野生型p16基因对人瘢痕疙瘩成纤维细胞生长及代谢影响的实验研究

http://www.100md.com 第四军医大学西京医院烧伤科 710032西安 韩军涛；陈璧；刘淑娟；汤朝武

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     第四军医大学西京医院烧伤科 710032西安 韩军涛；陈璧；刘淑娟；汤朝武

    关键词：p16基因；瘢痕疙瘩；成纤维细胞；基因疗法；转染

    摘要：目的 探讨野生型p16基因对人瘢痕疙瘩成纤维细胞(keloid fibro blasts,KFb)生长增殖及DNA合成代谢的影响。 方法 构建含p16cDNA片段的真核表达载体pcDNA3 p16 ,采用脂质体介导的基因转染法,将其导入体外培养的KFb中,并用G4 18筛选阳性克隆。随后对已转染及未转染的KFb进行免疫细胞化学染色,观察p16蛋白的表达,并通过绘制细胞生长曲线及采用氚标记胸腺嘧啶脱氧核苷(3 H TdR)掺入法,比较转染前后细胞在生长增殖及DNA合成代谢方面的变化。结果 经酶切鉴定证实,pcDNA3 p16构建成功。已转染的KFb经G4 18筛选,出现阳性克隆,并有p16蛋白表达;与正常KFb比较...

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