基因疫苗临床研究进展(2)
由于人免疫缺陷病毒-1(HIV-1)感染引起的艾滋病(AIDS)成为威胁全世界人群健康的传染病，因此开展
预防艾滋病流行的疫苗是当务之急。美国宾州大学医学院病理系的Boyer等[5]在进行基因疫苗人体试验之前，首先应用黑猩猩进行了基因免疫研究。3只黑猩猩接种了表达HIV-1 env、rev、gag和pol的基因疫苗质粒DNA，尽管存在着个体差异，但都产生了针对各种抗原的特异性免疫应答。同时证明了DNA疫苗的接种还可以诱导CD8+细胞介导的细胞免疫应答。在HIV-1的env/rev DNA疫苗的I期临床试验中，6例健康志愿者肌肉注射基因疫苗的剂量是100或300 mg，在0、4、8、24周注射共4次[6]。注射300 mg基因疫苗的健康志愿者在抗原特异性淋巴细胞增殖反应和抗原特异性干扰素γ(IFNγ)、β型趋化因子(chemokine)的产生水平检测中至少一项是阳性反应。在注射300 mg基因疫苗的志愿者中，4例对rev、env都有应答。这种免疫应答不是持续的，而且具有明显的个体差异。这项HIV-1的基因疫苗研究证实DNA疫苗可以诱导多种形式的免疫应答，为进一步设计提高基因免疫效果的研究奠定了坚实的基础。同一研究小组也对15例HIV血清学标志阳性但没有症状的HIV-1感染者进行了基因疫苗的接种研究[7]。这15例HIV感染者每毫升外周血CD4+淋巴细胞计数在500以上，而且没有进行抗病毒化疗。注射的剂量为30、100、300 mg，间隔10周，采取剂量逐渐提高的策略。基因疫苗免疫后针对表达gp160的靶细胞的细胞毒T淋巴细胞活性显著升高，更重要的是在多个基因疫苗接种个体中都观察到了HIV-1包膜糖蛋白特异性的淋巴细胞增生反应。3例接受300 mg 基因疫苗的HIV-1感染者血清中MIP-1α趋化因子的水平上升，可以达到检测阳性水平。但是，低剂量接种者没有观察到免疫系统指标的变化。这些研究结果表明基因疫苗是诱导HIV-1感染者产生特异性免疫应答的重要技术手段。南弗罗立达大学医学院医学微生物与免疫学系的Ugen等[8]在完成正常和HIV-1感染的黑猩猩模型的基因疫苗免疫试验之后，也在进行HIV-1基因疫苗的人体试验研究，正在进行I期临床研究结果表明，HIV-1基因疫苗的确可以增强HIV-1感染者抗-HIV的免疫应答。初步结果表明，人体对基因疫苗免疫显示出良好的安全性和耐受性。
, 百拇医药
基因疫苗研究所应用的表达载体一般都是采用单纯的质粒载体，这也是基因疫苗区别于大部分情况下应用病毒载体的基因治疗的主要特点。美国罗彻斯特大学医科与牙科学院的Evans等[9]则构建了表达HIV-1多种基因的金丝雀痘病毒疫苗表达载体，对单独应用此载体的基因疫苗或联合重组gp120亚单位疫苗的免疫效果进行了I期临床试验。这种表达载体中含有HIV-1的gp120、gp41、gag、蛋白酶、以及nef、pol区的CTL位点的编码基因。基因疫苗免疫以后，61%的健康志愿者产生了CD8+ CTL应答。最后一次免疫后3～6个月，基因特异性免疫应答的比例分别为26/81(gag)、17/77(env)、12/77(nef)、3/16(pol)。基因免疫之初联用亚单位疫苗，可以促进体液免疫应答提早出现。这项研究表明，利用金丝雀痘病毒疫苗载体表达多种HIV-1基因进行基因疫苗研究，可以诱导血清学标志阴性人体产生针对多种HIV-1抗原的持续性的CD8+ CTL应答。法国巴黎大学的Salmon-Ceron等[10]也构建了含有HIV-1 gp120 MN tm/gag/蛋白酶LAI(vCP205)的基因疫苗表达载体，单独或与p24E-V3 MN合成肽(CLTB-36)联合免疫，进行HIV-1基因疫苗的I期临床试验。研究表明，健康志愿者对基因疫苗vCP205和重组亚单位疫苗CLTB-36都有良好的耐受性。虽然基因疫苗免疫仅仅诱导低水平的中和抗体，但33%的志愿者产生了针对MN株HIV-1的特异性CTL应答，这种CTL应答是由CD4+和CD8+淋巴细胞共同介导的。这一研究结果充分提示基因疫苗作为主要诱导病毒抗原特异性CTL应答的免疫策略，对于HIV-1感染的预防和治疗具有重要的应用前景。, 百拇医药(成军)
