采用PCR技术快速诊断MRSA感染对合理治疗MRSA感染的意义(3)
在调节基因的作用特别强大而诱导剂作用较弱时，虽然金葡菌含有mecA基因，mecA基因仍处于抑制状态，因而体外敏感试验呈敏感结果，而PCR结果呈阳性。由于这种带有mecA基因的MSSA一旦接触到诱导剂即有可能变为高度耐药的菌株，因此在临床上用体外敏感试验判定为敏感菌后，如果用β-内酰胺类治疗，则会导致药物治疗无效。所以，此类菌株虽然体外敏感试验结果呈敏感菌，但仍应被视为MRSA。用PCR方法诊断此类菌株的感染，不但能早期诊断，并且可避免使用诱导剂，合理选用MRSA有效药物，提高治疗效果。
4.3 简便迅速
用体外敏感试验方法检测MRSA不仅受多种试验条件的影响，而且检测速度远远慢于PCR方法。
通常情况下，从病人标本中分离培养菌株鉴定及进行敏感试验，需要三天甚至更长时间。对于重度感染的病人尤其容易造成延误，导致治疗困难或失败。同时，临床上经常能见到病人入院前已经进行抗菌药物治疗的情况，这给细菌培养分离造成了更大的困难。
就特异性和敏感性而言，有些研究者建立的通过用DNA探针杂交检测MRSA的方法可与PCR法相比。然而从操作方法及检测速度方面与PCR法相比，核酸杂交方法仍不如PCR法简便快捷。
一般的PCR方法检测MRSA，从样本DNA的制备到PCR产物电泳检测，可在一天内完成。而快速制备样本DNA的方法，使得整个检测过程只需花费约3h(25min制备样本DNA，2hPCR，30min检测PCR产物)，极为简便快捷。多数研究者检测MRSA所用标本，都是临床分离标本。因此，用PCR方法检测MRSA所用时间实际上应包括细菌分离培养的时间。有研究者尝试从血标本中直接制备DNA样本，也取得了较好的检测结果。
5、存在的问题
5.1 假阳性
PCR技术所具有的高度敏感性也给MRSA的检测带来了不利影响。PCR可在30个左右的循环后，将单拷贝模板放大上百万倍。反应管中即使是极微量的阳性模板污染，也会导致假阳性结果。这也是PCR技术不能单独广泛地应用于临床诊断的主要原因之一。防止扩增产物污染的主要方法有光化学法、酶法和引物水解法。
5.2 敏感性
虽然PCR法检测MRSA有很高的敏感性和特异性，但是由于MRSA的耐药性尚存在少量其它耐药机制，因而有少数MRSA虽然对甲氧西林等抗菌药物耐药，但却不含mecA基因，因而不能用PCR法检测出。所以，在MRSA的检测中，应该同时采用体外敏感试验为对照，以检出此类MRSA。
综上所述，PCR法检测MRSA有其它检测方法所不能取代的优点，是一个有价值的检测手段。尽管尚存在一些不足，但随着技术水平的不断改进，可以预料，PCR技术将会成为具有广泛发展前景的技术。, http://www.100md.com(李耘)
4.3 简便迅速
用体外敏感试验方法检测MRSA不仅受多种试验条件的影响，而且检测速度远远慢于PCR方法。
通常情况下，从病人标本中分离培养菌株鉴定及进行敏感试验，需要三天甚至更长时间。对于重度感染的病人尤其容易造成延误，导致治疗困难或失败。同时，临床上经常能见到病人入院前已经进行抗菌药物治疗的情况，这给细菌培养分离造成了更大的困难。
就特异性和敏感性而言，有些研究者建立的通过用DNA探针杂交检测MRSA的方法可与PCR法相比。然而从操作方法及检测速度方面与PCR法相比，核酸杂交方法仍不如PCR法简便快捷。
一般的PCR方法检测MRSA，从样本DNA的制备到PCR产物电泳检测，可在一天内完成。而快速制备样本DNA的方法，使得整个检测过程只需花费约3h(25min制备样本DNA，2hPCR，30min检测PCR产物)，极为简便快捷。多数研究者检测MRSA所用标本，都是临床分离标本。因此，用PCR方法检测MRSA所用时间实际上应包括细菌分离培养的时间。有研究者尝试从血标本中直接制备DNA样本，也取得了较好的检测结果。
5、存在的问题
5.1 假阳性
PCR技术所具有的高度敏感性也给MRSA的检测带来了不利影响。PCR可在30个左右的循环后，将单拷贝模板放大上百万倍。反应管中即使是极微量的阳性模板污染，也会导致假阳性结果。这也是PCR技术不能单独广泛地应用于临床诊断的主要原因之一。防止扩增产物污染的主要方法有光化学法、酶法和引物水解法。
5.2 敏感性
虽然PCR法检测MRSA有很高的敏感性和特异性，但是由于MRSA的耐药性尚存在少量其它耐药机制，因而有少数MRSA虽然对甲氧西林等抗菌药物耐药，但却不含mecA基因，因而不能用PCR法检测出。所以，在MRSA的检测中，应该同时采用体外敏感试验为对照，以检出此类MRSA。
综上所述，PCR法检测MRSA有其它检测方法所不能取代的优点，是一个有价值的检测手段。尽管尚存在一些不足，但随着技术水平的不断改进，可以预料，PCR技术将会成为具有广泛发展前景的技术。, http://www.100md.com(李耘)