hTPO抗原决定簇基因的原核表达及初步临床应用(3)
低温诱导表达(28℃)，外源蛋白大部分可溶，而37℃诱导表达时外源蛋白主要以包涵体形式存在于沉淀中，可溶部分极少。不同诱导剂浓度、诱导时间的条件组合，外源蛋白产量亦不同。当诱导剂浓度较低时(0.1mM)，随诱导时间的延长外源蛋白产量逐渐提高；当诱导剂浓度为1mM时，诱导2小时外源蛋白的产量即达到最大，延长诱导时间产量无明显提高。
3.表达产物的纯化与定量
表达菌上清经亲和层析纯化后产物SDS-PAGE，可见在分子量接近67KD处有一清晰蛋白带，相当于GST(分子量26KD)与hTPO抗原决定簇片段(分子量理论计算值37KD)的融合体，在相当于GST位置有少量蛋白混杂，考虑为表达不延续或超声碎菌时融合蛋白断裂所致，见图2。, 百拇医药(何红鹏)