睡眠及催眠药的研制(上)(2)
1)家兔睡眠成分自动分析系统：家兔为昼行性动物，夜间睡眠为连续性，头大易于进行实验，通过分析脑电图(EEG)、肌电图(EMG)和眼电图(EOG)在清醒和睡眠中的变化特点和规律，结合特定药物(中枢兴奋药，有代表性的催眠药等)引起的变化，与航空航天大学计算机专家合作建立起家兔睡眠成分自动分析系统，并对此系统进行了稳定性、可信性和准确性试验(原理见大鼠ASS)，作为方法学已发表在1996年中的中国药理学通报。利用家兔ASS,将一昼夜分成4段，每段6小时进行记录和分析，发现16:00-22:00睡眠和觉醒比例最合适进行药物研究。
2)大鼠睡眠成分自动分析系统：本室利用家兔ASS，研究了免疫增强剂对睡眠成分的影响。但在研究过程中发现家兔睡眠成分中REM睡眠比例非常少(不足5%)，这样就无法观察药物对其影响，而这种影响又恰恰是临床上绝大多数镇静催眠药最常见的不良反应。因为减少REM睡眠会造成病人白天乏力、注意力不集中，停药后产生强烈“反跳”，出现兴奋、失眠、噩梦等，以至造成停药困难，心血管病人出现意外。
, http://www.100md.com
国外类似研究多使用大鼠，因其睡眠成分比例及受药物影响等特点与人类相似。困难之外是大鼠为夜行性动物，即使白天清醒和睡眠也是交替频繁，呈多相性，不能使用家兔的ASS，必须建立大鼠ASS，以便从多相变化中提取各种成分。
大鼠ASS是与清华大学自动控制系合作，采用分析EEG、EOG和EMG的振幅，定出阈值，根据三种睡眠成分和清醒时各种波形特点，设定逻辑判断程序，ASS进行自动分析。对大鼠ASS进行稳定性试验采用的是同一组动物，不同日期，固定时间进行记录，然后比较所得结果间差异(P均小于0.05)，说明稳定性良好；可信性试验采用的是选择性增加SWS的药物利坦色林，所获结果与国外类似实验进行比较；准确性试验采用的是随机抽样，双盲人工分析与ASS进行比较(以人工分析为100%)，结果相似率达85%以上(不同人分析结果可相差10%左右)，达到国际同类系统要求的标准。大鼠ASS将作为方法学发表在中国药理学通报。
(2)药物对睡眠成分的影响
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1)免疫增强剂对睡眠成分的影响：神经系统与免疫系统间相互影响，表现在细菌和病毒感染后在激活机体免疫系统的同时也促进睡眠；在睡眠过程中免疫功能会出现规律性变化。
实验动物：Balb/c雄性小鼠和雄性家兔两种动物，免疫增强剂：为异丙肌苷(Isoprinosine)，转移因子(Transfer factor)和胞壁酰二肽(Muramyl dipeptide, MDP)，共中MDP本室已证明了其免疫增强作用，采用家兔ASS分析睡眠成分变化，3H-TdR掺入法测定淋巴细胞增殖，ELISA测定TNF含量，小鼠胸腺细胞掺入法测定IL-1活性。目的是确认三种药物是否有免疫增强作用，是否影响睡眠成分，特别是SWS。结果如下：
(a)异丙肌苷25，50mg/kg×7d,ip均明显延长巴比妥诱导的小鼠睡眠时间(p<0.01)；增强ConA诱导的淋转和LPS诱导的淋转(均p<0.01；促进腹腔Mφ分泌IL-1(p<0.01)；促进腹腔Mφ分泌TNF(p<0.01)。
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(b)转移因子(4mg/kg, sc隔天一次，共2次)，给药前后家兔血单核细胞ConA诱导的淋转(11646±1087，20940±1934，p<0.01)，LPS诱导的淋转(6683±880，16558±1512，p<0.01)；对睡眠成分影响见表2。
(c)MDP(100μg/kg，iv)使小鼠血清TNF含量由对照的0.24±0.21μg/ml升至1.62±0.46μg/ml(p<0.01)；使TNF含量由对照的17.8±2.4μg/ml升至37.4±9.1μg/ml(p<0.01)；对睡眠成分的影响见表2。
