国人体外血清检测过敏原(SIgE)研究(1)
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体外血清检测过敏原即体外血清特异性IgE检测，是高科技查找过敏原(即变应原)和诊断各种变态反应病特异性的关键手段，与传统的皮肤试验和激发试验一样，都属于变态反应病的特异性诊断，但相比之下具有安全、准确、方便等优点。
Wide等于1967年首先建立了特异性IgE(Specific IgE,SIgE)的测定方法，经各国学者近30年的研究，日臻完善，目前已成为变态反应病不可缺少的诊断手段之一。
如何评价国人体外血清特异性IgE检测是近年来变态反应专业研讨的热点课题，1993年-1995年我院对170例患者进行了特异性IgE检测和皮肤过敏原试验，具体研究报告如下：
对象及检测方法
1.1对象
, http://www.100md.com
1.1.1试验组：本研究选择170例支气管哮喘、过敏性鼻炎和荨麻疹患者为试验组，其中男90例，女80例，年龄7-66岁，均系本院住院和门诊患者，且长期居住沈阳地区。过敏性鼻炎诊断参照“变态反应鼻炎诊断和疗效评定标准”、(中华耳鼻咽喉杂志，第26卷第3期1991年)；支气管哮喘诊断参照“支气管哮喘的诊断分期和疗效标准”，(中华结核和呼吸杂志，1991年)；荨麻诊断参照“荨麻疹诊断标准”(实用变态反应学，叶世泰主编)。
1.1.2 对照组：选择本院血库献血员及其他健康人30例，男16例，女14例，年龄6-70岁，均系长期居住沈阳地区者。
1.2 方法
1.2.1 采样要求：受检者早晨空腹取静脉血3-5毫升，置于加盖试管内，常速离心，分离血清后送检。
1.2.2 检测原理：采用先进的生物素-亲和素-酶标抗体的ELISA技术和AlaSTAT免疫分析系统。在已包被配体的固相载体中，加入受检者血清和相应的配体标记变应原，这样受检者血清中相应的SIgE就与标记配体的变应原特异性结合，形成SIgE-变应的免疫复合物。然后加入抗配体，通过配体/抗配体桥联，使之与固相载体相连接。再加入酶标记的抗人IgE抗体。形成固相载体-抗配体-标记变应原-SIgE-酶标抗体复合物。该复合物再与加入的酶底物作用发生颜色反应，在一定范围内与SIgE的浓度成正比。
, 百拇医药
1.2.3 仪器试剂：仪器为美国DPC公司产Sopheia2000型酶联测定仪及相关配套产品如微量移液器、定量加液器、振荡器等。试剂采用美国DPC“AlaSTAT”药盒，利用酶免疫包被试管方法进行总IgE和特异性IgE测定。药盒由包被试管、高特异性抗体及标准品和质控构成，产品符合世界卫生组织国际标准。
1.2.4主要操作步骤：(1)向测定管中加入100ul变应原，向标准管中加入100ul参考变应原，向阳性对照管中加入100ul粉螨变应原；(2)测定管中加入50ul受检者血清，向标准管和对照管分别加入50ul标准品和50ul阳性血清；(3)室温下振荡1小时，每分钟200次；(4)每管加入50ul抗配体，室温下振荡1小时后，弃去反应液。每管加2ml清洗液，放置2分钟，弃去。如此2次，然后在吸水纸上扣干；(5)每管加入200ul酶标记抗体，室温下振荡1小时后，清洗3次，扣干；(6)每管(包括空白管)加入500ul显色液(5ml缓冲液加1片OPD药片立即配成)，室温下避光放置10分钟，期间摇动几次；(7)终止反应，每管(包括空白管)加入500ul1N的H2SO4；(8)送Sopheia2000型酶联测定仪检测。仪器测定结果分级报告如下：SigE水平(IU/ml) <0.29 0.30- 0.35 1.50- 3.00- 15.00-, http://www.100md.com(秦洪义)
