人类精子超微结构形态特征研究(1)
精子的形态、结构和功能发生异常是男性不育的主要原因之一。本文就正常生育男性和不育症病人精子的顶体、头部和尾部进行电镜形态观察，从超微结构变化探讨正常和异常精子的形态特征，为男性不育的诊断和治疗提供病理形态学依据。
1 材料与方法
选择 4例正常生育和7例不育3年以上的男性，年龄 28～37岁，不育男性的妻子妇科检查正常。采用手淫法留取精液，常规检查精子密度(10～30)×109/L，A+B级活动力精子<30%，活动率<35%，经伊红Y染色确定70 %以上为活精子。精子用8.5g/L NaCl 5ml洗涤2次(35000r/min，10min)，弃上清，沿离心管内壁缓慢滴加2 .5%戊二醛固定2h(4℃冰箱)，再用锇酸固定2次，Epon812环氧树脂包埋，半薄切片，甲苯胺兰染色，光镜定位后超薄切片，JEM 1200EX透射电镜观察。
2 结果
2.1 正常精子 精子分化成熟，外形正常；顶体结构完整，双层膜性结构和赤道板清晰，顶体内含物电子密度中等；核呈梨状形，长宽比在1∶1.75，核染色质电子密度均匀；尾部线粒体分布规则，大小形态较一致，微管结构完好(图1,2)。
2.2 顶体异常精子 (1)顶体脱落精子：精子顶体双层膜性结构部分或全部脱失，核露裸，部分精子核表面有少许电子密度增高的无定形物附着(图3)。(2)顶体内含有包涵体的精子：顶体内出现卵圆形或球形包涵体，包涵体内含有电子密度均匀的无定形物，并压迫精子核使其变形(图4)(3)顶体内寄生支原体的精子：顶体双层膜性结构与核分离，顶体内双层膜间隙增宽，寄生支原体。支原体大小300mm～500mm，呈卵园形，无胞壁，电子密度中等，附着于顶体膜上，精子核萎缩变形，电子密度不均匀(图5)。
2.3 头部异常精子 (1)尖头不规则形精子：核大小不一，形态不规则呈尖头形、杆状形或不规则形，并伴顶体双层膜性结构部分或全部脱落(图6)。(2)双头精子：呈双核畸形，核外形不规则，核内出现微囊，2个核拥有一个顶体(图7)。(3)无头精子：头部缺失，仅有尾部结构，线粒体数量、形态或分布发生异常(图8)。(4)头部含空泡的精子：核内出现微囊，似空泡。微囊大小不定，部分有膜性囊壁结构，囊内含有无定形物伴有顶体异常(图9)。
2.4 颈部膨大精子 颈部膨大、粗短，线粒体囊性扩张，微管消失(图10)。
2.5 尾部异常精子 (1)无尾精子：尾部脱落，核外形不规则伴核、顶体异常 (图 11)。(2)尾部分叉精子：尾部分叉呈鱼尾状，伴线粒体扩张和分布异常(图12)。(3)双尾精子：尾部呈双尾畸形，微管出现非 9+2结构 (图13)。
2.6 线粒体异常精子 这类精子出现线粒体大小不一，分布不均，部分出现畸形或巨形线粒体，并有线粒体重叠、围绕微管和缺失。其具体有以下几类：(1)线粒体畸形精子(图14)；(2)线粒体缺失精子(图15)；(3)线粒体重叠精子(图16)；(4)巨形线粒体精子(图17)。
2.7 凋亡精子 细胞核浓缩，电子密度增高，形成凋亡小体；核膜膨大形成囊状或皱折，顶体双层膜性结构消失 (图18，19，20)。, http://www.100md.com(印洪林 周晓军 黄宇烽 孙桂勤)
1 材料与方法
选择 4例正常生育和7例不育3年以上的男性，年龄 28～37岁，不育男性的妻子妇科检查正常。采用手淫法留取精液，常规检查精子密度(10～30)×109/L，A+B级活动力精子<30%，活动率<35%，经伊红Y染色确定70 %以上为活精子。精子用8.5g/L NaCl 5ml洗涤2次(35000r/min，10min)，弃上清，沿离心管内壁缓慢滴加2 .5%戊二醛固定2h(4℃冰箱)，再用锇酸固定2次，Epon812环氧树脂包埋，半薄切片，甲苯胺兰染色，光镜定位后超薄切片，JEM 1200EX透射电镜观察。
2 结果
2.1 正常精子 精子分化成熟，外形正常；顶体结构完整，双层膜性结构和赤道板清晰，顶体内含物电子密度中等；核呈梨状形，长宽比在1∶1.75，核染色质电子密度均匀；尾部线粒体分布规则，大小形态较一致，微管结构完好(图1,2)。
2.2 顶体异常精子 (1)顶体脱落精子：精子顶体双层膜性结构部分或全部脱失，核露裸，部分精子核表面有少许电子密度增高的无定形物附着(图3)。(2)顶体内含有包涵体的精子：顶体内出现卵圆形或球形包涵体，包涵体内含有电子密度均匀的无定形物，并压迫精子核使其变形(图4)(3)顶体内寄生支原体的精子：顶体双层膜性结构与核分离，顶体内双层膜间隙增宽，寄生支原体。支原体大小300mm～500mm，呈卵园形，无胞壁，电子密度中等，附着于顶体膜上，精子核萎缩变形，电子密度不均匀(图5)。
2.3 头部异常精子 (1)尖头不规则形精子：核大小不一，形态不规则呈尖头形、杆状形或不规则形，并伴顶体双层膜性结构部分或全部脱落(图6)。(2)双头精子：呈双核畸形，核外形不规则，核内出现微囊，2个核拥有一个顶体(图7)。(3)无头精子：头部缺失，仅有尾部结构，线粒体数量、形态或分布发生异常(图8)。(4)头部含空泡的精子：核内出现微囊，似空泡。微囊大小不定，部分有膜性囊壁结构，囊内含有无定形物伴有顶体异常(图9)。
2.4 颈部膨大精子 颈部膨大、粗短，线粒体囊性扩张，微管消失(图10)。
2.5 尾部异常精子 (1)无尾精子：尾部脱落，核外形不规则伴核、顶体异常 (图 11)。(2)尾部分叉精子：尾部分叉呈鱼尾状，伴线粒体扩张和分布异常(图12)。(3)双尾精子：尾部呈双尾畸形，微管出现非 9+2结构 (图13)。
2.6 线粒体异常精子 这类精子出现线粒体大小不一，分布不均，部分出现畸形或巨形线粒体，并有线粒体重叠、围绕微管和缺失。其具体有以下几类：(1)线粒体畸形精子(图14)；(2)线粒体缺失精子(图15)；(3)线粒体重叠精子(图16)；(4)巨形线粒体精子(图17)。
2.7 凋亡精子 细胞核浓缩，电子密度增高，形成凋亡小体；核膜膨大形成囊状或皱折，顶体双层膜性结构消失 (图18，19，20)。, http://www.100md.com(印洪林 周晓军 黄宇烽 孙桂勤)