人vasostatin的克隆、表达、纯化及活性检测
http://www.100md.com
中国药品生物制品检定所 北京100050 李永红；王军志；饶春明；张翊
vasosTaTIn|基因克隆|表达|生物学活性,人vasosTaTIn的克隆、表达、纯化及活性检测
参见附件(92kb)。
中国药品生物制品检定所 北京100050 李永红；王军志；饶春明；张翊
关键词：vasostatin；基因克隆；表达；生物学活性
摘要：从成人肝脏cDNA文库中,PCR扩增得到人vasostatin基因编码区序列,将此序列插入原核表达载体pQE3 0进行表达,SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS PAGE)测定表明产物以包涵体形式存在,表达量占菌体总蛋白量的5 0 %以上.包涵体洗涤后溶于8mol/L尿素溶液,在变性条件下通过镍 氨三乙酸(Ni NTA)金属螯合亲和层析柱进行纯化后,再经透析进行复性.N端氨基酸序列、分子质量、等电点等理化指标的测定结果与理论值相符.用内皮细胞增殖试验、内皮细胞迁移试验以及鸡胚尿囊膜血管生成试验等方法进行活性检测,证实复性的表达产物具有抑制内皮细胞增殖和迁移、抑制鸡胚尿囊膜血...
中国药品生物制品检定所 北京100050 李永红；王军志；饶春明；张翊
关键词：vasostatin；基因克隆；表达；生物学活性
摘要：从成人肝脏cDNA文库中,PCR扩增得到人vasostatin基因编码区序列,将此序列插入原核表达载体pQE3 0进行表达,SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS PAGE)测定表明产物以包涵体形式存在,表达量占菌体总蛋白量的5 0 %以上.包涵体洗涤后溶于8mol/L尿素溶液,在变性条件下通过镍 氨三乙酸(Ni NTA)金属螯合亲和层析柱进行纯化后,再经透析进行复性.N端氨基酸序列、分子质量、等电点等理化指标的测定结果与理论值相符.用内皮细胞增殖试验、内皮细胞迁移试验以及鸡胚尿囊膜血管生成试验等方法进行活性检测,证实复性的表达产物具有抑制内皮细胞增殖和迁移、抑制鸡胚尿囊膜血...
您现在查看是摘要介绍页，详见CAJ附件(92kb)。