甲状腺疾病患者促甲状腺素受体膜外区基因突变的研究(3)
目前国外文献对Graves病患者TSHR基因突变的研究主要是对TSHR膜外区的某些基因片段进行研究，而对整个hTSHR膜外区基因突变的研究甚少。而且关于hTSHR基因序列的报告均是从Graves病患者或甲状腺肿物旁的“正常”甲状腺组织中获得，而作为评判hTSHR基因异常改变的尺度-即正常人的hTSHR基因序列未见报道。本实验测定了4例正常引产胎儿的甲状腺hTSHR膜外区基因序列，明确了正常人的hTSHR膜外区基因序列。
在我国，Graves病，桥本氏甲状腺炎及原发性粘液性水肿性甲状腺功能减低等AITD是常见病和多发病，但其发病机理目前尚不十分清楚。尤其是Graves病作为自身免疫性疾病，患者体内存在着TSHR的刺激性抗体TSAb。TSAb与TSHR结合后引起甲状腺滤泡细胞增生和功能增强，被认为是导致Graves病发病的主要原因[6]。研究发现，TSHR膜外区存在着广泛的TSH结合位点和TSHRAb结合表位，是TSH和TSHRAb的主要作用部位。因此TSHR膜外区的基因突变被怀疑参与了Graves病的发病机制[2]。Bohr UR等[7]发现一例Graves病患者在TSHR膜外区基因的第253位的一个等位基因发生杂合子点突变，即由胞嘧啶(C)突变为腺嘌呤(A)，导致TSHR第52位密码子由CCC突变为ACC，故TSHR蛋白的第52位氨基酸由脯氨酸被苏氨酸所代替，进而引起TSHR蛋白结构的很大变化。故认为此突变可能是引起Graves病的病生理因素。Loos U等[8]将此突变型TSHR cDNA在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中表达，发现能明显地增加与TSH结合后细胞内cAMP的生成，使受体呈高反应性。认为这可能参与了Graves病患者甲亢的发病机制。Cuddihy RM等[9]将此突变与致Graves病的其他危险因素--HLA多个等位基因位点变化相结合一起分析，认为上述点突变是Graves病有意义的独立致病因素。但也有学者持不同意见，认为此等位基因的点突变不引起甲状腺功能的异常，只是hTSHR基因的一种多形性，并且这种多型性与Graves病的发病无关[10，11]。但不排除TSHR膜外区其他部位的基因突变对Graves病发病的重要性。
, http://www.100md.com
本实验中，无论是正常人组还是甲状腺疾病组，均未发现有TSHR膜外区的任何基因突变或多形性。他们TSHR膜外区第253位核苷酸的碱基均为野生型的胞嘧啶(C)，故第52密码子编码的氨基酸仍是野生型的脯氨酸。此外，在hTSHR膜外区第661位核苷酸，即第187密码子的最后一位核苷酸，发现有碱基替代现象，分别有20例在此位置上为胸腺嘧啶“T”，11例在此位置上为胞嘧啶“C”，导致第187密码子为“AAT”或“AAC”。但由于它们所编码的氨基酸是相同的，均为天冬酰胺，故不引起hTSHR氨基酸组成的改变。这种现象在最早各自独立报道了hTSHR基因序列的Nagayama Y等[4]和Misrahi M等[5]所绘制的hTSHR基因序列第661位碱基的不同上即有反映。他们在第661位碱基上即分别为“T”和“C”。Fuhrer D等[12]的研究也认为这种“沉默的碱基替代(silent base exchange)”现象，不会引起hTSHR膜外区的基因突变。故本实验说明hTSHR膜外区基因突变可能不是AITD的主要致病因素。AITD的发病原因可能是多方面的，是多种因素共同作用产生的结果。
, 百拇医药
目前，大量的研究证实功能自主性高功能甲状腺腺瘤和结节中存在着发生在甲状腺细胞的TSHR基因突变，它可以在没有配体(TSH，TSHRAb)结合的情况下，TSHR具有自主活性，导致甲状腺细胞增殖和功能亢进[13]。在结节性甲状腺肿与TSHR基因突变的研究中，目前报道不多，但都认为在甲状腺功能正常的结节性甲状腺肿的非功能性结节上，不论其在组织病理学上是腺瘤还是增生性结节，均没有发现TSHR基因突变[14,15]。本实验11例结节性甲状腺肿均未发现有TSHR膜外区的基因突变。说明TSHR基因突变可能不是引起结节性甲状腺肿的主要致病因素。而其它一些不同的分子病生理机制，如某些致肿瘤基因，可能是导致甲状腺细胞异常改变的病生理因素，但这仍需要进一步深入的研究。
参考文献
1.Dumont JE, Lamy F, Roger P, et al. Physiological and pathological regulation of thyroid cell proliferation and differentiation by thyrotropin and other factors. Physiol Rev, 1993, 72: 667-669.