体外血清检测过敏原即体外血清特异性IgE检测，是高科技查找过敏原(即变应原)和诊断各种变态反应病特异性的关键手段，与传统的皮肤试验和激发试验一样，都属于变态反应病的特异性诊断，但相比之下具有安全、准确、方便等优点。
Wide等于1967年首先建立了特异性IgE(Specific IgE,SIgE)的测定方法，经各国学者近30年的研究，日臻完善，目前已成为变态反应病不可缺少的诊断手段之一。
如何评价国人体外血清特异性IgE检测是近年来变态反应专业研讨的热点课题，1993年-1995年我院对170例患者进行了特异性IgE检测和皮肤过敏原试验，具体研究报告如下：
对象及检测方法
1.1对象
, http://www.100md.com
1.1.1试验组：本研究选择170例支气管哮喘、过敏性鼻炎和荨麻疹患者为试验组，其中男90例，女80例，年龄7-66岁，均系本院住院和门诊患者，且长期居住沈阳地区。过敏性鼻炎诊断参照“变态反应鼻炎诊断和疗效评定标准”、(中华耳鼻咽喉杂志，第26卷第3期1991年)；支气管哮喘诊断参照“支气管哮喘的诊断分期和疗效标准”，(中华结核和呼吸杂志，1991年)；荨麻诊断参照“荨麻疹诊断标准”(实用变态反应学，叶世泰主编)。
1.1.2 对照组：选择本院血库献血员及其他健康人30例，男16例，女14例，年龄6-70岁，均系长期居住沈阳地区者。
1.2 方法
1.2.1 采样要求：受检者早晨空腹取静脉血3-5毫升，置于加盖试管内，常速离心，分离血清后送检。
1.2.2 检测原理：采用先进的生物素-亲和素-酶标抗体的ELISA技术和AlaSTAT免疫分析系统。在已包被配体的固相载体中，加入受检者血清和相应的配体标记变应原，这样受检者血清中相应的SIgE就与标记配体的变应原特异性结合，形成SIgE-变应的免疫复合物。然后加入抗配体，通过配体/抗配体桥联，使之与固相载体相连接。再加入酶标记的抗人IgE抗体。形成固相载体-抗配体-标记变应原-SIgE-酶标抗体复合物。该复合物再与加入的酶底物作用发生颜色反应，在一定范围内与SIgE的浓度成正比。
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1.2.3 仪器试剂：仪器为美国DPC公司产Sopheia2000型酶联测定仪及相关配套产品如微量移液器、定量加液器、振荡器等。试剂采用美国DPC“AlaSTAT”药盒，利用酶免疫包被试管方法进行总IgE和特异性IgE测定。药盒由包被试管、高特异性抗体及标准品和质控构成，产品符合世界卫生组织国际标准。
1.2.4主要操作步骤：(1)向测定管中加入100ul变应原，向标准管中加入100ul参考变应原，向阳性对照管中加入100ul粉螨变应原；(2)测定管中加入50ul受检者血清，向标准管和对照管分别加入50ul标准品和50ul阳性血清；(3)室温下振荡1小时，每分钟200次；(4)每管加入50ul抗配体，室温下振荡1小时后，弃去反应液。每管加2ml清洗液，放置2分钟，弃去。如此2次，然后在吸水纸上扣干；(5)每管加入200ul酶标记抗体，室温下振荡1小时后，清洗3次，扣干；(6)每管(包括空白管)加入500ul显色液(5ml缓冲液加1片OPD药片立即配成)，室温下避光放置10分钟，期间摇动几次；(7)终止反应，每管(包括空白管)加入500ul1N的H2SO4；(8)送Sopheia2000型酶联测定仪检测。仪器测定结果分级报告如下：SigE水平(IU/ml) <0.29 0.30- 0.35 1.50- 3.00- 15.00-, http://www.100md.com(秦洪义)