日本血吸虫组织蛋白酶L1基因的编码区全序列分析及克隆

http://www.100md.com 中山大学中山医学院寄生虫学教研室 广州 510080 雷智刚；孟锦绣；何蔼；李卓雅；易冰；詹希美

RT-PCR|日本血吸虫|组织蛋白酶L|基因克隆

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     中山大学中山医学院寄生虫学教研室 广州 510080 雷智刚；孟锦绣；何蔼；李卓雅；易冰；詹希美

    关键词：RT-PCR；日本血吸虫；组织蛋白酶L；基因克隆

    摘要：目的 分析日本血吸虫组织蛋白酶L1(SjCL1)基因编码区的完整序列,并定向克隆到真核表达质粒pcD-NA3中。 方法 从日本血吸虫成虫提取总RNA,进行反向巢式RT-PCR,T载体克隆后测序。PCR扩增SjCL1基因的编码区序列,并将扩增产物克隆到pcDNA3质粒的BamHI和Xhol位点上。结果 通过反向巢式RT-PCR扩增出332 bp SjCL1基因5'端序列,测序后与报道的SiCL1基因部分序列拼接,可得到一个编码317个氨基酸的完整编码区序列。PCR特异性扩增出SjCL1编码区基因序列,其大小约为1 kb。经酶切、PCR鉴定和测序表明所构建的质粒pcDNA-SjCL1中含有所扩增的基因序列。 结论 构建了含...

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