端粒酶逆转录酶基因启动子调控的肿瘤细胞特异表达载体的构建和鉴定
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宝生物工程(大连)有限公司；大连医科大学附属第四医院普通外科 116001 尹家俊；胡祥；傅攀峰；袁晓东；张锦
端粒|末端转移酶|启动区(遗传学)|基因治疗
参见附件(73kb)。
宝生物工程(大连)有限公司；大连医科大学附属第四医院普通外科 116001 尹家俊；胡祥；傅攀峰；袁晓东；张锦瑜
关键词：端粒；末端转移酶；启动区(遗传学)；基因治疗
摘要：目的 利用端粒酶逆转录酶基因启动子,构建能在人肿瘤细胞中特异表达目的基因的表达载体。方法 通过PCR方法从pEGFP N1质粒中扩增出绿色荧光蛋白基因并克隆到逆转录病毒载体pLNCX的多克隆位点上,命名为pLNCX EGFP。设计含有特定酶切位点的引物,从人基因组中扩增出端粒酶逆转录酶基因启动子序列,将该序列片段定向克隆到已用限制性内切酶切除巨细胞病毒启动子的pLNCX EGFP载体上,构建成端粒酶逆转录酶基因启动子调控的含有绿色荧光蛋白报告基因的表达载体pLNT EGFP。将该表达载体pLNT EGFP瞬时转染高表达端粒酶活性的HLF细胞株和不表达端粒酶活性的WI38...
宝生物工程(大连)有限公司；大连医科大学附属第四医院普通外科 116001 尹家俊；胡祥；傅攀峰；袁晓东；张锦瑜
关键词：端粒；末端转移酶；启动区(遗传学)；基因治疗
摘要：目的 利用端粒酶逆转录酶基因启动子,构建能在人肿瘤细胞中特异表达目的基因的表达载体。方法 通过PCR方法从pEGFP N1质粒中扩增出绿色荧光蛋白基因并克隆到逆转录病毒载体pLNCX的多克隆位点上,命名为pLNCX EGFP。设计含有特定酶切位点的引物,从人基因组中扩增出端粒酶逆转录酶基因启动子序列,将该序列片段定向克隆到已用限制性内切酶切除巨细胞病毒启动子的pLNCX EGFP载体上,构建成端粒酶逆转录酶基因启动子调控的含有绿色荧光蛋白报告基因的表达载体pLNT EGFP。将该表达载体pLNT EGFP瞬时转染高表达端粒酶活性的HLF细胞株和不表达端粒酶活性的WI38...
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