反向点杂交快速诊断非缺失型α-地中海贫血
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第一军医大学医学遗传学研究室 510515广州 李莉艳；莫秋华；徐湘民
α-地中海贫血|反向点杂交|基因诊断
参见附件(138kb)。
第一军医大学医学遗传学研究室 510515广州 李莉艳；莫秋华；徐湘民
关键词：α-地中海贫血；反向点杂交；基因诊断
摘要：目的 建立一种简便快速筛查非缺失型α-地中海贫血点突变的反向点杂交(reverse dotblot,RDB)技术。方法 将生物素直接标记在引物上,选择性扩增人α2珠蛋白基因,将PCR产物与固化在膜条上的寡核苷酸探针杂交,洗膜、显色后分析结果。结果 采用生物素标记的引物Bio- C1和Bio- C3可选择性扩增α2珠蛋白基因,PCR产物长度为10 85 bp,该标记片段与固相探针构成的反向点杂交检测体系,可以分辨出中国人群中已知的6种非缺失型α-地中海贫血点突变。结论 该反向点杂交检测体系无需巢式PCR扩增,一步选择性扩增的α2珠蛋白基因产物即可用于杂交;无需进行检测标记.
第一军医大学医学遗传学研究室 510515广州 李莉艳；莫秋华；徐湘民
关键词：α-地中海贫血；反向点杂交；基因诊断
摘要：目的 建立一种简便快速筛查非缺失型α-地中海贫血点突变的反向点杂交(reverse dotblot,RDB)技术。方法 将生物素直接标记在引物上,选择性扩增人α2珠蛋白基因,将PCR产物与固化在膜条上的寡核苷酸探针杂交,洗膜、显色后分析结果。结果 采用生物素标记的引物Bio- C1和Bio- C3可选择性扩增α2珠蛋白基因,PCR产物长度为10 85 bp,该标记片段与固相探针构成的反向点杂交检测体系,可以分辨出中国人群中已知的6种非缺失型α-地中海贫血点突变。结论 该反向点杂交检测体系无需巢式PCR扩增,一步选择性扩增的α2珠蛋白基因产物即可用于杂交;无需进行检测标记.
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