病毒性肝炎检验诊断进展与评价(上)(1)
病毒性肝炎目前已经确定的有甲型、乙型、丙型、丁型、戊型五种病毒引起，有待阐明的有庚型肝炎病毒、TTV及SEN-V等。除肝炎病毒外，其他病毒如巨细胞病毒、EB病毒、单纯疱疹病毒、埃可病毒、风疹病毒等均可引起肝脏损害，但这类病毒所致肝炎为全身感染的一部分，不属于病毒性肝炎。
病毒性肝炎的诊断应包括对感染病原的检测和病变状态的较全面的了解。包含病原学、血清学、肝组织病理学等数方面。
对血清病毒标志物的认识仍在发展中，如HBeAg(-)未必表示病毒复制终止；HBsAg(-)也未必是排除HBV感染。
PCR技术的问世有效提高了肝炎病原学的诊断水平，已证明HBeAg(-)、甚至HBsAg(-)时可能仍存在病毒复制，因此，PCR是分子病毒学研究的重要技术。
一些传统的肝酶和肝功能试验仍较实用，如血清转氨酶(ALT、AST)反应病变的活动性，白/球蛋白定量及其比率反应病变的慢性化，凝血酶原时间延长则反应肝功能衰竭。
, 百拇医药
肝组织病理学是肝脏疾病分类的重要依据，通过肝活体组织检查能判定潜在的病变活动状态，但并不能“一锤定音”，由于国内肝穿刺开展很不普遍，目前开展的对纤维化的血清学试验，其灵敏性和特异性都较低，只能有限地提示肝纤维化的动态发展。
第一节 肝炎病毒病原学检测
一、病毒感染标志物检测
病毒感染标志物用酶免疫法(enzyme immunoassay, EIA)或放射免疫法(radioimmunoassay, RIA)检测。EIA和RIA只是配体的标记不同，反应模式基本相同。按待检标志物的性状，分别有夹心法、竞争抑制法和捕获法。EIA的灵敏性在ng/ml水平以上(RIA更灵敏一些)，是当前应用最为广泛的方法。
Axyme、 Imx系统是近年来Abbott公司推出的一种全自动封闭式的酶联分析仪，它是在酶联免疫和荧光极化免疫技术的基础上设计、并可用以进行各种免疫试验的仪器，我国已引进了该仪器及进口试剂。
, 百拇医药
用Axyme、Imx系统进行检测，与普通酶联免疫技术所不同的是包被载体不是通常使用的聚乙烯反应板，而是不足1mM的微粒，这一方法被称为MEIA(microparticle enzyme immunoassay)。其基本原理为：①待测标本中抗原或抗体与微粒上已包被相应的抗体或抗原结合，形成免疫复合物。②免疫复合物被吸附于玻璃纤维上，MEIA试验专用的反应杯中有1孔含有特别的玻璃纤维，它可以吸附前一步中所形成的免疫复合物，而其它未被吸附的物质，则通过仪器的自动冲洗从大的孔径中流出。③酶标记物与免疫复合物相结合。④加入荧光底物后，经酶催化显色。⑤通过光学系统检测荧光变化速率，可计算出被检标志物的含量。
(一)甲肝病毒标志物检测
应用固相放射免疫法(SPRIA)或酶联免疫法(ELISA)检测粪悬液中HA-Ag，于起病前二周即可检测到，发病后一周阳性率为45%，二周为12%。提示甲肝急性期或无症状感染者均可作为传染源，常用于甲肝患者粪中排毒规律或传染期的观察。
1.抗HAV-IgM 是最可靠的常规检测指标。有固相放射免疫(SPRIA)或酶免疫试验(ELISA)。血清中抗HAV-IgM出现于甲肝病毒感染的早期，发病后数天滴度很快升至峰值，高滴度持续2～4周,并在短期内降至较低水平，通常在3～6个月转为阴性(个别可超过1年)。因此是甲型肝炎早期诊断最简便和较可靠的血清学标志，也是流行病学上区分新近感染(包括临床和无症状的亚临床感染)与既往感染甲肝病毒的有力证据。, 百拇医药(张东华 陆志礞)
