肾综合征出血热、汉坦病毒肺综合征和汉坦病毒研究近况(下)(1)
三、发病机制
有关发病机理的研究主要集中在细胞因子、特异性CTL应答、汉坦病毒受体及HLA限制性等方面。
(一)细胞因子、趋化因子及其受体在HFRS和HPS发病中的作用
克罗地亚免疫研究所的Markotic A与美国陆军传染病研究所Schmal john CS领导的研究小组合作，观察了感染HV的体外培养细胞分泌各种细胞因子的情况。他们用HTNV、SNV(辛诺柏病毒)、ANDV分别感染THP-1(一种人源的单个核细胞系)、293HFK(人的肾上皮细胞)、MRC-8(胎儿纤维母细胞系)及人脐静脉内皮细胞(HUVEC)，用ELISA测定了培养上清中的各种细胞因子(如IL-1β、IL-6、IL-10、IL-12a40、TNF-α和IFN-γ和CC及CXC类趋化因子如RANTES、MIP-1α、MIP-1β、MCP-1及IL-8)；与此同时，他们还用多探针RNA保护试验测定了CC和CXC类趋化因子的受体。结果显示，HV感染能诱导各种细胞因子或趋化因子的产生，HTNV主要诱导MRC-5细胞产生GM-CSF(粒细胞巨噬细胞集落刺激因子)，诱导293HFK细胞产生RANTES，而HPS的病原SNV和ANDV诱导THP-1和HUVEC产生TNF-α，诱导293细胞产生MCP-1，还可刺激293细胞分泌IL-10，后者似可说明为什么HPS患者肾缺如或较轻。此外，HTNV不仅可以诱生RANTES，还可刺激其受体mRNA的表达，两者的高分泌/表达说明病程中单个核细胞的自分泌和旁分泌有助于病毒感染靶器宫中这些细胞的归巢和向病变部分的迁移(趋化)。美国内华达大学与阿根廷的学者在另一项研究中，用ANDV、LECV(Lecheguanos病毒)、SNV和PHV等体外感染HUVEC、549(人肺上皮细胞)、293和骨髓来源的CD34+的巨噬细胞，在感染后4、12和72小时提取细胞总RNA，应用RNA酶保护实验观察细胞因子mRNA的表达。结果发现，①与HPS有关的病毒(ANDV、LECV和SNV)在感染后12小时即能明显增强HUVEC、A549和巨噬细胞表达RANTES、MCP-1、MIP-1α、IL-8和GM-CSF，而IL-4与PECAM表达水平的增强仅见于HTNV感染的HUVEC细胞。②PHV感染后细胞因子mRNA的表达无明显变化。③在感染后3天上述细胞因子大多仍可保持高水平表达。④许多细胞因子如RANTES、IL-4、GM-CSF和MIP-1α mRNA在HUVEC的表达增强在感染后3小时即开始，而此时LECH和A549细胞仅RANTES的表达有所增加。⑤肾上皮细胞(293)感染后不仅RANTES、而且TGF-β和凝血调节蛋白(thrombomodulin)受体的表达也增加。⑥未观察到TNF-α、IFN-γ、IL-10和VEGFC的表达增强，作用认为，HV感染后细胞因子早期即可出现表达增强，表达水平与表达谱与感染的毒株型别关系密切。HUVEC细胞感染后多种细胞因子的表达增强似可说明血管内皮细胞在感染初期作为主要靶器官的重要地位。
, http://www.100md.com
斯洛文尼亚卢布亚那大学的Avsic-Zupanc T等比较测定了2例患者病程中血清多种细胞因子的水平。第1例患者入院后3周完全康复，第2例患者经过积极抢救仍于第20病日不幸病故。2例患者均于入院后前10天测定了血清IFN-α、IFN-γ、IFN-α、IL-4、IL-5、IL-6、IL-8、IL-10和IL-12。2例患者入院后和病程中大部分细胞因子水平升高，如Th1类细胞因子IFN-γ和IL-12，炎病因子IFN-α、IL-6和IL-8，而Th2类细胞因子中仅IL-10在第1例患者血清中有高水平表达(186pg/ml，正常7.7pg/ml)，在第2例患者也有较高的表达水平(36.9pg/ml)。惟有Th1型免疫应答的促进因子IL-12的浓度在两例患者明显不同，病故患者为1032pg/ml(正常参考值为258pg/ml)，而存活患者高达4135pg/ml。以上结果提示，IL-12因子的高表达和IL-10的较低度的表达可能预示着好的转归。而IFN-α在两例患者均无明显升高，似乎提示其在本病发病中无重要作用。
(二)HLA与HFRS或HPS发病的关系
近年越来越多的研究证明，病原体感染后发病的轻重和转归与患者的遗传背景有关。已发现严重临床经过的NE和急速进展型的HIV感染均具有HLA B8型，而缓慢进展的HIV感染者多为HLA B27型。为此几年前芬兰学者随机从76位入院病人中选取了6位NE患者，检测表明他们均为HLA B27型，且临床经过均较轻，没有1位患者有严重的合并症，肾功损伤也比较轻，平均住院时间仅为其它HLA B27患者的一半(P=0.004)。作者认为，HIV感染与NE有类同的遗传背景。, 百拇医药(杭长寿)
