感染性腹泻新病原体(上)(2)
2.生物学特性
该菌长2～3μm，宽0.5μm呈弧形，革兰染色阴性。与O1群菌不同，而与大多数非O1群菌一样，O139群菌具有荚膜，电镜下该荚膜层厚约20nm，呈高电子密度包绕菌体。荚膜经纯化，高效阴离子交换色谱法和磁共振分析，证实为氨基糖。免疫电镜研究表明该荚膜层为特异性抗原层并有增强致病性作用。已有文献报告该菌能引起菌血症与抵御高效抗血清杀菌作用。表明O139群菌与其它非O1群弧菌一样具有侵袭力，但其荚膜不如其它非O1群菌那么厚，引起血行播散的可能性较小，此外，荚膜对表面抗原的遮盖，可使宿主的免疫应答能力降低。
对菌毛抗原的研究表明，O139群菌与埃尔托型霍乱弧菌相似，在最适宜的AKI-SW培养环境中能产生致病性菌毛，称为毒素协同菌毛(Tcp)，与霍乱弧菌肠毒素(CT)的基因协同调节表达，即受同一调节基因(Tox R)的控制。Tcp的主要亚单位为Tcp A，诱导试验获得缺失Tcp A结构基因活性作用的变异株，其移居乳鼠肠道的能力减弱，亦即失去肠道定植能力。故Tcp A被称为"定植因子"。此外，它还有一种与多种革兰阴性杆菌共有的2.8×103亚单位的弯曲波状菌毛，由于存在多种菌毛抗原，该菌在体外能牢固吸附于单层Hep-2细胞上，在患者小肠上段分泌液中存在大量此菌，表明它能粘附在小肠上段粘膜组织上。
, 百拇医药
用PCR法检测霍乱肠毒素CT A1亚单位基因证实O139群菌的CT基因结构与O1群菌完全相同，采用CT A2-B亚单位基因作为靶序列，用PCR法检测结果表明，O139群菌和O1群菌均扩增出特异的566bpDNA片段，DNA序列分析证实该片段源于CT A2-B亚单位基因，进一步证实O139群菌的CT结构基因与O1群菌完全相同；采用RAPD，以两种引物产生的DNA指纹图谱显示O139群与埃尔托型分子构象几乎完全相同，而与古典型略有区别，后者有两条完全不同的DNA片段。表明O139群与埃尔托型存在密切的种系进化关系，而与古典型的遗传距离较远。近年来的研究表明，O139群菌产毒基因CT AB可由溶源性噬菌体CTX携带。该噬菌体作为基因载体以Tcp菌毛为受体，通过attRS位点整合到染色体上，在霍乱弧菌间水平转移。
O139群菌对四环素、氨苄西林、红霉素、氯霉素、萘啶酸、头孢唑啉、环丙沙星和多西环素等敏感，对复方磺胺甲噁唑、链霉素和呋喃唑酮则有不同程度的耐药，耐药率分别为98%、92%和86%。Waldor等发现O139群菌染色体基因组中含有一约62kb的片段，含有该片段的菌株对SMZ，TMP，链霉素和呋喃唑酮耐药。将该片段从O139群菌经同源重组转移到O1群菌或大肠杆菌中，O139菌失去该片段后，对上述3种抗生素都敏感，转入该基因的受体菌则由对上述3种抗生素敏感转为耐药。这一62kb的DNA片段称为接合性自转移整合因子SXT。SXT可通过接合从O139群菌转移到O1群菌和E coli K-12染色体中，提示SXT有助于对抗生素耐药的基因在不同种属细菌中的播散。
, 百拇医药
LPS抗原的研究 Waldor等曾对自发突变和诱变产生的O139群菌突变株的研究指出染色体基因组中编码LPS的基因与O1群菌株相比缺失很长一段rfb基因读码框架，这段基因的缺失导致了O139群菌核心结构的改变，即缺少了高分子质量O抗原侧链，而代之以低分子量的短链。此种LPS的O多糖部位不含有O1群的特征性成份--过氧化氨基糖。
O139群菌与O1群菌一样，能发酵甘露糖和蔗糖，不发酵阿拉伯糖，故属HeibergⅠ群。此外，埃尔托型尚能分解葡萄糖产生乙酰甲基甲醇(即V-P试验)，O139群能发酵葡萄糖和麦芽糖，产酸不产气，不发酵肌醇。氧化酶试验、明胶试验、靛基质试验和鸡红细胞凝集试验均为阳性。对绵羊红细胞溶血试验结果不定(+/-)，对多粘菌素B(50U)和对氨苯(DADP)(50和150μg)不敏感。肠毒素的研究99%以上的O139霍乱弧菌能产生霍乱肠毒素(CT)，且与O1群菌产生的CT一致。经家兔肠段结扎实验证实，其产毒量为10.4～80μg/L或更多，与O1群菌的产毒量相仿。O139菌的产毒量与培养条件有关，37℃时AKI-SW培养条件下(最适于埃尔托型菌产毒)较在LB培养(古典型菌最适产毒条件)产毒量增加100倍，这与埃尔托型菌一致。, 百拇医药(聂青和)