结果表明三种免疫增强物质在增强免疫功能的同时增加了睡眠，特别是转移因子和胞壁酰二肽明显增加家兔的SWS，对浅睡眠没有明显影响。本研究结果发表在中国神经免疫学和神经病学杂志。, 百拇医药(库宝善)
2)大鼠睡眠成分自动分析系统：本室利用家兔ASS，研究了免疫增强剂对睡眠成分的影响。但在研究过程中发现家兔睡眠成分中REM睡眠比例非常少(不足5%)，这样就无法观察药物对其影响，而这种影响又恰恰是临床上绝大多数镇静催眠药最常见的不良反应。因为减少REM睡眠会造成病人白天乏力、注意力不集中，停药后产生强烈“反跳”，出现兴奋、失眠、噩梦等，以至造成停药困难，心血管病人出现意外。
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国外类似研究多使用大鼠，因其睡眠成分比例及受药物影响等特点与人类相似。困难之外是大鼠为夜行性动物，即使白天清醒和睡眠也是交替频繁，呈多相性，不能使用家兔的ASS，必须建立大鼠ASS，以便从多相变化中提取各种成分。
大鼠ASS是与清华大学自动控制系合作，采用分析EEG、EOG和EMG的振幅，定出阈值，根据三种睡眠成分和清醒时各种波形特点，设定逻辑判断程序，ASS进行自动分析。对大鼠ASS进行稳定性试验采用的是同一组动物，不同日期，固定时间进行记录，然后比较所得结果间差异(P均小于0.05)，说明稳定性良好；可信性试验采用的是选择性增加SWS的药物利坦色林，所获结果与国外类似实验进行比较；准确性试验采用的是随机抽样，双盲人工分析与ASS进行比较(以人工分析为100%)，结果相似率达85%以上(不同人分析结果可相差10%左右)，达到国际同类系统要求的标准。大鼠ASS将作为方法学发表在中国药理学通报。
(2)药物对睡眠成分的影响
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1)免疫增强剂对睡眠成分的影响：神经系统与免疫系统间相互影响，表现在细菌和病毒感染后在激活机体免疫系统的同时也促进睡眠；在睡眠过程中免疫功能会出现规律性变化。
实验动物：Balb/c雄性小鼠和雄性家兔两种动物，免疫增强剂：为异丙肌苷(Isoprinosine)，转移因子(Transfer factor)和胞壁酰二肽(Muramyl dipeptide, MDP)，共中MDP本室已证明了其免疫增强作用，采用家兔ASS分析睡眠成分变化，3H-TdR掺入法测定淋巴细胞增殖，ELISA测定TNF含量，小鼠胸腺细胞掺入法测定IL-1活性。目的是确认三种药物是否有免疫增强作用，是否影响睡眠成分，特别是SWS。结果如下：
(a)异丙肌苷25，50mg/kg×7d,ip均明显延长巴比妥诱导的小鼠睡眠时间(p<0.01)；增强ConA诱导的淋转和LPS诱导的淋转(均p<0.01；促进腹腔Mφ分泌IL-1(p<0.01)；促进腹腔Mφ分泌TNF(p<0.01)。
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(b)转移因子(4mg/kg, sc隔天一次，共2次)，给药前后家兔血单核细胞ConA诱导的淋转(11646±1087，20940±1934，p<0.01)，LPS诱导的淋转(6683±880，16558±1512，p<0.01)；对睡眠成分影响见表2。
(c)MDP(100μg/kg，iv)使小鼠血清TNF含量由对照的0.24±0.21μg/ml升至1.62±0.46μg/ml(p<0.01)；使TNF含量由对照的17.8±2.4μg/ml升至37.4±9.1μg/ml(p<0.01)；对睡眠成分的影响见表2。
结果表明三种免疫增强物质在增强免疫功能的同时增加了睡眠，特别是转移因子和胞壁酰二肽明显增加家兔的SWS，对浅睡眠没有明显影响。本研究结果发表在中国神经免疫学和神经病学杂志。, 百拇医药(库宝善)