新型MGB探针在沙眼衣原体实时PCR检测中的应用
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第四军医大学基因诊断研究所 西安710032 赵锦荣;白玉杰;王胜春;郭晏海;张庆华;张菊;阎小君
参见附件(66kb)。
第四军医大学基因诊断研究所 西安710032 赵锦荣;白玉杰;王胜春;郭晏海;张庆华;张菊;阎小君
关键词:沙眼衣原体;聚合酶链反应;荧光定量
摘要:为建立基于TaqMan MGB探针的沙眼衣原体DNA荧光定量PCR检测方法,探讨其临床应用价值,用PCR法扩增沙眼衣原体隐蔽质粒pLVG44 0 2 464~2 980nt段,并克隆入pMD18 T载体用作参比模板,设计一对引物和一个TaqMan MGB探针,优化反应条件,建立沙眼衣原体DNA荧光定量PCR检测系统,并运用该系统同时应用连接酶链式反应(LCR)法对临床标本进行检测.结果显示所建立的沙眼衣原体DNA荧光定量PCR检测系统,最低检测限度为1DNA拷贝每反应;在10 0 ~10 9DNA拷贝每反应范围内,Ct 值(每个反应管内的荧光信号达到设定的域值时所经历的循环数)和DNA拷贝数呈线性关系(r >0 990 ) ...
第四军医大学基因诊断研究所 西安710032 赵锦荣;白玉杰;王胜春;郭晏海;张庆华;张菊;阎小君
关键词:沙眼衣原体;聚合酶链反应;荧光定量
摘要:为建立基于TaqMan MGB探针的沙眼衣原体DNA荧光定量PCR检测方法,探讨其临床应用价值,用PCR法扩增沙眼衣原体隐蔽质粒pLVG44 0 2 464~2 980nt段,并克隆入pMD18 T载体用作参比模板,设计一对引物和一个TaqMan MGB探针,优化反应条件,建立沙眼衣原体DNA荧光定量PCR检测系统,并运用该系统同时应用连接酶链式反应(LCR)法对临床标本进行检测.结果显示所建立的沙眼衣原体DNA荧光定量PCR检测系统,最低检测限度为1DNA拷贝每反应;在10 0 ~10 9DNA拷贝每反应范围内,Ct 值(每个反应管内的荧光信号达到设定的域值时所经历的循环数)和DNA拷贝数呈线性关系(r >0 990 ) ...
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