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编号:10493821
槲皮素对重组人蛋白激酶CK2全酶的抑制作用及其动力学分析
http://www.100md.com 广东医学院生物化学与分子生物学研究所 广东湛江524023 刘新光;梁念慈
蛋白激酶CK2|重组蛋白|全酶|槲皮素|IC50|酶动力学


    参见附件(124kb)。

     广东医学院生物化学与分子生物学研究所 广东湛江524023 刘新光;梁念慈

    关键词:蛋白激酶CK2;重组蛋白;全酶;槲皮素;IC50;酶动力学

    摘要:摘 要:目的 观察槲皮素对重组人蛋白激酶CK2全酶的直接作用及其酶动力学机制。方法 利用基因工程克隆、表达和纯化获得重组人蛋白激酶CK2α和β亚基,在体外等摩尔数混合构成有最大生物活性的重组CK2全酶,在不同条件下测定CK2的活性。CK2活性通过测定转移到CK2底物上的[γ-32P]ATP的[32P]放射活度来检测。结果 重组人蛋白激酶CK2是一种Ca2+、cAMP和cGMP等第二信使非依赖性蛋白激酶,与天然CK2的性质一致。槲皮素对重组人CK2全酶具有很强的抑制作用,IC50为522nmol/L,抑制作用大于CK2已知抑制剂DRB和A3。槲皮素对重组人蛋白激酶CK2的动力学研究表明:它与ATP和酪蛋白分别呈竞争性和非竞争性抑制作用。结论 槲皮素是CK2有效抑制剂,该抑制作用可能是槲皮素抗肿瘤作用又一分子机制,为今后筛选更有效的CK2抑制剂提供了一种较为简便的筛选方法。

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