外周血造血干细胞的采集与加工(6)
采集质量的发展方向。
由于在血细胞分离过程中产生了大量单核细胞，避免了用逐渐增加密度的离心方法。红细胞经细胞保护后也不能存活，输注了溶血的移植后常可见血红蛋白尿。这并不严重。常不能保证在冷冻前的采集过程，就已有大量红细胞减少。血小板可在以后的处理过程中引起细胞聚集，可由低速离心机去除。
深度处理：进一步处理
外周血HPC可通过多种方法进一步处理，通过应用有效地CD34+细胞富集的方法或通过改变动员的方式及时向，肿病细胞可从自移植中被清除掉。这些干细胞可直接输注，扩增或作为基因治疗的靶细胞。在同种移植中，为了预防GVHD发生需去除T细胞，通过有效地清除或HPC富集方法都可取得相似的效果。
有很多进一步处理的方法已在骨髓移植物中应用。包括有少数的细胞数总量及不同的细胞组成。就象血小板和粒细胞前体持续数天的采集，需决定是否分离采集，时应储存，合用然后加工。
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自体移植的采集
在临床上用HPC做移植物行自体移植时，其内所含相关的肿病细胞是复发的来源。现仍有许多未解决问题。通过回顾性地总结基因标记及净化研究发现，骨髓净化后的肿瘤患者比未净化者延长可无病生存期从而支持了这种遐说。而另有一些病人却未能显示出净化的益处，如在接受无肿痛细胞或明显受污染的移植物后其疾病复发率与原样本比较无差异。目前一致倾向于最好要净化或含有混入的肿痛细胞尽量少的移植物，而许多肿痛侵犯骨髓的机会要高于外周血，因此血液来源的移植物是最有吸引力的选择。用骨髓和外周血HPC样本进行研究，也证实了这个观点，虽然病期和(肿瘤)污染发生率之间，还没有单纯的关系，：但还是有从没被发现而有潜在的骨髓侵犯的患者身上采集的移植物中存有肿痛污染的报告。这些结果须仔细分析，因为它们严格依靠使用分析方法的敏感性和重复性，阴性结果只能表明，肿瘤目前在一个较低水平，还不能敏感地被发现。很多情况需用细胞免疫组化或分子生物学方法来检测理论来侦察。它们不能提供细胞是否潜在增生的情况，克隆基因检测可能提供这方面的信息，然而，也需要仔细地分析，因为结果会表明在体外培养的条件下不会支持肿瘤细胞生长，还有一个必须认识到的要素是肿瘤污染水平要转换为移植物内全部肿瘤负荷。既住，当移植物是血液来源而不是骨髓来源时，患者倾向于接受大量的全部所有的细胞。当这个因素被计算进去，(外周血中的)肿瘤负荷可能接近骨髓移植时，]可通过更多的有效的动员，从而减少了外周血HPC移植物的体积而避免上述问题的发生。
, 百拇医药
一个暴露出来的问题是用于HPC动员的方法会导致肿瘤细胞回到外周循环中，无论是上皮细胞癌还是多发性骨髓瘤都有这方面的报导，但还没有成为共识，然而现在更多地使用体外培养技术来减少分离产物中的肿瘤负荷。现已完成 了无论是通过有效清除肿瘤(阴性选择)还是通过特殊的富集CD34+细胞数(阳性选择)，每种手段都有数项技术支持，这些也在其它领域广泛应用，阴性选择会导致高水平的肿瘤清除，然而实施起来相对昂贵，会失掉一些有意义的单核细胞，很多步骤时间长，每次分离都要重复进行。虽然可以储存分离产品，考虑到频繁地采集、储存细胞对以后的处理增加了更多的麻烦。
CD34+细胞的富集提供了有吸引力的可供选择的机会，有几套有商业利用价值的系统，通常是自动的和相对迅速的，使每日使用更现实。总的来说，从CD34+细胞出产期间产生了结果。血的纯洁性不如骨髓的稳定，导致产品被肿瘤细胞污染的危险性上升，此外有报导一定量的肿瘤细胞可能协带CD34抗原，可与干细胞一起联合纯化。最后联合使用阳性和阴性选择会取得最佳的清除肿瘤的效果，然而临床利益的价值/风险率必须在从大量的方法中选择出所要采取的方案设计类型之前考虑到。, http://www.100md.com(陈虎)
