肾综合征出血热、汉坦病毒肺综合征和汉坦病毒研究近况(上)(2)
2.系统发生研究确定病原因子
从阿根廷Yuto地区的5个病人、2个胼胝暮鼠(Calomys callosus)和1种原鼠(Ako-don simulator)获得的氨基酸序列，表明人分离株与先前介绍的ORN病毒(Oligoryzomys Longicaudatus)株有很高的同源性，上述动物间毒株有99%的同源性。但与先前确定的巴拉圭和巴西毒株(LN)有6.1～8.5%差异；与阿根廷其他毒株差异更大(13%以上)。血清流行病学显示，隐性感染率很高，与低毒力毒株有关。基因分析资料认为ORN株是该地HPS病原，尽管Oligoryzomys很少；上述两种动物携带的病毒与LN病毒很接近，应考虑有潜在的危险。玻利维亚从一个病人扩增的G1区cDNA片段序列分析与先前报告的从北部阿根廷捕获的Oligoryzomys Chacoensis的毒株BMJ100%同源，故证实BMJ也是玻利维亚HPS的病原。俄罗斯远东地区，每年有100～200病例(HFRS)，1994～1998年有110例病人，用RT-PCR及序列分析(M片段256nt)，至少可分为3组，36份阳性标本中，4份属未知抗原，称Amur株，其余83%为HTNV变异株，6%为SEOV。Amur株不同于同一地区其他HTN型病毒(15.9～21.2%)，与76～118株差异为15.8～17.5%。在远东地区捕获的大林姬鼠(Apeninsulae)携带病毒，其序列与Amur株十分接近(仅3.1～6.6%差异)，但与76～118差异15～19%，SEOV21～28%，DOBV22～29%，PUUV为38～39%，与哈巴罗夫斯克(Khabarovsk)病毒为36～37%。作者认为Amur是一个新基因型病毒，大林姬鼠为其宿主动物。另外，在东方田鼠中分离到基因型明显不同的Khabarovsk和Vladivostok株，其引起疾病范围尚需研究。我国预防医学科学院也进行了类似的研究，通过序列及发生树分析，至少发现HTNV可以分为8个亚型，SEOV毒分为6个分枝(或亚型)，从社鼠(Niviventer Confucianus)分离到完全不同现知的所有汉坦病毒的新的基因型病毒；另外还发现Q32病毒株可能为HTNV间的基因重排病毒(reassortant virus)。
, http://www.100md.com
(二)病毒的复制及形态发生
主要集中在装配条件、部位及释放。病毒3个结构蛋白主要定位在核周围，2个糖蛋白可通过高尔基氏体间隔(compartment)；NP与丝状体作用定位在中间高尔基氏体，但细节不清楚， 现想通过形成核蛋白复合体(RNPs)过程中，来确定其定位。另外观察NP与G1、G2间的相互关系，想通过吸附表达的G1胞浆尾在镊柱上来试验结合表达纯化NP和感染细胞裂解物中NP的能力。
有人研究病毒RNA-RNA聚合酶，从L片段847-1234氨基酸区段(Calalytic core domain)表达44KD的融合蛋白，测定其酶促能力，证明它有功能。
核蛋白分子之间以非共价键结合形成二聚体、三聚体和多聚体；2价阳离子能促进聚合3～8 倍，认为病毒核壳装配是由NP分子围绕病毒RNA分子trimerize，然后由三聚体逐渐装配形成长的多聚体。核蛋白对病毒RNA有特殊的亲和力，可能通过顺式作用信号(cis-acting signal)启动S片段的包装，而VRNA S片段的5'端是结合反应所必需的。
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瑞典研究者应用微阵列技术(microarray technology)即DNA芯片技术，可以鉴别出>84%序列同源性的病毒。
(三)病毒生态及病毒宿主关系
COligoryzomys fulvescens。2000年3月～5月巴西3例HPS病例，认为Omicrotis是宿主动物。法国学者证明污染环境传播-间接传播以维持宿主群体病毒持续感染的可能性。在俄罗斯欧洲部分，过去10年在Tula地区主要进行流行病、临床及动物流行病学研究。1991年～1992年冬天，在Tula和Ryazan地区(林区周围农业区)发生由DOBV引起的HFRS，主要动物还是黑线姬鼠，这些动物迁徙到库房、养牛场、车间住地，从上述动物中查到DOBV RNA，因而不是黄颈姬鼠带毒。, http://www.100md.com(杭长寿)