病毒性肝炎的诊断应包括对感染病原的检测和病变状态的较全面的了解。包含病原学、血清学、肝组织病理学等数方面。
对血清病毒标志物的认识仍在发展中，如HBeAg(-)未必表示病毒复制终止；HBsAg(-)也未必是排除HBV感染。
PCR技术的问世有效提高了肝炎病原学的诊断水平，已证明HBeAg(-)、甚至HBsAg(-)时可能仍存在病毒复制，因此，PCR是分子病毒学研究的重要技术。
一些传统的肝酶和肝功能试验仍较实用，如血清转氨酶(ALT、AST)反应病变的活动性，白/球蛋白定量及其比率反应病变的慢性化，凝血酶原时间延长则反应肝功能衰竭。
, 百拇医药
肝组织病理学是肝脏疾病分类的重要依据，通过肝活体组织检查能判定潜在的病变活动状态，但并不能“一锤定音”，由于国内肝穿刺开展很不普遍，目前开展的对纤维化的血清学试验，其灵敏性和特异性都较低，只能有限地提示肝纤维化的动态发展。
第一节 肝炎病毒病原学检测
一、病毒感染标志物检测
病毒感染标志物用酶免疫法(enzyme immunoassay, EIA)或放射免疫法(radioimmunoassay, RIA)检测。EIA和RIA只是配体的标记不同，反应模式基本相同。按待检标志物的性状，分别有夹心法、竞争抑制法和捕获法。EIA的灵敏性在ng/ml水平以上(RIA更灵敏一些)，是当前应用最为广泛的方法。
Axyme、 Imx系统是近年来Abbott公司推出的一种全自动封闭式的酶联分析仪，它是在酶联免疫和荧光极化免疫技术的基础上设计、并可用以进行各种免疫试验的仪器，我国已引进了该仪器及进口试剂。
, 百拇医药
用Axyme、Imx系统进行检测，与普通酶联免疫技术所不同的是包被载体不是通常使用的聚乙烯反应板，而是不足1mM的微粒，这一方法被称为MEIA(microparticle enzyme immunoassay)。其基本原理为：①待测标本中抗原或抗体与微粒上已包被相应的抗体或抗原结合，形成免疫复合物。②免疫复合物被吸附于玻璃纤维上，MEIA试验专用的反应杯中有1孔含有特别的玻璃纤维，它可以吸附前一步中所形成的免疫复合物，而其它未被吸附的物质，则通过仪器的自动冲洗从大的孔径中流出。③酶标记物与免疫复合物相结合。④加入荧光底物后，经酶催化显色。⑤通过光学系统检测荧光变化速率，可计算出被检标志物的含量。
(一)甲肝病毒标志物检测
应用固相放射免疫法(SPRIA)或酶联免疫法(ELISA)检测粪悬液中HA-Ag，于起病前二周即可检测到，发病后一周阳性率为45%，二周为12%。提示甲肝急性期或无症状感染者均可作为传染源，常用于甲肝患者粪中排毒规律或传染期的观察。
1.抗HAV-IgM 是最可靠的常规检测指标。有固相放射免疫(SPRIA)或酶免疫试验(ELISA)。血清中抗HAV-IgM出现于甲肝病毒感染的早期，发病后数天滴度很快升至峰值，高滴度持续2～4周,并在短期内降至较低水平，通常在3～6个月转为阴性(个别可超过1年)。因此是甲型肝炎早期诊断最简便和较可靠的血清学标志，也是流行病学上区分新近感染(包括临床和无症状的亚临床感染)与既往感染甲肝病毒的有力证据。, 百拇医药(张东华 陆志礞)