肾综合征出血热、汉坦病毒肺综合征和汉坦病毒研究近况(下)(2)
芬兰赫尔辛基大学应用RT-PCR分析了20例94年10月至次年1月芬兰住院的NE患者，其中7例患者的血或尿标本PCR阳性，所有阳性患者均为HLA-DRB10301(即DR3)或HLA B8等位基因型，已知这些基因型多与重型NE患者相关。
本次会议芬兰学者又进行了有关HFRS发病遗传背景的研究，他们发现，具有TNF2等位基因的患者同HLA B8或HLA DR3一样，易患重型流行性肾病(NE)。已知在北欧地区，TNF2等位基因与HLAB8 DR3单倍型有着密切的连锁不平衡(linkage disequilibrium)，因此TNF2等位基因对于重型NE可能并非独立的危险因素，而仅仅在HLA单倍型人群中具有一定优势。为了阐明上述HLA基因型中哪一种扩展的单倍型与NE病情联系更为紧密，作用调查了116位住院治疗的NE患者的HLA B和HLA DRB1等位基因，证明HLA B8和DR3与患者的临床轻重关系较为密切，而TNF2基因型与患者的病情似无明显联系。
(三)特异性CTL克降的建立及细胞免疫应答
, 百拇医药
1999年7月，美国马萨诸塞大学医学中心与美国陆军传染病研究所报道，从该所3名15年前在实验室隐性感染HTNV的研究人员的外周血中，发现存在着HTNV特异性CTL记忆细胞。经体外用病毒、含有HTNV S或M基因的重组痘苗病毒或合成多肽刺激后，上述CTL细胞可产生针对HTNV NP或G1的特异性反应，在此基础上建立了CD4+或CD8+的NP或G1特异性CTL细胞克降，其中所有的CD8+CTL克隆均可识别NP上的分别由aa12～20和aa412～329组成的抗原表位，针对aa12～20的CTL杀伤靶细胞的效应具有HLA B51的限制性，而针对aa421～429的CTL杀伤效应具有HLA A1的限制性。
此外还发现存在着。针对HV不同血清型病毒的交叉反应性CTL。前体细胞频率分析表明在上述既往隐性感染者外周T细胞池中，具有较高比率的表位特异性的前体CTL。以上研究结果首次证明，HTNV感染后可以诱导机体产生针对病毒NP特定表位的CTLs，同时还可产生针对血清型别完全不同的HV病毒株如SNV的表位特异性的交叉CTL反应。
, 百拇医药
本次会议上美国马萨诸塞大学医学中心的Heather L Van Epps与芬兰Tempere大学和赫尔辛基大学联合进行了PUUV核衣壳蛋白特异性CTL的研究。他们进行了特异的细胞毒实验，效应细胞来源于11例既往感染(1984和1995年)后愈复者的外周血单个核细胞(PBMC)，体外培养过程中用PUUV株K27刺激活化；靶细胞为用表达PUUV NP和G1、G2的重组痘苗病毒感染供者自身的EBV转化的B细胞系。实验结果表明，CTL应答中针对NP的有8位，针对G1的有5位，针对G2的有2位患者。自2位患者的T细胞中建立了63个病毒特异性的T细胞克隆，来源于第1位试者的43个克隆中42个为NP特异性仅1个为G1特异的。NP特异性CTL均为CD4+或CD8+，且针对的抗原表位为分别N204～212、N173～181、N243～251和N239～250。CD8+CTL同时受到HLA A2(N204～212)、B7(N173～181)和B8(N173～181和N243～251)的限制性。而CD4+CTL仅能识别N239～250，其HLA单倍型尚未测定。来源于另1供者的20个病毒特异性CTL克隆中，19个为NP特异的，仅有1个是G2特异的，前者或者为CD4或者为CD8阳性，其中CD8阳性克隆主要识别N236～250和N204～212，N204～212特异性CTL为HLA A2限制性，N236～250的HLA单倍型尚未明确。CD4+细胞克隆的表位特异性也未明确。以上结果首次揭示了PUUV感染患者特异性CTL应答的特点，表明NP是PUUV感染机体T细胞免疫应答的主要靶蛋白。
, 百拇医药
(四)汉坦病毒受体的研究
九十年代初国内外曾进行过汉坦病毒受体的研究，但近10年进展甚微。1998年美国Stony Brook大学医学系的Gavrilovskaya，IN等首次证明整合素可能为HV的受体后，相关的研究重新引起关注。整合素家族(intergrin family)是一种膜受体家族，其多个成员的分子都是由α、β两条链(亚单位)靠非共价键连接而成的异源双体。迄今已发现15种α亚单位和8种β亚单位。两种亚单位的不同组合可形成20多种不同形式的整合素分子。根据组成异源双体中β亚单位的不同可将整合素分为8组，同一组中的整合素分子β链相同而α链不同。其中β3组中仅有α Ⅱb β3或αVβ3两种形式的分子。作为膜分子的整合素的生理功能主要是介导信号传递，从而影响细胞的增殖、凋亡、分化以及移动等。, 百拇医药(杭长寿)
