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编号:10492875
人类疱疹病毒8型肿瘤转化基因K12的分离及在昆虫细胞中的表达
http://www.100md.com 南京医科大学微生物学与免疫学系 江苏南京210029 卢春;朱建中
人类疱疹病毒8型|肿瘤转化基因K12|杆状病毒表达载体
    参见附件(514kb)。

     南京医科大学微生物学与免疫学系 江苏南京210029 卢春;朱建中

    关键词:人类疱疹病毒8型;肿瘤转化基因K12;杆状病毒表达载体

    摘要:目的:分离人类疱疹病毒8型(HHV-8)肿瘤转化基因K12,克隆至杆状病毒载体并在昆虫细胞中作尝试性表达。方法:设计一对引物,在引物的5′端分别引入BamHI、EcoRI酶切位点,以佛波脂刺激的原发性渗出性淋巴瘤(PEL)细胞系BCBL-1细胞总DNA为模板,PCR扩增HHV-8肿瘤转化基因K12。将经序列测定后的PCR产物克隆进杆状病毒转移载体pVL1393中,构建成重K12杆状病毒转移载体pVL-K12,并与线性BaculoGold病毒DNA共转染昆虫细胞Sf9,获得重组病毒。RT-PCR检测K12mRNA转录水平;间接免疫荧光染色(IFA)检测K12编码蛋白在Sf9细胞中的表达状况。结果:含HHV-8K12基因重组杆状病毒.

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