转染金属蛋白酶抑制剂2基因对损伤血管平滑肌细胞核因子-κB和蛋白激酶C的影响
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复旦大学附属华山医院外科教研室;复旦大学遗传研究所 200040上海 钟林;蔡端;余波;张延龄;岳军;陈琦
血管疾病|金属蛋白酶类组织抑制剂|蛋白激酶C|再狭窄
参见附件(56kb)。
复旦大学附属华山医院外科教研室;复旦大学遗传研究所 200040上海 钟林;蔡端;余波;张延龄;岳军;陈琦
关键词:血管疾病;金属蛋白酶类组织抑制剂;蛋白激酶C;再狭窄
摘要:目的 探讨血管平滑肌细胞(VSMC)损伤后金属蛋白酶(MMPs)和蛋白激酶C(PKC)、核因子-κB(NF -κB)表达的变化。 方法 采用脂质体对VSMC转染金属蛋白酶抑制剂2 (TIMP- 2 )基因进行基因转染,并用Westernblot加以鉴定,分别用酶谱分析法、凝胶电泳迁移率分析技术(EMSA)、逆转录-聚合酶链反应(RT -PCR)和免疫细胞化学检测该细胞克隆MMPs、NF -κB的活性变化和PKCαmRNA、蛋白的表达水平。 结果 体外损伤的VSMC金属蛋白酶显著增加。PKCα、NF -κB在正常VSMC中很少表达,但在损伤的VSMC中这种表达非常显著,对兔VSMC进行TIMP - 2转染后,损伤的VSMCMMP - 2 ,9...
复旦大学附属华山医院外科教研室;复旦大学遗传研究所 200040上海 钟林;蔡端;余波;张延龄;岳军;陈琦
关键词:血管疾病;金属蛋白酶类组织抑制剂;蛋白激酶C;再狭窄
摘要:目的 探讨血管平滑肌细胞(VSMC)损伤后金属蛋白酶(MMPs)和蛋白激酶C(PKC)、核因子-κB(NF -κB)表达的变化。 方法 采用脂质体对VSMC转染金属蛋白酶抑制剂2 (TIMP- 2 )基因进行基因转染,并用Westernblot加以鉴定,分别用酶谱分析法、凝胶电泳迁移率分析技术(EMSA)、逆转录-聚合酶链反应(RT -PCR)和免疫细胞化学检测该细胞克隆MMPs、NF -κB的活性变化和PKCαmRNA、蛋白的表达水平。 结果 体外损伤的VSMC金属蛋白酶显著增加。PKCα、NF -κB在正常VSMC中很少表达,但在损伤的VSMC中这种表达非常显著,对兔VSMC进行TIMP - 2转染后,损伤的VSMCMMP - 2 ,9...
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