睡眠及催眠药的研制(上)(3)
2)肿瘤坏死因子对睡眠成分影响及机制分析：分析上述免疫增强剂增加睡眠及增强免疫之间关系时，发现TNF是一种重要中介因子。文献虽已经报道TNF可以增加SWS，但缺乏机制研究，本研究利用家兔ASS分析TNF对睡眠成分的影响，同时利用荧光法测定脑内单胺类神经递质的含量。结果证明TNF剂量依赖性地增加了SWS(3.75U/kgT和7.50U/kg, iv给药后6小时内分别增加了14.3±6.9，21.3±7.4，与给药前比均p<0.01)。脑分区测定单胺神经递质含量发现，TNF主要增加大脑皮层5-HT和5-HIAA含量(均p<0.01)。结果提示在中枢可能存在这样一条途径：免疫增强物质→TNF增加→大脑皮层5-HT更新率增加→SWS增加。本研究结果已发表在神经科学杂志。
3)5-HT1A受体激动剂和5-HT2受体功能与睡眠成分间关系则是顺理成章的事。通过分析脑内存在的5-HT受体亚型，发现与睡眠关系最为密切的是5-HT1受体和5-HT2受体。国外报道激动5-HT1A受体或拮抗5-HT2受体均可以明显增加深睡眠。
, http://www.100md.com
本研究目的：一是想进一步验证大鼠ASS的可靠性，采用了重复文献相同的药物5-HT1A受体激动剂8-OH-DPAT和5-HT2受体拮抗剂Ritanserin，将所获结果进行比较；二是想探讨能否通过同时激动5-HT1A受体和拮抗5-HT2受全来更有效地增加SWS。实验动物雄性Wistar大鼠，实验药品Ritanserin和8-OH-DPAT，每日10:00-16:00进行记录，应用大鼠ASS进行分析(以占总记录时间的百分比表示)。
不同剂量的5-HT1A激动剂8-OH-DPAT(sc)，5-HT2受体拮抗剂Ritanserin(ip),以及二者联合用药对大鼠清醒及睡眠成分的影响，结果见表3。
从结果可以看出：低剂量5-HT1受体激动剂8-OH-DPAT(0.1mg/kg,sc)可以明显减少清醒，增加浅睡眠和SWS，但不影响REM睡眠；高剂量8-OH-DPAT(0.375 mg/kg,sc)则明显增加清醒比例，而显著减少各种睡眠成分的比例。Ritanserin(0.63 mg/kg,ip)可以显著增加SWS，减少REM睡眠，而清醒和浅睡眠没有显著性改变。低剂量8-OH-DPAT与Ritanserin联合给药可以明显的增加SWS和浅睡眠，明显减少清醒和REM睡眠，尤其对后者显示出协同作用。
, 百拇医药
所获结果的解释：5-HT1A亚型受体部位不同功能有差异，对药物敏感性也不同。在中缝核的5-HT能神经突触5-HT1A作为自身受体，调节5-HT神经元的放电；而在边缘系统则作为突触后受体。这两类不同功能的5-HT1A亚型受体均可被8-OH-DPAT激动。激动突触后5-HT1A受体需用高剂量8-OH-DPAT，引起活动减少、体温降低等。
Ritanserin是5-HT2受体拮抗剂中选择性较强，亲和力较高的一种，在大鼠0.63 mg/kg,(ip)对睡眠影响最明显，故本研究采用此剂量。本实验结果与B Bjorvatn and R Ursin(1990)的报道一致，即给予5-HT2拮抗剂Ritanserin后大鼠SWS明显增加，REM睡眠明显减少。
(3)激动5-HT1A受体和剥夺REM睡眠对5-HT2受体的影响：原希望激动5-HT1A受体同时拮抗5-HT2受体可以选择性增加SWS，为实现“构想”找出一条可行之路。结果却显示，随着SWS增加REM睡眠显著减少。SWS增加是所希望的，而REM睡眠减少则是极力要避免的。但这一结果却暗示5-HT1A受体、REM睡眠和5-HT2受体之间存在着内在调节关系。
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本研究是要观察激动5-HT1A受体和剥夺REM睡眠对5-HT2受体功能的影响。在大鼠皮下注射高剂量(0.38 mg/kg)或低剂量(0.01 mg/kg,)5-HT1A激动剂8-OH-DPAT1小时后，及剥夺大鼠REM睡眠24小时(水上平台法)后，立即制备大脑皮受体蛋白，用[3H]-Ketanserin作配体进行5-HT2受体结合实验，求出Kd值和Bmax值。
结果表明：皮下注射低剂量和高剂量8-OH-DPAT，均使大鼠皮层5-HT2受体Kd、Bmax值下降(相应为-53%、-30%和-51%、-45%)。说明激动5-HT1A受体数下调，这与不同剂量对睡眠成分的影响不同(表3)。可能这种影响是来自于作为自身受体的5-HT1A受体，而与突触后膜的5-HT1A受体无关。剥夺大鼠24小时REM睡眠后，5-HT2受体其Kd值(亲和力)无明显变化，而Bmax值(受体数)明显增加(+52%)。
, 百拇医药
根究这一研究结果，可以看出自身受体的5-HT1A受体激动后通过负反馈作用使5-HT释放减少，效果与拮抗突触后膜的5-HT2受体是一致的。这就把我们的注意力吸引到5-HT2受体，特别寄希望于找出分管SWS和REM睡眠的5-HT2亚型受体和相关化合物。