从阿根廷Yuto地区的5个病人、2个胼胝暮鼠(Calomys callosus)和1种原鼠(Ako-don simulator)获得的氨基酸序列，表明人分离株与先前介绍的ORN病毒(Oligoryzomys Longicaudatus)株有很高的同源性，上述动物间毒株有99%的同源性。但与先前确定的巴拉圭和巴西毒株(LN)有6.1～8.5%差异；与阿根廷其他毒株差异更大(13%以上)。血清流行病学显示，隐性感染率很高，与低毒力毒株有关。基因分析资料认为ORN株是该地HPS病原，尽管Oligoryzomys很少；上述两种动物携带的病毒与LN病毒很接近，应考虑有潜在的危险。玻利维亚从一个病人扩增的G1区cDNA片段序列分析与先前报告的从北部阿根廷捕获的Oligoryzomys Chacoensis的毒株BMJ100%同源，故证实BMJ也是玻利维亚HPS的病原。俄罗斯远东地区，每年有100～200病例(HFRS)，1994～1998年有110例病人，用RT-PCR及序列分析(M片段256nt)，至少可分为3组，36份阳性标本中，4份属未知抗原，称Amur株，其余83%为HTNV变异株，6%为SEOV。Amur株不同于同一地区其他HTN型病毒(15.9～21.2%)，与76～118株差异为15.8～17.5%。在远东地区捕获的大林姬鼠(Apeninsulae)携带病毒，其序列与Amur株十分接近(仅3.1～6.6%差异)，但与76～118差异15～19%，SEOV21～28%，DOBV22～29%，PUUV为38～39%，与哈巴罗夫斯克(Khabarovsk)病毒为36～37%。作者认为Amur是一个新基因型病毒，大林姬鼠为其宿主动物。另外，在东方田鼠中分离到基因型明显不同的Khabarovsk和Vladivostok株，其引起疾病范围尚需研究。我国预防医学科学院也进行了类似的研究，通过序列及发生树分析，至少发现HTNV可以分为8个亚型，SEOV毒分为6个分枝(或亚型)，从社鼠(Niviventer Confucianus)分离到完全不同现知的所有汉坦病毒的新的基因型病毒；另外还发现Q32病毒株可能为HTNV间的基因重排病毒(reassortant virus)。
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(二)病毒的复制及形态发生
主要集中在装配条件、部位及释放。病毒3个结构蛋白主要定位在核周围，2个糖蛋白可通过高尔基氏体间隔(compartment)；NP与丝状体作用定位在中间高尔基氏体，但细节不清楚， 现想通过形成核蛋白复合体(RNPs)过程中，来确定其定位。另外观察NP与G1、G2间的相互关系，想通过吸附表达的G1胞浆尾在镊柱上来试验结合表达纯化NP和感染细胞裂解物中NP的能力。
有人研究病毒RNA-RNA聚合酶，从L片段847-1234氨基酸区段(Calalytic core domain)表达44KD的融合蛋白，测定其酶促能力，证明它有功能。
核蛋白分子之间以非共价键结合形成二聚体、三聚体和多聚体；2价阳离子能促进聚合3～8 倍，认为病毒核壳装配是由NP分子围绕病毒RNA分子trimerize，然后由三聚体逐渐装配形成长的多聚体。核蛋白对病毒RNA有特殊的亲和力，可能通过顺式作用信号(cis-acting signal)启动S片段的包装，而VRNA S片段的5'端是结合反应所必需的。
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瑞典研究者应用微阵列技术(microarray technology)即DNA芯片技术，可以鉴别出>84%序列同源性的病毒。
(三)病毒生态及病毒宿主关系
COligoryzomys fulvescens。2000年3月～5月巴西3例HPS病例，认为Omicrotis是宿主动物。法国学者证明污染环境传播-间接传播以维持宿主群体病毒持续感染的可能性。在俄罗斯欧洲部分，过去10年在Tula地区主要进行流行病、临床及动物流行病学研究。1991年～1992年冬天，在Tula和Ryazan地区(林区周围农业区)发生由DOBV引起的HFRS，主要动物还是黑线姬鼠，这些动物迁徙到库房、养牛场、车间住地，从上述动物中查到DOBV RNA，因而不是黄颈姬鼠带毒。, http://www.100md.com(杭长寿)