自体外周血干细胞移植及临床应用(2)
PBSC分离和采集方法：用COBE或CS3000血细胞分离机(或其他连续型血细胞分离器)，选择程疗8，全血流速50-55ml/min，终点量8000ml。采集的PBSC悬液在洁净台处理；取冷冻细胞保护剂20%DMSO(二甲基亚砜)的RPMI1640营养液，缓慢加入PBSC县液中使DMSO终浓度为10%，有核细胞数2×107/ml，分装于冷冻保存袋中，然后程控降温，以1℃/min降至-45℃，再以3℃/min降至-80℃，置-196℃液氮保存；在日本就在-80℃低温冰箱保存。
2. PBSC体外净化近年来国外用CD34+细胞筛选的方法，据报导可清除约3个对级的肿瘤细胞，如德国生产的CliniMACS细胞分选系统，其效果有待于总结。
3. 病人进层流室前的准备和进入层流室后的护理同BMT。
4. 预处理预处理就是毁髓性的化疗和放疗，旨在较彻底地大量杀死残留在体仙的白血病细胞或肿瘤细胞，但是正常的骨髓造血组织也同样受到破坏。
, 百拇医药
预处理方案：①同BMT的标准方案GTX60mg/kg/div(-3，-4日)，TBI1600-750cGy(成人)一次照射(-1日)，如分次照射可提高到1000-1400cGy。此方案可用于急性白血病和淋巴瘤；②BUCY方案：BU(马利兰)1mg/kg/6h(-8~-5日)，CY60mg/kg/d(-4~-3日)，也可用于急性折血病和淋巴瘤曾受放疗者；③多发性骨髓瘤可采用BCNU250mgiV(-6日)，马法兰140mg/m2iV(-6日)，VP16250mg/m2(-5~-3日)，如50岁以下根据病情可考虑TBI；④乳腺癌可采用其敏感的化疗方案并加大剂量或加放疗。
5. PBSC复温解冻及回输(0天)
从液氮中取出PBSC冷冻保存袋，40℃水浴迅速解冻，离心云除上清液(含DMSO及游离血红蛋白)，加等量1640液，不过滤经静脉回输，于冷冻前及解冻后分别进行MNC计数及CFU-CM培养。
, http://www.100md.com
6. 合并症的防治
①呕吐：预处理时常有严重呕吐，可用枢复宁或康泉防治；②出血性膀胱炎：大剂量环磷酰胺易致出血性膀胱炎，因此在用药前1天开始大量输液4000ml以上(成人)，其中含5%碳酸氢钠250ml，使尿液碱化，用药后继续大量输液，5%碳酸氢钠250mlbid，Iv，速尿20mgq8h,iV,停药后继续3天，以后输液量、5%碳酸氢钠、速尿渐减；或用Mesna;③感染：经大剂量化疗及TBI后第5-7日，病人白细胞下降至0至0.05×109/L左右，应严格按照移植室扩理常规对病人进行护理，此时可用氟嗪酸口服预防细菌感染；静脉点注丙种互不干涉蛋白及无环鸟苷预防病毒感染；口服氟康唑预防霉菌感染。如有口腔溃疡可涂碘甘油。如病人已发热，应作血尿痰等培养(需氧及厌氧细菌培养)。在病原菌未找到前，应选用搞忆苦思甜 谱广能覆盖工兰氏阳性及阴性菌(包括绿脓杆菌)的抗生素如第三代头孢霉素与氨基糖甙类(丁胺卡那或妥布霉素)合用有协同作用；无效可用亚胺硫霉素单用；如怀疑金黄色葡萄球菌感染可用万古霉素；如找到病原菌按照药敏试验选用抗生素；如以上各种抗生素无效，则须考虑下列情况：如药物热、病毒感染(肝炎常见，巨细胞病毒见于BMT，而在APBSCT少见，泡疹病毒易发现)、霉菌感染、寄生虫感染(疟疾见于输血后，卡氏肺囊病少见)、有脓肿形成、原 引起等。如能排除以上其他情况则可试用无二性霉素B治疗。除用抗生素外，可用rhGM-CSF或rhG-CSF提高粒细胞，必要时可输粒细胞；④出血：如血小板1.0×109/L，血小板>50×109/L为指标；国外，粒细胞>0.5×109/L时间约8-12天；血小板>20×109/L为12-14天，和我们用rhGM-CSF动员组的相接近。比ABMT和BMT的要快。, http://www.100md.com(王良绪)