预防艾滋病流行的疫苗是当务之急。美国宾州大学医学院病理系的Boyer等[5]在进行基因疫苗人体试验之前，首先应用黑猩猩进行了基因免疫研究。3只黑猩猩接种了表达HIV-1 env、rev、gag和pol的基因疫苗质粒DNA，尽管存在着个体差异，但都产生了针对各种抗原的特异性免疫应答。同时证明了DNA疫苗的接种还可以诱导CD8+细胞介导的细胞免疫应答。在HIV-1的env/rev DNA疫苗的I期临床试验中，6例健康志愿者肌肉注射基因疫苗的剂量是100或300 mg，在0、4、8、24周注射共4次[6]。注射300 mg基因疫苗的健康志愿者在抗原特异性淋巴细胞增殖反应和抗原特异性干扰素γ(IFNγ)、β型趋化因子(chemokine)的产生水平检测中至少一项是阳性反应。在注射300 mg基因疫苗的志愿者中，4例对rev、env都有应答。这种免疫应答不是持续的，而且具有明显的个体差异。这项HIV-1的基因疫苗研究证实DNA疫苗可以诱导多种形式的免疫应答，为进一步设计提高基因免疫效果的研究奠定了坚实的基础。同一研究小组也对15例HIV血清学标志阳性但没有症状的HIV-1感染者进行了基因疫苗的接种研究[7]。这15例HIV感染者每毫升外周血CD4+淋巴细胞计数在500以上，而且没有进行抗病毒化疗。注射的剂量为30、100、300 mg，间隔10周，采取剂量逐渐提高的策略。基因疫苗免疫后针对表达gp160的靶细胞的细胞毒T淋巴细胞活性显著升高，更重要的是在多个基因疫苗接种个体中都观察到了HIV-1包膜糖蛋白特异性的淋巴细胞增生反应。3例接受300 mg 基因疫苗的HIV-1感染者血清中MIP-1α趋化因子的水平上升，可以达到检测阳性水平。但是，低剂量接种者没有观察到免疫系统指标的变化。这些研究结果表明基因疫苗是诱导HIV-1感染者产生特异性免疫应答的重要技术手段。南弗罗立达大学医学院医学微生物与免疫学系的Ugen等[8]在完成正常和HIV-1感染的黑猩猩模型的基因疫苗免疫试验之后，也在进行HIV-1基因疫苗的人体试验研究，正在进行I期临床研究结果表明，HIV-1基因疫苗的确可以增强HIV-1感染者抗-HIV的免疫应答。初步结果表明，人体对基因疫苗免疫显示出良好的安全性和耐受性。
, 百拇医药
基因疫苗研究所应用的表达载体一般都是采用单纯的质粒载体，这也是基因疫苗区别于大部分情况下应用病毒载体的基因治疗的主要特点。美国罗彻斯特大学医科与牙科学院的Evans等[9]则构建了表达HIV-1多种基因的金丝雀痘病毒疫苗表达载体，对单独应用此载体的基因疫苗或联合重组gp120亚单位疫苗的免疫效果进行了I期临床试验。这种表达载体中含有HIV-1的gp120、gp41、gag、蛋白酶、以及nef、pol区的CTL位点的编码基因。基因疫苗免疫以后，61%的健康志愿者产生了CD8+ CTL应答。最后一次免疫后3～6个月，基因特异性免疫应答的比例分别为26/81(gag)、17/77(env)、12/77(nef)、3/16(pol)。基因免疫之初联用亚单位疫苗，可以促进体液免疫应答提早出现。这项研究表明，利用金丝雀痘病毒疫苗载体表达多种HIV-1基因进行基因疫苗研究，可以诱导血清学标志阴性人体产生针对多种HIV-1抗原的持续性的CD8+ CTL应答。法国巴黎大学的Salmon-Ceron等[10]也构建了含有HIV-1 gp120 MN tm/gag/蛋白酶LAI(vCP205)的基因疫苗表达载体，单独或与p24E-V3 MN合成肽(CLTB-36)联合免疫，进行HIV-1基因疫苗的I期临床试验。研究表明，健康志愿者对基因疫苗vCP205和重组亚单位疫苗CLTB-36都有良好的耐受性。虽然基因疫苗免疫仅仅诱导低水平的中和抗体，但33%的志愿者产生了针对MN株HIV-1的特异性CTL应答，这种CTL应答是由CD4+和CD8+淋巴细胞共同介导的。这一研究结果充分提示基因疫苗作为主要诱导病毒抗原特异性CTL应答的免疫策略，对于HIV-1感染的预防和治疗具有重要的应用前景。, 百拇医药(成军)