该菌长2～3μm，宽0.5μm呈弧形，革兰染色阴性。与O1群菌不同，而与大多数非O1群菌一样，O139群菌具有荚膜，电镜下该荚膜层厚约20nm，呈高电子密度包绕菌体。荚膜经纯化，高效阴离子交换色谱法和磁共振分析，证实为氨基糖。免疫电镜研究表明该荚膜层为特异性抗原层并有增强致病性作用。已有文献报告该菌能引起菌血症与抵御高效抗血清杀菌作用。表明O139群菌与其它非O1群弧菌一样具有侵袭力，但其荚膜不如其它非O1群菌那么厚，引起血行播散的可能性较小，此外，荚膜对表面抗原的遮盖，可使宿主的免疫应答能力降低。
对菌毛抗原的研究表明，O139群菌与埃尔托型霍乱弧菌相似，在最适宜的AKI-SW培养环境中能产生致病性菌毛，称为毒素协同菌毛(Tcp)，与霍乱弧菌肠毒素(CT)的基因协同调节表达，即受同一调节基因(Tox R)的控制。Tcp的主要亚单位为Tcp A，诱导试验获得缺失Tcp A结构基因活性作用的变异株，其移居乳鼠肠道的能力减弱，亦即失去肠道定植能力。故Tcp A被称为"定植因子"。此外，它还有一种与多种革兰阴性杆菌共有的2.8×103亚单位的弯曲波状菌毛，由于存在多种菌毛抗原，该菌在体外能牢固吸附于单层Hep-2细胞上，在患者小肠上段分泌液中存在大量此菌，表明它能粘附在小肠上段粘膜组织上。
, 百拇医药
用PCR法检测霍乱肠毒素CT A1亚单位基因证实O139群菌的CT基因结构与O1群菌完全相同，采用CT A2-B亚单位基因作为靶序列，用PCR法检测结果表明，O139群菌和O1群菌均扩增出特异的566bpDNA片段，DNA序列分析证实该片段源于CT A2-B亚单位基因，进一步证实O139群菌的CT结构基因与O1群菌完全相同；采用RAPD，以两种引物产生的DNA指纹图谱显示O139群与埃尔托型分子构象几乎完全相同，而与古典型略有区别，后者有两条完全不同的DNA片段。表明O139群与埃尔托型存在密切的种系进化关系，而与古典型的遗传距离较远。近年来的研究表明，O139群菌产毒基因CT AB可由溶源性噬菌体CTX携带。该噬菌体作为基因载体以Tcp菌毛为受体，通过attRS位点整合到染色体上，在霍乱弧菌间水平转移。
O139群菌对四环素、氨苄西林、红霉素、氯霉素、萘啶酸、头孢唑啉、环丙沙星和多西环素等敏感，对复方磺胺甲噁唑、链霉素和呋喃唑酮则有不同程度的耐药，耐药率分别为98%、92%和86%。Waldor等发现O139群菌染色体基因组中含有一约62kb的片段，含有该片段的菌株对SMZ，TMP，链霉素和呋喃唑酮耐药。将该片段从O139群菌经同源重组转移到O1群菌或大肠杆菌中，O139菌失去该片段后，对上述3种抗生素都敏感，转入该基因的受体菌则由对上述3种抗生素敏感转为耐药。这一62kb的DNA片段称为接合性自转移整合因子SXT。SXT可通过接合从O139群菌转移到O1群菌和E coli K-12染色体中，提示SXT有助于对抗生素耐药的基因在不同种属细菌中的播散。
, 百拇医药
LPS抗原的研究 Waldor等曾对自发突变和诱变产生的O139群菌突变株的研究指出染色体基因组中编码LPS的基因与O1群菌株相比缺失很长一段rfb基因读码框架，这段基因的缺失导致了O139群菌核心结构的改变，即缺少了高分子质量O抗原侧链，而代之以低分子量的短链。此种LPS的O多糖部位不含有O1群的特征性成份--过氧化氨基糖。
O139群菌与O1群菌一样，能发酵甘露糖和蔗糖，不发酵阿拉伯糖，故属HeibergⅠ群。此外，埃尔托型尚能分解葡萄糖产生乙酰甲基甲醇(即V-P试验)，O139群能发酵葡萄糖和麦芽糖，产酸不产气，不发酵肌醇。氧化酶试验、明胶试验、靛基质试验和鸡红细胞凝集试验均为阳性。对绵羊红细胞溶血试验结果不定(+/-)，对多粘菌素B(50U)和对氨苯(DADP)(50和150μg)不敏感。肠毒素的研究99%以上的O139霍乱弧菌能产生霍乱肠毒素(CT)，且与O1群菌产生的CT一致。经家兔肠段结扎实验证实，其产毒量为10.4～80μg/L或更多，与O1群菌的产毒量相仿。O139菌的产毒量与培养条件有关，37℃时AKI-SW培养条件下(最适于埃尔托型菌产毒)较在LB培养(古典型菌最适产毒条件)产毒量增加100倍，这与埃尔托型菌一致。, 百拇医药(聂青和)