外周血造血干细胞的采集与加工(8)
解冻和回输
在回输解冻的样本之前,患者要经过水化和用抗组胺药抗休克,以减少血管陷和低血压的危险性,这是因为DMSO诱导组胺释放,会引起血管的不良反应,虽然严重的DMSO付反应不常见,但还是有这方面的报导,不论是对心血管的影响(心动过缓或高血压)和脑病,还是猝死,常见的有:头痛、恶心、呕吐、血尿。在有些中心,在任何情况下DMSO输入量限制到1g/kg,在输入大量的移植物时需连续输注几天或在输注之前洗涕细胞,以去除细胞保护剂及细胞残骸,这需要慢慢稀释细胞避免渗透性休克,及加入ACD-A防止血凝。洗涤将导致相当的细胞丢失。
把冷冻的样本侵入37-40℃水浴箱中很快就会解冻。水浴箱应经常仔细清洗,放满无菌的水,避免因为水进入罐子里的样品槽使样本受到污染,还需做好准备,解决那些在溶解的同时进行提纯时使用的袋子的问题。在从冷冻箱里取出之前,将金属罐放至到液体里,以保持几小时蒸气状态,会避免这个麻烦。在浸入水浴箱之前,不要试图从金属罐里移动冰冻的袋子,为了减少样本细胞的丢失,包括在解冻时使用双腔袋,在要进行解冻的容器内,放一些预热的无菌盐水。在解冻和回输之间,要避免延误时间,为此冷冻的样本被运至病床旁,快速解冻和回输。一旦样本已解冻,应通过血管快速地回输到患者体内,可用170μm的血液过滤器滤除细胞血凝块,这些血凝块将影响解冻时的细胞存活。如果细胞冷冻时浓度高,需在溶解的样本中加入抗凝剂ACD-A以防止细胞凝集成块。加入脱氧核糖核酸酶可以分解血凝块,然而,因为输注后会有潜在的不良反应,这要在最后不得已的情况下才使用。这种酶已成为可处方的药品。
作为质控检测的样本要直接从解冻的袋中提取,而不是从样本旁边放置并冷冻的小玻璃瓶里。这些样本的检测应尽可能早地进行,避免细胞活性发生变化。
结论
血液来源的HPC移植的应用,现已发生了大量变革,表现在移植物的采集和处理等各个方面,一次血细胞分选术就可提供足够的细胞,细胞可以相对简单地使用,冷冻和储存数年,未来的发展将连续利用血源性HPC并会使采集和处理变得更为简单容易。, 百拇医药(陈虎)
在回输解冻的样本之前,患者要经过水化和用抗组胺药抗休克,以减少血管陷和低血压的危险性,这是因为DMSO诱导组胺释放,会引起血管的不良反应,虽然严重的DMSO付反应不常见,但还是有这方面的报导,不论是对心血管的影响(心动过缓或高血压)和脑病,还是猝死,常见的有:头痛、恶心、呕吐、血尿。在有些中心,在任何情况下DMSO输入量限制到1g/kg,在输入大量的移植物时需连续输注几天或在输注之前洗涕细胞,以去除细胞保护剂及细胞残骸,这需要慢慢稀释细胞避免渗透性休克,及加入ACD-A防止血凝。洗涤将导致相当的细胞丢失。
把冷冻的样本侵入37-40℃水浴箱中很快就会解冻。水浴箱应经常仔细清洗,放满无菌的水,避免因为水进入罐子里的样品槽使样本受到污染,还需做好准备,解决那些在溶解的同时进行提纯时使用的袋子的问题。在从冷冻箱里取出之前,将金属罐放至到液体里,以保持几小时蒸气状态,会避免这个麻烦。在浸入水浴箱之前,不要试图从金属罐里移动冰冻的袋子,为了减少样本细胞的丢失,包括在解冻时使用双腔袋,在要进行解冻的容器内,放一些预热的无菌盐水。在解冻和回输之间,要避免延误时间,为此冷冻的样本被运至病床旁,快速解冻和回输。一旦样本已解冻,应通过血管快速地回输到患者体内,可用170μm的血液过滤器滤除细胞血凝块,这些血凝块将影响解冻时的细胞存活。如果细胞冷冻时浓度高,需在溶解的样本中加入抗凝剂ACD-A以防止细胞凝集成块。加入脱氧核糖核酸酶可以分解血凝块,然而,因为输注后会有潜在的不良反应,这要在最后不得已的情况下才使用。这种酶已成为可处方的药品。
作为质控检测的样本要直接从解冻的袋中提取,而不是从样本旁边放置并冷冻的小玻璃瓶里。这些样本的检测应尽可能早地进行,避免细胞活性发生变化。
结论
血液来源的HPC移植的应用,现已发生了大量变革,表现在移植物的采集和处理等各个方面,一次血细胞分选术就可提供足够的细胞,细胞可以相对简单地使用,冷冻和储存数年,未来的发展将连续利用血源性HPC并会使采集和处理变得更为简单容易。, 百拇医药(陈虎)