重组逆转录病毒pLNCX2-GDNF转染许旺细胞及其表达

http://www.100md.com 上海第二医科大学附属第九人民医院整复外科 200011；现在上海第二医科大学附属仁济医院整形外科 平萍；李青

许旺细胞|胶质细胞源性神经营养因子|基因转染|逆转录病毒,重组逆转录病毒PLNCX2-GDNF转染许旺细胞及其表达

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     上海第二医科大学附属第九人民医院整复外科 200011；现在上海第二医科大学附属仁济医院整形外科 平萍；李青峰；张涤生

    关键词：许旺细胞；胶质细胞源性神经营养因子；基因转染；逆转录病毒

    摘要：目的 利用基因转染技术将胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)基因转入许旺细胞(SC)以提高其分泌该因子的水平。 方法 应用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)方法合成GDNFcDNA片段,以逆转录病毒pLNCX2为载体导入许旺细胞内,并运用RT PCR、免疫细胞化学染色、ELISA及运动神经元联合培养法检测外源性基因在mRNA和蛋白水平的表达及其产物的活性。 结果 RT PCR检测结果示GDNF SCs表达GDNFmRNA的水平明显优于SCs ;免疫细胞化学检测发现CDNF SCs抗GDNF蛋白染色呈强阳性,正常SCs呈弱阳性;ELISA法检测结果示转染后4周CDNF SCs分泌GDNF蛋白的水平升至正常SCs的5 1倍;...

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