-内酰胺酶对9种β-内酰胺类抗生素的相对Vmax值
β-内酰
胺酶
相对Vmax值*
氨苄
青霉素
羧苄
青霉素
头孢
噻啶
头孢
氨苄
, 百拇医药
头孢
呋辛
头孢
克肟
头孢
地尼
头孢
他啶
头孢
噻肟
TEM-1(对照)
100
11
, http://www.100md.com 32
0.72
UM
UM
UM
UM
0.06
TEM-3
100
…
454
151
95
284
, 百拇医药
21
9.1
536
TEM-5
100
51
410
37
102
124
96
135
26
, 百拇医药 TEM-10
100
48
58
3.0
2.0
12
1.5
30
2.2
TEM-E2
100
32
, 百拇医药 87
3.19
UM
13
0.23
0.87
0.84
TEM-E3
100
51
61
5.3
95
, 百拇医药 28
2.4
44
1.9
TEM-E4
100
38
98
12.5
1.3
0.37
4.2
6.3
, 百拇医药 2.1
SHV-3
100
15
119
11.2
5.6
2.1
0.5
1.0
12
BIL-1
UM
, 百拇医药 UM
50
100
UM
UM
UM
UM
UM
注： UM：由于水解率过低而无法测定；… ：未测定；：为与氨苄青霉素的值相比较所得的值，但 BIL-1例外，后者是与nitrocefin的值相比较所得的值。
水解率只能在药物与酶结合后才能测定酶的活性。Km值可以说明底物与酶结合的亲和力：此值越大，则对底物的亲和力越小。8种广谱β-内酰胺酶对9种β-内酰胺类抗生素的Km值见表3。
, 百拇医药
表3. 8种广谱β-内酰胺酶对9种β-内酰胺类抗生素的Km值
β-内酰
胺酶
Km值(μM)
氨苄
青霉素
羧苄
青霉素
头孢
噻啶
头孢
氨苄
, 百拇医药
头孢
呋辛
头孢
克肟
头孢
地尼
头孢
他啶
头孢
噻肟
TEM-1(对照)
167
100
, http://www.100md.com 167
166
UM
UM
UM
UM
286
TEM-3
63
…
100
333
250
250
, 百拇医药
118
167
11
TEM-5
69
38
143
77
250
125
200
330
21
, 百拇医药 TEM-10
111
39
100
200
167
66
200
100
15
TEM-E2
119
83
, 百拇医药 500
333
UM
1000
77
500
181
TEM-E3
91
38
91
333
250
, 百拇医药 250
118
167
11
TEM-E4
29
72
80
200
200
17
500
1500
, 百拇医药 77
SHV-3
83
111
59
30
500
100
16.7
500
25
BIL-1
UM
, 百拇医药 UM
166
118
UM
UM
UM
UM
UM
注： UM：由于水解率过低而无法测定；…
：
对于一些酶来说，头孢地尼的Km值比试验中所用的其他药物高，但对另外一些酶则情况刚好相反。总的来说，酶对头孢地尼的亲和力是较低的。
相对效能(Vmax/Km)则将两个参数都计算在内。如果Vmax 高或酶对药物的亲和力很高(Km低)，该酶的效能则较高。相对效能测定结果(见表4)表明，所有酶水解头孢地尼的效能均比水解氨苄青霉素、羧苄青霉素、头孢噻啶、头孢氨苄和头孢噻肟的效能低。在多数情况下，头孢地尼比头孢克肟稳定。
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表4. 8种广谱β-内酰胺酶水解9种β-内酰胺类抗生素的
相对效能(Vmax/Km)
β-内酰
胺酶
相对效能(Vmax/Km)*
氨苄
青霉素
羧苄
青霉素
头孢
噻啶
头孢
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氨苄
头孢
呋辛
头孢
克肟
头孢
地尼
头孢
他啶
头孢
噻肟
TEM-1(对照)
100
, 百拇医药 18
23
0.87
UM
UM
UM
UM
0.04
TEM-3
100
…
285
38
48
, 百拇医药
89
27
7.4
269
TEM-5
100
93
198
37
28
77
37
28
, http://www.100md.com 85
TEM-10
100
137
64
1.7
1.3
12
0.83
33
16
TEM-E2
100
, 百拇医药 32
20
1.1
UM
0.37
0.36
0.21
0.55
TEM-E3
100
122
61
5.7
, 百拇医药
1.0
31
5.7
24
16
TEM-E4
100
15
36
1.84
0.19
0.65
0.25
, 百拇医药
0.12
0.79
SHV-3
100
11
168
31
34
1.76
1.8
0.17
38
BIL-1
, 百拇医药
UM
UM
60
54
UM
UM
UM
UM
UM
注：UM：由于水解率过低而无法测定；… ：未测定；：与氨苄青霉素的值相比较所得的值，但BIL-1例外，后者是与头孢氨苄的值相比较所得的值。
我们还测定了固定底物浓度(头孢菌素类浓度为10-4M，青霉素类浓度为10-3M)的相对水解率 (见表5)，这些值虽然比表1所示的Vmax值准确度低，但是它们说明酶有水解这些底物的能力。对于表5所列的所有β-内酰胺酶，头孢地尼都比氨苄青霉素、头孢噻啶、头孢氨苄、头孢呋辛、头孢噻肟或头孢克肟稳定。而且，对于所试验的6种β-内酰胺酶中的3种，头孢地尼的相对水解率均比头孢他啶低。结果强烈地支持表2中所显示的：与大多数头孢菌素相比，头孢地尼是一种对广谱β-内酰胺酶极其稳定的底物。
, http://www.100md.com
5. 6种广谱β-内酰胺酶水解8种β-内酰胺类抗生素的相对水解率
β-内
酰胺酶
相对水解率*
氨苄
青霉素
头孢
噻啶
头孢
氨苄
头孢
呋辛
, 百拇医药
头孢
克肟
头孢
地尼
头孢
他啶
头孢
噻肟
TEM-4
100
114
83
19
21
, 百拇医药
8.8
34
39
TEM-6
100
180
19
7.7
9.5
1.8
19
13
TEM-7
, 百拇医药
100
59
1.5
0.7
0.8
0.44
1.5
2.2
TEM-E1
100
123
26
5.4
, 百拇医药
12
5.3
2.0
5.8
SHV-2
100
55
11
5.4
1.8
0.63
UM
1.1
, 百拇医药
SHV-5
100
34
25
3.8
3.9
1.1
5.0
14
注：UM：由于水解率过低而无法测定；*：与氨苄青霉素的值相比较所得的值。
讨论
在本研究中，我们至少检测了8种不同的β-内酰胺类抗生素对于14种部分纯化的广谱β-内酰胺酶以及窄谱β-内酰胺酶TEM-1的稳定性。表4和表5的结果表明，总的来说，头孢地尼对于β-内酰胺酶的稳定性比氨苄青霉素、头孢噻啶、头孢氨苄和头孢噻肟高。而且，在表4和表5中列出的128个稳定性值中，只有13个值表现为其他化合物比头孢地尼更稳定(即数值较低)。在大部分情况下，对于15种β-内酰胺酶，头孢地尼都比头孢呋辛或头孢克肟更稳定。在所有经测试的β-内酰胺类抗生素中，头孢地尼是对TEM-6，TEM-7和TEM-10以及SHV-5酶最稳定的化合物。, http://www.100md.com(爱丁堡大学医学院医学微生物系 D.J.PAPNE和S.G.B.AMYES)