有关发病机理的研究主要集中在细胞因子、特异性CTL应答、汉坦病毒受体及HLA限制性等方面。
(一)细胞因子、趋化因子及其受体在HFRS和HPS发病中的作用
克罗地亚免疫研究所的Markotic A与美国陆军传染病研究所Schmal john CS领导的研究小组合作，观察了感染HV的体外培养细胞分泌各种细胞因子的情况。他们用HTNV、SNV(辛诺柏病毒)、ANDV分别感染THP-1(一种人源的单个核细胞系)、293HFK(人的肾上皮细胞)、MRC-8(胎儿纤维母细胞系)及人脐静脉内皮细胞(HUVEC)，用ELISA测定了培养上清中的各种细胞因子(如IL-1β、IL-6、IL-10、IL-12a40、TNF-α和IFN-γ和CC及CXC类趋化因子如RANTES、MIP-1α、MIP-1β、MCP-1及IL-8)；与此同时，他们还用多探针RNA保护试验测定了CC和CXC类趋化因子的受体。结果显示，HV感染能诱导各种细胞因子或趋化因子的产生，HTNV主要诱导MRC-5细胞产生GM-CSF(粒细胞巨噬细胞集落刺激因子)，诱导293HFK细胞产生RANTES，而HPS的病原SNV和ANDV诱导THP-1和HUVEC产生TNF-α，诱导293细胞产生MCP-1，还可刺激293细胞分泌IL-10，后者似可说明为什么HPS患者肾缺如或较轻。此外，HTNV不仅可以诱生RANTES，还可刺激其受体mRNA的表达，两者的高分泌/表达说明病程中单个核细胞的自分泌和旁分泌有助于病毒感染靶器宫中这些细胞的归巢和向病变部分的迁移(趋化)。美国内华达大学与阿根廷的学者在另一项研究中，用ANDV、LECV(Lecheguanos病毒)、SNV和PHV等体外感染HUVEC、549(人肺上皮细胞)、293和骨髓来源的CD34+的巨噬细胞，在感染后4、12和72小时提取细胞总RNA，应用RNA酶保护实验观察细胞因子mRNA的表达。结果发现，①与HPS有关的病毒(ANDV、LECV和SNV)在感染后12小时即能明显增强HUVEC、A549和巨噬细胞表达RANTES、MCP-1、MIP-1α、IL-8和GM-CSF，而IL-4与PECAM表达水平的增强仅见于HTNV感染的HUVEC细胞。②PHV感染后细胞因子mRNA的表达无明显变化。③在感染后3天上述细胞因子大多仍可保持高水平表达。④许多细胞因子如RANTES、IL-4、GM-CSF和MIP-1α mRNA在HUVEC的表达增强在感染后3小时即开始，而此时LECH和A549细胞仅RANTES的表达有所增加。⑤肾上皮细胞(293)感染后不仅RANTES、而且TGF-β和凝血调节蛋白(thrombomodulin)受体的表达也增加。⑥未观察到TNF-α、IFN-γ、IL-10和VEGFC的表达增强，作用认为，HV感染后细胞因子早期即可出现表达增强，表达水平与表达谱与感染的毒株型别关系密切。HUVEC细胞感染后多种细胞因子的表达增强似可说明血管内皮细胞在感染初期作为主要靶器官的重要地位。
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斯洛文尼亚卢布亚那大学的Avsic-Zupanc T等比较测定了2例患者病程中血清多种细胞因子的水平。第1例患者入院后3周完全康复，第2例患者经过积极抢救仍于第20病日不幸病故。2例患者均于入院后前10天测定了血清IFN-α、IFN-γ、IFN-α、IL-4、IL-5、IL-6、IL-8、IL-10和IL-12。2例患者入院后和病程中大部分细胞因子水平升高，如Th1类细胞因子IFN-γ和IL-12，炎病因子IFN-α、IL-6和IL-8，而Th2类细胞因子中仅IL-10在第1例患者血清中有高水平表达(186pg/ml，正常7.7pg/ml)，在第2例患者也有较高的表达水平(36.9pg/ml)。惟有Th1型免疫应答的促进因子IL-12的浓度在两例患者明显不同，病故患者为1032pg/ml(正常参考值为258pg/ml)，而存活患者高达4135pg/ml。以上结果提示，IL-12因子的高表达和IL-10的较低度的表达可能预示着好的转归。而IFN-α在两例患者均无明显升高，似乎提示其在本病发病中无重要作用。
(二)HLA与HFRS或HPS发病的关系
近年越来越多的研究证明，病原体感染后发病的轻重和转归与患者的遗传背景有关。已发现严重临床经过的NE和急速进展型的HIV感染均具有HLA B8型，而缓慢进展的HIV感染者多为HLA B27型。为此几年前芬兰学者随机从76位入院病人中选取了6位NE患者，检测表明他们均为HLA B27型，且临床经过均较轻，没有1位患者有严重的合并症，肾功损伤也比较轻，平均住院时间仅为其它HLA B27患者的一半(P=0.004)。作者认为，HIV感染与NE有类同的遗传背景。, 百拇医药(杭长寿)