肺癌分子靶点治疗的研究进展(3)
p53基因编码分子量为53KD的核蛋白，作为核内转录因子，p53蛋白能将细胞周期抑制在G1晚期，并诱导细胞凋亡。p53基因分为野生型和突变型，野生型p53蛋白是一种肿瘤抑制蛋白，能与周期蛋白依赖性蛋白激酶抑制剂结合，抑制Rb蛋白的磷酸化，使细胞周期停止在S期。而当细胞DNA损伤时，野生型p53基因可以高水平表达，启动修复系统，使DNA修复，若不能修复，则以诱导凋亡来促进细胞死亡。有证据表明，不仅有近80%的肺癌会发生p53基因的突变，而且在50-80%的严重不典型增生和原位癌中也可观察到p53基因的突变[17]，这就说明p53基因的突变在肺癌发生、发展的多个阶段均起非常重要的作用。由于p53基因的突变在肺癌中有如此高的发生频率，并且p53基因的改变发生在肺癌的各个阶段，因此将p53基因作为肺癌分子治疗的靶点，来尝试基因治疗的效果也就成了人们开展最早和最广泛的研究领域。美国坦克萨斯大学心胸外科Roth教授等领导的研究小组在这一领域作出了显赫成绩。早在1993年，他们便尝试用基因治疗的方法，在体外直接用野生型的p53基因置换突变后的p53基因，结果发现肺癌细胞的生长得到了有效的抑制[18]。随后他们又发现，用逆转录病毒和腺病毒载体转导的p53基因治疗，不但可有效抑制移植于无胸腺裸鼠中的人肺癌细胞的生长，而且当动物同时接受顺铂治疗时，这种抑制肿瘤生长的作用更加明显，这就提示p53基因增加了顺铂诱导的肿瘤细胞凋亡效应[19]。1996年，他们又将该项技术应用到了临床试验，结果发现将腺病毒载体转导的p53野生型基因直接注入6例肺癌患者的肿瘤后，有3例患者肿瘤出现了缩小，3例患者肿瘤大小稳定[20]。p53基因治疗研究取得的骄人成果，极大地激发了人们应用该方法探索治疗肺癌的兴趣，以后世界范围内开展了多个类似的研究。法国科学家开展了p53基因治疗肺癌的临床Ⅰ期和Ⅱ期研究[21]，他们将野生型p53基因直接用细针注入人体皮下的肺癌转移灶，还将野生型p53基因经纤支镜直接注入阻塞气管的肺癌肿瘤组织中，结果发现接受治疗的大多数肿瘤有了不同程度的缩小或完全消退，取得了非常好的治疗效果。目前，高效、特异的基因导入方法是限制该技术在临床广泛应用的主要障碍，也是目前该领域研究的难点和热点。
, 百拇医药
除了p53基因的突变外，其他参与调节细胞周期的抑癌基因在肺癌细胞中也常常表现出异常。Rb基因编码一种核磷酸蛋白，可调节细胞G0/G1期到S期交界处的控制点。该蛋白在磷酸化后被激活，激活后的蛋白控制了细胞周期中G0/G1期到S期的过渡。研究发现，在大部分SCLC中肿瘤细胞均缺乏功能型Rb蛋白的表达[22、23]。有人在体外和体内将功能型Rb基因转染到SCLC细胞后，发现肺癌细胞的生长受到了抑制[24]，但有关以Rb基因为靶点进行治疗的研究却寥寥无几。
不同于SCLC，几乎所有NSCLC细胞中均有Rb蛋白的正常表达，但在NSCLC中由于其他机制导致了Rb蛋白功能的失活，使Rb蛋白不能控制细胞周期由G0/G1期向S期的过渡[22、23]。现在已经明确，细胞周期素D1的过度表达和p16>蛋白的缺失可能与NSCLC中Rb蛋白的失活有关。大量的研究表明，细胞周期素D1可通过与细胞周期依赖的激酶(CDK) 4和6的结合而抑制Rb的磷酸化，而p16抑癌基因则是通过抑制CDK 4和6的激活而阻止了Rb的磷酸化，进而导致Rb基因的失活。有关细胞周期素D1的功能以及针对其的靶点治疗研究前已述及，不再赘述。至于p16基因，由于p16基因本身的一些特点，致使该基因在临床上有着较其他抑癌基因更为广泛的应用前景。