由于在血细胞分离过程中产生了大量单核细胞，避免了用逐渐增加密度的离心方法。红细胞经细胞保护后也不能存活，输注了溶血的移植后常可见血红蛋白尿。这并不严重。常不能保证在冷冻前的采集过程，就已有大量红细胞减少。血小板可在以后的处理过程中引起细胞聚集，可由低速离心机去除。
深度处理：进一步处理
外周血HPC可通过多种方法进一步处理，通过应用有效地CD34+细胞富集的方法或通过改变动员的方式及时向，肿病细胞可从自移植中被清除掉。这些干细胞可直接输注，扩增或作为基因治疗的靶细胞。在同种移植中，为了预防GVHD发生需去除T细胞，通过有效地清除或HPC富集方法都可取得相似的效果。
有很多进一步处理的方法已在骨髓移植物中应用。包括有少数的细胞数总量及不同的细胞组成。就象血小板和粒细胞前体持续数天的采集，需决定是否分离采集，时应储存，合用然后加工。
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自体移植的采集
在临床上用HPC做移植物行自体移植时，其内所含相关的肿病细胞是复发的来源。现仍有许多未解决问题。通过回顾性地总结基因标记及净化研究发现，骨髓净化后的肿瘤患者比未净化者延长可无病生存期从而支持了这种遐说。而另有一些病人却未能显示出净化的益处，如在接受无肿痛细胞或明显受污染的移植物后其疾病复发率与原样本比较无差异。目前一致倾向于最好要净化或含有混入的肿痛细胞尽量少的移植物，而许多肿痛侵犯骨髓的机会要高于外周血，因此血液来源的移植物是最有吸引力的选择。用骨髓和外周血HPC样本进行研究，也证实了这个观点，虽然病期和(肿瘤)污染发生率之间，还没有单纯的关系，：但还是有从没被发现而有潜在的骨髓侵犯的患者身上采集的移植物中存有肿痛污染的报告。这些结果须仔细分析，因为它们严格依靠使用分析方法的敏感性和重复性，阴性结果只能表明，肿瘤目前在一个较低水平，还不能敏感地被发现。很多情况需用细胞免疫组化或分子生物学方法来检测理论来侦察。它们不能提供细胞是否潜在增生的情况，克隆基因检测可能提供这方面的信息，然而，也需要仔细地分析，因为结果会表明在体外培养的条件下不会支持肿瘤细胞生长，还有一个必须认识到的要素是肿瘤污染水平要转换为移植物内全部肿瘤负荷。既住，当移植物是血液来源而不是骨髓来源时，患者倾向于接受大量的全部所有的细胞。当这个因素被计算进去，(外周血中的)肿瘤负荷可能接近骨髓移植时，]可通过更多的有效的动员，从而减少了外周血HPC移植物的体积而避免上述问题的发生。
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一个暴露出来的问题是用于HPC动员的方法会导致肿瘤细胞回到外周循环中，无论是上皮细胞癌还是多发性骨髓瘤都有这方面的报导，但还没有成为共识，然而现在更多地使用体外培养技术来减少分离产物中的肿瘤负荷。现已完成 了无论是通过有效清除肿瘤(阴性选择)还是通过特殊的富集CD34+细胞数(阳性选择)，每种手段都有数项技术支持，这些也在其它领域广泛应用，阴性选择会导致高水平的肿瘤清除，然而实施起来相对昂贵，会失掉一些有意义的单核细胞，很多步骤时间长，每次分离都要重复进行。虽然可以储存分离产品，考虑到频繁地采集、储存细胞对以后的处理增加了更多的麻烦。
CD34+细胞的富集提供了有吸引力的可供选择的机会，有几套有商业利用价值的系统，通常是自动的和相对迅速的，使每日使用更现实。总的来说，从CD34+细胞出产期间产生了结果。血的纯洁性不如骨髓的稳定，导致产品被肿瘤细胞污染的危险性上升，此外有报导一定量的肿瘤细胞可能协带CD34抗原，可与干细胞一起联合纯化。最后联合使用阳性和阴性选择会取得最佳的清除肿瘤的效果，然而临床利益的价值/风险率必须在从大量的方法中选择出所要采取的方案设计类型之前考虑到。, http://www.100md.com(陈虎)