2.Mori T, Akamizu T, Kosugi S, et al. Recent progress in TSH receptor studies with a new concept, 百拇医药(张遵城 方佩华 周津东)
在我国，Graves病，桥本氏甲状腺炎及原发性粘液性水肿性甲状腺功能减低等AITD是常见病和多发病，但其发病机理目前尚不十分清楚。尤其是Graves病作为自身免疫性疾病，患者体内存在着TSHR的刺激性抗体TSAb。TSAb与TSHR结合后引起甲状腺滤泡细胞增生和功能增强，被认为是导致Graves病发病的主要原因[6]。研究发现，TSHR膜外区存在着广泛的TSH结合位点和TSHRAb结合表位，是TSH和TSHRAb的主要作用部位。因此TSHR膜外区的基因突变被怀疑参与了Graves病的发病机制[2]。Bohr UR等[7]发现一例Graves病患者在TSHR膜外区基因的第253位的一个等位基因发生杂合子点突变，即由胞嘧啶(C)突变为腺嘌呤(A)，导致TSHR第52位密码子由CCC突变为ACC，故TSHR蛋白的第52位氨基酸由脯氨酸被苏氨酸所代替，进而引起TSHR蛋白结构的很大变化。故认为此突变可能是引起Graves病的病生理因素。Loos U等[8]将此突变型TSHR cDNA在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中表达，发现能明显地增加与TSH结合后细胞内cAMP的生成，使受体呈高反应性。认为这可能参与了Graves病患者甲亢的发病机制。Cuddihy RM等[9]将此突变与致Graves病的其他危险因素--HLA多个等位基因位点变化相结合一起分析，认为上述点突变是Graves病有意义的独立致病因素。但也有学者持不同意见，认为此等位基因的点突变不引起甲状腺功能的异常，只是hTSHR基因的一种多形性，并且这种多型性与Graves病的发病无关[10，11]。但不排除TSHR膜外区其他部位的基因突变对Graves病发病的重要性。
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本实验中，无论是正常人组还是甲状腺疾病组，均未发现有TSHR膜外区的任何基因突变或多形性。他们TSHR膜外区第253位核苷酸的碱基均为野生型的胞嘧啶(C)，故第52密码子编码的氨基酸仍是野生型的脯氨酸。此外，在hTSHR膜外区第661位核苷酸，即第187密码子的最后一位核苷酸，发现有碱基替代现象，分别有20例在此位置上为胸腺嘧啶“T”，11例在此位置上为胞嘧啶“C”，导致第187密码子为“AAT”或“AAC”。但由于它们所编码的氨基酸是相同的，均为天冬酰胺，故不引起hTSHR氨基酸组成的改变。这种现象在最早各自独立报道了hTSHR基因序列的Nagayama Y等[4]和Misrahi M等[5]所绘制的hTSHR基因序列第661位碱基的不同上即有反映。他们在第661位碱基上即分别为“T”和“C”。Fuhrer D等[12]的研究也认为这种“沉默的碱基替代(silent base exchange)”现象，不会引起hTSHR膜外区的基因突变。故本实验说明hTSHR膜外区基因突变可能不是AITD的主要致病因素。AITD的发病原因可能是多方面的，是多种因素共同作用产生的结果。
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目前，大量的研究证实功能自主性高功能甲状腺腺瘤和结节中存在着发生在甲状腺细胞的TSHR基因突变，它可以在没有配体(TSH，TSHRAb)结合的情况下，TSHR具有自主活性，导致甲状腺细胞增殖和功能亢进[13]。在结节性甲状腺肿与TSHR基因突变的研究中，目前报道不多，但都认为在甲状腺功能正常的结节性甲状腺肿的非功能性结节上，不论其在组织病理学上是腺瘤还是增生性结节，均没有发现TSHR基因突变[14,15]。本实验11例结节性甲状腺肿均未发现有TSHR膜外区的基因突变。说明TSHR基因突变可能不是引起结节性甲状腺肿的主要致病因素。而其它一些不同的分子病生理机制，如某些致肿瘤基因，可能是导致甲状腺细胞异常改变的病生理因素，但这仍需要进一步深入的研究。
参考文献
1.Dumont JE, Lamy F, Roger P, et al. Physiological and pathological regulation of thyroid cell proliferation and differentiation by thyrotropin and other factors. Physiol Rev, 1993, 72: 667-669.
2.Mori T, Akamizu T, Kosugi S, et al. Recent progress in TSH receptor studies with a new concept, 百拇医药(张遵城 方佩华 周津东)