研究发现，p16基因片段较小，仅为p53的1/4，所以作为基因治疗的靶基因就易于操作。此外，由于p16基因有专一的作用靶点-CDK4，因此就被认为是一种较为理想的基因药物的研究对象。目前，在应用p53基因成功地使癌细胞逆转后，p16基因成为新的、受人追捧的靶基因，人们相信，可通过它达到阻止肿瘤发展、改变细胞恶性表型的目的。迄今为止，已有几个研究在体外和体内将p16基因转染入NSCLC细胞来观察其对肿瘤细胞的生长抑制效果。美国MD Anderson癌症中心的研究人员将p16基因载体直接注入无胸腺裸鼠中移植的NSCLC细胞后，发现肿瘤细胞的生长得到了有效抑制[25]。Kawabe 等的研究发现，将野生型p16基因导入有野生型p53基因而无p16基因功能的非小细胞肺癌细胞后，肿瘤细胞对放疗敏感性有了极大增加[26] ，这就提示在进行放、化等治疗时，p16基因功能的恢复可极大地提高治疗效果。现在，一些有关肺癌中以p16基因为靶点治疗的研究还正在进行中。, 百拇医药(乔贵宾 吴一龙)
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除了p53基因的突变外，其他参与调节细胞周期的抑癌基因在肺癌细胞中也常常表现出异常。Rb基因编码一种核磷酸蛋白，可调节细胞G0/G1期到S期交界处的控制点。该蛋白在磷酸化后被激活，激活后的蛋白控制了细胞周期中G0/G1期到S期的过渡。研究发现，在大部分SCLC中肿瘤细胞均缺乏功能型Rb蛋白的表达[22、23]。有人在体外和体内将功能型Rb基因转染到SCLC细胞后，发现肺癌细胞的生长受到了抑制[24]，但有关以Rb基因为靶点进行治疗的研究却寥寥无几。
不同于SCLC，几乎所有NSCLC细胞中均有Rb蛋白的正常表达，但在NSCLC中由于其他机制导致了Rb蛋白功能的失活，使Rb蛋白不能控制细胞周期由G0/G1期向S期的过渡[22、23]。现在已经明确，细胞周期素D1的过度表达和p16>蛋白的缺失可能与NSCLC中Rb蛋白的失活有关。大量的研究表明，细胞周期素D1可通过与细胞周期依赖的激酶(CDK) 4和6的结合而抑制Rb的磷酸化，而p16抑癌基因则是通过抑制CDK 4和6的激活而阻止了Rb的磷酸化，进而导致Rb基因的失活。有关细胞周期素D1的功能以及针对其的靶点治疗研究前已述及，不再赘述。至于p16基因，由于p16基因本身的一些特点，致使该基因在临床上有着较其他抑癌基因更为广泛的应用前景。研究发现，p16基因片段较小，仅为p53的1/4，所以作为基因治疗的靶基因就易于操作。此外，由于p16基因有专一的作用靶点-CDK4，因此就被认为是一种较为理想的基因药物的研究对象。目前，在应用p53基因成功地使癌细胞逆转后，p16基因成为新的、受人追捧的靶基因，人们相信，可通过它达到阻止肿瘤发展、改变细胞恶性表型的目的。迄今为止，已有几个研究在体外和体内将p16基因转染入NSCLC细胞来观察其对肿瘤细胞的生长抑制效果。美国MD Anderson癌症中心的研究人员将p16基因载体直接注入无胸腺裸鼠中移植的NSCLC细胞后，发现肿瘤细胞的生长得到了有效抑制[25]。Kawabe 等的研究发现，将野生型p16基因导入有野生型p53基因而无p16基因功能的非小细胞肺癌细胞后，肿瘤细胞对放疗敏感性有了极大增加[26] ，这就提示在进行放、化等治疗时，p16基因功能的恢复可极大地提高治疗效果。现在，一些有关肺癌中以p16基因为靶点治疗的研究还正在进行中。, 百拇医药(乔贵宾 吴一龙)