2. PBSC体外净化近年来国外用CD34+细胞筛选的方法，据报导可清除约3个对级的肿瘤细胞，如德国生产的CliniMACS细胞分选系统，其效果有待于总结。
3. 病人进层流室前的准备和进入层流室后的护理同BMT。
4. 预处理预处理就是毁髓性的化疗和放疗，旨在较彻底地大量杀死残留在体仙的白血病细胞或肿瘤细胞，但是正常的骨髓造血组织也同样受到破坏。
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预处理方案：①同BMT的标准方案GTX60mg/kg/div(-3，-4日)，TBI1600-750cGy(成人)一次照射(-1日)，如分次照射可提高到1000-1400cGy。此方案可用于急性白血病和淋巴瘤；②BUCY方案：BU(马利兰)1mg/kg/6h(-8~-5日)，CY60mg/kg/d(-4~-3日)，也可用于急性折血病和淋巴瘤曾受放疗者；③多发性骨髓瘤可采用BCNU250mgiV(-6日)，马法兰140mg/m2iV(-6日)，VP16250mg/m2(-5~-3日)，如50岁以下根据病情可考虑TBI；④乳腺癌可采用其敏感的化疗方案并加大剂量或加放疗。
5. PBSC复温解冻及回输(0天)
从液氮中取出PBSC冷冻保存袋，40℃水浴迅速解冻，离心云除上清液(含DMSO及游离血红蛋白)，加等量1640液，不过滤经静脉回输，于冷冻前及解冻后分别进行MNC计数及CFU-CM培养。
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6. 合并症的防治
①呕吐：预处理时常有严重呕吐，可用枢复宁或康泉防治；②出血性膀胱炎：大剂量环磷酰胺易致出血性膀胱炎，因此在用药前1天开始大量输液4000ml以上(成人)，其中含5%碳酸氢钠250ml，使尿液碱化，用药后继续大量输液，5%碳酸氢钠250mlbid，Iv，速尿20mgq8h,iV,停药后继续3天，以后输液量、5%碳酸氢钠、速尿渐减；或用Mesna;③感染：经大剂量化疗及TBI后第5-7日，病人白细胞下降至0至0.05×109/L左右，应严格按照移植室扩理常规对病人进行护理，此时可用氟嗪酸口服预防细菌感染；静脉点注丙种互不干涉蛋白及无环鸟苷预防病毒感染；口服氟康唑预防霉菌感染。如有口腔溃疡可涂碘甘油。如病人已发热，应作血尿痰等培养(需氧及厌氧细菌培养)。在病原菌未找到前，应选用搞忆苦思甜 谱广能覆盖工兰氏阳性及阴性菌(包括绿脓杆菌)的抗生素如第三代头孢霉素与氨基糖甙类(丁胺卡那或妥布霉素)合用有协同作用；无效可用亚胺硫霉素单用；如怀疑金黄色葡萄球菌感染可用万古霉素；如找到病原菌按照药敏试验选用抗生素；如以上各种抗生素无效，则须考虑下列情况：如药物热、病毒感染(肝炎常见，巨细胞病毒见于BMT，而在APBSCT少见，泡疹病毒易发现)、霉菌感染、寄生虫感染(疟疾见于输血后，卡氏肺囊病少见)、有脓肿形成、原 引起等。如能排除以上其他情况则可试用无二性霉素B治疗。除用抗生素外，可用rhGM-CSF或rhG-CSF提高粒细胞，必要时可输粒细胞；④出血：如血小板1.0×109/L，血小板>50×109/L为指标；国外，粒细胞>0.5×109/L时间约8-12天；血小板>20×109/L为12-14天，和我们用rhGM-CSF动员组的相接近。比ABMT和BMT的要快。, http://www.100md.com(王良绪)