本次会议芬兰学者又进行了有关HFRS发病遗传背景的研究，他们发现，具有TNF2等位基因的患者同HLA B8或HLA DR3一样，易患重型流行性肾病(NE)。已知在北欧地区，TNF2等位基因与HLAB8 DR3单倍型有着密切的连锁不平衡(linkage disequilibrium)，因此TNF2等位基因对于重型NE可能并非独立的危险因素，而仅仅在HLA单倍型人群中具有一定优势。为了阐明上述HLA基因型中哪一种扩展的单倍型与NE病情联系更为紧密，作用调查了116位住院治疗的NE患者的HLA B和HLA DRB1等位基因，证明HLA B8和DR3与患者的临床轻重关系较为密切，而TNF2基因型与患者的病情似无明显联系。
(三)特异性CTL克降的建立及细胞免疫应答
, 百拇医药
1999年7月，美国马萨诸塞大学医学中心与美国陆军传染病研究所报道，从该所3名15年前在实验室隐性感染HTNV的研究人员的外周血中，发现存在着HTNV特异性CTL记忆细胞。经体外用病毒、含有HTNV S或M基因的重组痘苗病毒或合成多肽刺激后，上述CTL细胞可产生针对HTNV NP或G1的特异性反应，在此基础上建立了CD4+或CD8+的NP或G1特异性CTL细胞克降，其中所有的CD8+CTL克隆均可识别NP上的分别由aa12～20和aa412～329组成的抗原表位，针对aa12～20的CTL杀伤靶细胞的效应具有HLA B51的限制性，而针对aa421～429的CTL杀伤效应具有HLA A1的限制性。
此外还发现存在着。针对HV不同血清型病毒的交叉反应性CTL。前体细胞频率分析表明在上述既往隐性感染者外周T细胞池中，具有较高比率的表位特异性的前体CTL。以上研究结果首次证明，HTNV感染后可以诱导机体产生针对病毒NP特定表位的CTLs，同时还可产生针对血清型别完全不同的HV病毒株如SNV的表位特异性的交叉CTL反应。
, 百拇医药
本次会议上美国马萨诸塞大学医学中心的Heather L Van Epps与芬兰Tempere大学和赫尔辛基大学联合进行了PUUV核衣壳蛋白特异性CTL的研究。他们进行了特异的细胞毒实验，效应细胞来源于11例既往感染(1984和1995年)后愈复者的外周血单个核细胞(PBMC)，体外培养过程中用PUUV株K27刺激活化；靶细胞为用表达PUUV NP和G1、G2的重组痘苗病毒感染供者自身的EBV转化的B细胞系。实验结果表明，CTL应答中针对NP的有8位，针对G1的有5位，针对G2的有2位患者。自2位患者的T细胞中建立了63个病毒特异性的T细胞克隆，来源于第1位试者的43个克隆中42个为NP特异性仅1个为G1特异的。NP特异性CTL均为CD4+或CD8+，且针对的抗原表位为分别N204～212、N173～181、N243～251和N239～250。CD8+CTL同时受到HLA A2(N204～212)、B7(N173～181)和B8(N173～181和N243～251)的限制性。而CD4+CTL仅能识别N239～250，其HLA单倍型尚未测定。来源于另1供者的20个病毒特异性CTL克隆中，19个为NP特异的，仅有1个是G2特异的，前者或者为CD4或者为CD8阳性，其中CD8阳性克隆主要识别N236～250和N204～212，N204～212特异性CTL为HLA A2限制性，N236～250的HLA单倍型尚未明确。CD4+细胞克隆的表位特异性也未明确。以上结果首次揭示了PUUV感染患者特异性CTL应答的特点，表明NP是PUUV感染机体T细胞免疫应答的主要靶蛋白。
, 百拇医药
(四)汉坦病毒受体的研究
九十年代初国内外曾进行过汉坦病毒受体的研究，但近10年进展甚微。1998年美国Stony Brook大学医学系的Gavrilovskaya，IN等首次证明整合素可能为HV的受体后，相关的研究重新引起关注。整合素家族(intergrin family)是一种膜受体家族，其多个成员的分子都是由α、β两条链(亚单位)靠非共价键连接而成的异源双体。迄今已发现15种α亚单位和8种β亚单位。两种亚单位的不同组合可形成20多种不同形式的整合素分子。根据组成异源双体中β亚单位的不同可将整合素分为8组，同一组中的整合素分子β链相同而α链不同。其中β3组中仅有α Ⅱb β3或αVβ3两种形式的分子。作为膜分子的整合素的生理功能主要是介导信号传递，从而影响细胞的增殖、凋亡、分化以及移动等。, 百拇医药(杭长寿)