总之，近十年来首先提出了“催眠药开发的新构想”，建立了实现“构想”的有力工具ASS，利用ASS发现免疫增强是选择性增加SWS的一条途径，深入探讨5-HT2受体亚型功能与睡眠成分关系是又一条途径。国外近十年来的研究进展有力地支持了“构想”的可行性和正确性，并提供了更多的切入点(激素、细胞因子等)。“构想”的实现过程也将会体现出其所带来的经济价值和理论意义。, 百拇医药(库宝善)
3)5-HT1A受体激动剂和5-HT2受体功能与睡眠成分间关系则是顺理成章的事。通过分析脑内存在的5-HT受体亚型，发现与睡眠关系最为密切的是5-HT1受体和5-HT2受体。国外报道激动5-HT1A受体或拮抗5-HT2受体均可以明显增加深睡眠。
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本研究目的：一是想进一步验证大鼠ASS的可靠性，采用了重复文献相同的药物5-HT1A受体激动剂8-OH-DPAT和5-HT2受体拮抗剂Ritanserin，将所获结果进行比较；二是想探讨能否通过同时激动5-HT1A受体和拮抗5-HT2受全来更有效地增加SWS。实验动物雄性Wistar大鼠，实验药品Ritanserin和8-OH-DPAT，每日10:00-16:00进行记录，应用大鼠ASS进行分析(以占总记录时间的百分比表示)。
不同剂量的5-HT1A激动剂8-OH-DPAT(sc)，5-HT2受体拮抗剂Ritanserin(ip),以及二者联合用药对大鼠清醒及睡眠成分的影响，结果见表3。
从结果可以看出：低剂量5-HT1受体激动剂8-OH-DPAT(0.1mg/kg,sc)可以明显减少清醒，增加浅睡眠和SWS，但不影响REM睡眠；高剂量8-OH-DPAT(0.375 mg/kg,sc)则明显增加清醒比例，而显著减少各种睡眠成分的比例。Ritanserin(0.63 mg/kg,ip)可以显著增加SWS，减少REM睡眠，而清醒和浅睡眠没有显著性改变。低剂量8-OH-DPAT与Ritanserin联合给药可以明显的增加SWS和浅睡眠，明显减少清醒和REM睡眠，尤其对后者显示出协同作用。
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所获结果的解释：5-HT1A亚型受体部位不同功能有差异，对药物敏感性也不同。在中缝核的5-HT能神经突触5-HT1A作为自身受体，调节5-HT神经元的放电；而在边缘系统则作为突触后受体。这两类不同功能的5-HT1A亚型受体均可被8-OH-DPAT激动。激动突触后5-HT1A受体需用高剂量8-OH-DPAT，引起活动减少、体温降低等。
Ritanserin是5-HT2受体拮抗剂中选择性较强，亲和力较高的一种，在大鼠0.63 mg/kg,(ip)对睡眠影响最明显，故本研究采用此剂量。本实验结果与B Bjorvatn and R Ursin(1990)的报道一致，即给予5-HT2拮抗剂Ritanserin后大鼠SWS明显增加，REM睡眠明显减少。
(3)激动5-HT1A受体和剥夺REM睡眠对5-HT2受体的影响：原希望激动5-HT1A受体同时拮抗5-HT2受体可以选择性增加SWS，为实现“构想”找出一条可行之路。结果却显示，随着SWS增加REM睡眠显著减少。SWS增加是所希望的，而REM睡眠减少则是极力要避免的。但这一结果却暗示5-HT1A受体、REM睡眠和5-HT2受体之间存在着内在调节关系。
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本研究是要观察激动5-HT1A受体和剥夺REM睡眠对5-HT2受体功能的影响。在大鼠皮下注射高剂量(0.38 mg/kg)或低剂量(0.01 mg/kg,)5-HT1A激动剂8-OH-DPAT1小时后，及剥夺大鼠REM睡眠24小时(水上平台法)后，立即制备大脑皮受体蛋白，用[3H]-Ketanserin作配体进行5-HT2受体结合实验，求出Kd值和Bmax值。
结果表明：皮下注射低剂量和高剂量8-OH-DPAT，均使大鼠皮层5-HT2受体Kd、Bmax值下降(相应为-53%、-30%和-51%、-45%)。说明激动5-HT1A受体数下调，这与不同剂量对睡眠成分的影响不同(表3)。可能这种影响是来自于作为自身受体的5-HT1A受体，而与突触后膜的5-HT1A受体无关。剥夺大鼠24小时REM睡眠后，5-HT2受体其Kd值(亲和力)无明显变化，而Bmax值(受体数)明显增加(+52%)。
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根究这一研究结果，可以看出自身受体的5-HT1A受体激动后通过负反馈作用使5-HT释放减少，效果与拮抗突触后膜的5-HT2受体是一致的。这就把我们的注意力吸引到5-HT2受体，特别寄希望于找出分管SWS和REM睡眠的5-HT2亚型受体和相关化合物。
总之，近十年来首先提出了“催眠药开发的新构想”，建立了实现“构想”的有力工具ASS，利用ASS发现免疫增强是选择性增加SWS的一条途径，深入探讨5-HT2受体亚型功能与睡眠成分关系是又一条途径。国外近十年来的研究进展有力地支持了“构想”的可行性和正确性，并提供了更多的切入点(激素、细胞因子等)。“构想”的实现过程也将会体现出其所带来的经济价值和理论意义。, 百拇医药(库宝善)