糖尿病检验诊断进展和评价(3)
第三节 糖尿病实验室诊断
1、血浆葡萄糖测定 空腹(FBG)或餐后(PBG)。主要诊断依据：空腹：禁食>9h。葡萄糖氧化酶法或邻-甲苯胺法。参考正常范围：3.9-5.6 (70-100)。(注：毛细血管血糖仪测定值较之空腹或餐后3h相仿，餐后1-2h略高5-10%。
2、尿糖 分为四段尿或餐前、餐后测定法。受肾糖阀的影响，如肾小球硬化时GFR下降 ，即使血糖>200 (11.1)尿糖仍可(-)，肾性糖尿(如范可尼氏综合症、肾小管近端功能障碍、慢性肾衰、良性家族性肾性糖尿(男)、孕妇(50%)。
3、口服糖耐量实验(OGTT) 用于糖尿病可疑，未达诊断标准者。方法：过夜(禁食>9h)。空腹口服75g (原100g) 葡萄糖(表3)。
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4、糖基血红蛋白(hemoglobulin GHb)测定 血糖的监测指标，诊断的辅助指标，反映5-8周血糖水平。GHb是血中葡萄糖或磷酸葡萄糖等与血红蛋白中2个β链的N-端氨基酸发生结合反应的产物，其主要成分为HbAIc(含葡萄糖)。正常时，占血红蛋白总量的4～6%。
5、血果糖胺(fructosamine)测定 如同GHb，长期高血糖可使血中糖与蛋白质形成非酶促反应酮氨物之一-果糖胺，它反映2-4周血糖水平，正常参考值为1.56±0.64mmol/L。
6、血清1,5-脱水山梨醇(1,5-anhydroglucital, 1,5-AG)测定 1,5-AG与葡萄糖结构类似，是体内最多的多元醇。1,5-AG与血糖，24h尿糖，果糖胺，HbAIc均呈明显的负相关，糖尿病者明显降低，且不受进食、年龄、性别等因素的影响，可作为糖尿病筛选，诊断和疗效评估的指标，其正常值下限为13mg/L。
, http://www.100md.com 7、胰岛自身抗体测定 包括谷氨酸脱羧酶抗体(64K蛋白抗体)、胰岛细胞抗体(ICA)、胰岛细胞表面抗原抗体(ICSA)、胰岛素抗体(IAA)。
意义：自身免疫性糖尿病的诊断依据，IDDM的协助诊断、预报，一级亲属和高危人群的预防。
方法：免疫组织化学法，ELISA、RIA等
(1)GAD-Ab概述 谷氨酸脱羧酶(GAD)是催化谷氨酸脱羧转化为γ-氨基丁酸(GABA)的限速酶，γ-氨基丁酸是广泛存在于中枢性神经系统的抑制性神经递质，而在胰岛中可能起旁分泌和自分泌作用，参与β细胞的胰岛素合成和分泌的调节。GAD存在于脑和胰岛中，一般以脑作为提取、纯化GAD的来源。1990年Beak-keskov首次提出在1-DM血清中存在GAD自身抗体(GAD-Ab)，且认为GAD是1-DM自身免疫性胰岛炎的关键靶抗原。1991年，PNAS上Karlsen A.E.发表分离和克隆人胰岛细胞的GAD的cDNA和其一级结构。GAD有两种异构体，依其分子量称为GAD65和GAD67.分别由两个基因所编码，其一基因的cDNA长约2.0～2.2kb，编码含585aa的GAD65,其二基因的cDNA编码594肽的GAD67.二者具高度的同源性(65%)，主要不同处在其N端，而抗原决定簇却在C端。GAD在不同种属间具有高度的同源性。人与大鼠、小鼠有95%序列相同，与非哺乳类有90%相同。在人的脑和胰岛β细胞中只表达GAD65,因此1-DM者血清中仅发现针对GAD65的自身免疫性抗体。
GAD的生化 分子量约为64.8Kd，等电点(PI)为6.4、6.7和7.1.
, http://www.100md.com(罗敏)
1、血浆葡萄糖测定 空腹(FBG)或餐后(PBG)。主要诊断依据：空腹：禁食>9h。葡萄糖氧化酶法或邻-甲苯胺法。参考正常范围：3.9-5.6 (70-100)。(注：毛细血管血糖仪测定值较之空腹或餐后3h相仿，餐后1-2h略高5-10%。
2、尿糖 分为四段尿或餐前、餐后测定法。受肾糖阀的影响，如肾小球硬化时GFR下降 ，即使血糖>200 (11.1)尿糖仍可(-)，肾性糖尿(如范可尼氏综合症、肾小管近端功能障碍、慢性肾衰、良性家族性肾性糖尿(男)、孕妇(50%)。
3、口服糖耐量实验(OGTT) 用于糖尿病可疑，未达诊断标准者。方法：过夜(禁食>9h)。空腹口服75g (原100g) 葡萄糖(表3)。
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4、糖基血红蛋白(hemoglobulin GHb)测定 血糖的监测指标，诊断的辅助指标，反映5-8周血糖水平。GHb是血中葡萄糖或磷酸葡萄糖等与血红蛋白中2个β链的N-端氨基酸发生结合反应的产物，其主要成分为HbAIc(含葡萄糖)。正常时，占血红蛋白总量的4～6%。
5、血果糖胺(fructosamine)测定 如同GHb，长期高血糖可使血中糖与蛋白质形成非酶促反应酮氨物之一-果糖胺，它反映2-4周血糖水平，正常参考值为1.56±0.64mmol/L。
6、血清1,5-脱水山梨醇(1,5-anhydroglucital, 1,5-AG)测定 1,5-AG与葡萄糖结构类似，是体内最多的多元醇。1,5-AG与血糖，24h尿糖，果糖胺，HbAIc均呈明显的负相关，糖尿病者明显降低，且不受进食、年龄、性别等因素的影响，可作为糖尿病筛选，诊断和疗效评估的指标，其正常值下限为13mg/L。
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意义：自身免疫性糖尿病的诊断依据，IDDM的协助诊断、预报，一级亲属和高危人群的预防。
方法：免疫组织化学法，ELISA、RIA等
(1)GAD-Ab概述 谷氨酸脱羧酶(GAD)是催化谷氨酸脱羧转化为γ-氨基丁酸(GABA)的限速酶，γ-氨基丁酸是广泛存在于中枢性神经系统的抑制性神经递质，而在胰岛中可能起旁分泌和自分泌作用，参与β细胞的胰岛素合成和分泌的调节。GAD存在于脑和胰岛中，一般以脑作为提取、纯化GAD的来源。1990年Beak-keskov首次提出在1-DM血清中存在GAD自身抗体(GAD-Ab)，且认为GAD是1-DM自身免疫性胰岛炎的关键靶抗原。1991年，PNAS上Karlsen A.E.发表分离和克隆人胰岛细胞的GAD的cDNA和其一级结构。GAD有两种异构体，依其分子量称为GAD65和GAD67.分别由两个基因所编码，其一基因的cDNA长约2.0～2.2kb，编码含585aa的GAD65,其二基因的cDNA编码594肽的GAD67.二者具高度的同源性(65%)，主要不同处在其N端，而抗原决定簇却在C端。GAD在不同种属间具有高度的同源性。人与大鼠、小鼠有95%序列相同，与非哺乳类有90%相同。在人的脑和胰岛β细胞中只表达GAD65,因此1-DM者血清中仅发现针对GAD65的自身免疫性抗体。
GAD的生化 分子量约为64.8Kd，等电点(PI)为6.4、6.7和7.1.
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