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尿蛋白的测定
http://www.100md.com 2004年4月6日 中微元素医学网
     什么是尿蛋白定性试验和定量试验?

    尿蛋白定性试验:

    尿蛋白定性试验是一种筛选及半定量蛋白尿的方法,是一项对诊断肾脏疾病和观察疗效有一定临床意义的初步理化检查。尿蛋白定性的方法很多,常用的有:

    ◆试纸法:是利用尿蛋白与某些染料如溴酚蓝相结合而产生颜色变化的原理,将试纸和尿液的变色反应和标准颜色进行比较,来测定尿蛋白含量,用“—”到“++++”分级来表示其浓度。此法的优点是方便、快捷,可适用于基层,但敏感性较差,影响因素较多如尿pH碱性时、盐类、色素等因素,易发生假阳性反应。

    ◆磺柳酸法:可作为临床首选的方法。是应用磺柳酸来沉淀尿中蛋白质,根据尿的混浊度来判断蛋白含量,分别用“—”到“++ ++”来标示分级。其优点是方法简便,敏感性高,不易漏诊,适

    用于工作量大的实验室;缺点是影响因素多,易呈假阳性反应。
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    ◆加热醋酸法:其原理是加热使蛋白质凝固变性。方法是取弱酸性的清晰尿液或已离心沉淀后的上层清晰尿液约8亳升,置于硬试管内,加热尿液斜面至沸腾,直立试管,在黑色背景下,观察尿液煮沸部与未煮沸部的混浊程度是否有差异。若加热后煮沸部混浊,可有两种原因所致,一种是尿中蛋白所致,另—种是尿中磷酸盐所致。此时需加5%醋酸5~10滴再煮至沸以消除尿中磷酸盐所形成的混浊,提高准确性。再次观察尿的混浊度改变情况,若混浊消失为阴性,不消失为阳性。

    以上三法中试纸法和磺柳酸法对白蛋白的敏感性较对球蛋白的敏感性高。其中磺柳酸法和加热醋酸法都是以混浊度来进行分级,具体判断标准为:

    ◆无混浊为(—) 黑色背景下无混浊,尿蛋白小于0.1克/升;

    ◆轻微混浊(±) 见轻微混浊,尿蛋白0.1~0.2克/升;

    ◆混浊无颗粒(+) 尿蛋白0.2—1.0克/升;
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    ◆明显颗粒状混浊,无絮状沉淀(++) 尿蛋白1.0一2.0克/升;

    ◆明显混浊,絮状沉淀,无凝固块(+++) 尿蛋白2.0—4.0克/升;

    ◆明显混浊,絮状沉淀,有凝固块(++++) 尿蛋白大于4.0克/升。

    ◆注意事项:

    尿标本要及时进行检查,以免久置后,大量细菌生长而引起假阳性反应,尿标本的比重应超过1.015,且以晨尿最好。

    尿液需为清晰的尿液,如有混浊或大量红、白细胞,要先做离心沉淀或过滤澄清后方可作为检查的标本。另外,所取尿液标本要尽量考虑到其他分泌物对结果的影响,女性病人尤其要注意。

    操作过程中注意勿将尿液溅出,以免在试管外壁留下痕迹而影响试管的透明度,不方便观察结果。
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    尿蛋白定性试验所测的结果只是一次尿液中蛋白的含量,又受尿浓缩等因素的影响,常不能准确代表尿蛋白的总排量。如要测定24小时尿中蛋白质的总的丢失量,则可采用尿蛋白定量试验。

    ◆尿蛋白定量试验:

    尿蛋白定量试验是一种较尿蛋白定性试验更准确、更有临床价值的确定尿蛋白丢失量及轻、中、重度蛋白尿的方法,是诊断和治疗肾脏疾病的重要依据。目前临床常用的有:

    比色法:即双缩脲法,是尿蛋白定量的经典方法,其操作繁锁,并不常用。但其精确度高,在需要精确观察尿蛋白排出量的情况下使用较有意义。

    比浊法:即磺柳酸-硫酸钠比浊法,其操作简便、快速,是应用最广和临床首选的方法。

    苦味酸法:一般正常人24小时尿蛋白总量不超过150毫克。

    (1)需取新鲜尿液作为检查标本。

    (2)尿液pH值在5.0左右较为合适。大于6.0时,可加5%乙酸或0.IN盐酸使pH下降,以减少磷酸盐沉淀覆盖视野。标本含大量尿酸盐时通过加温除之,而不宜采用碱液以免使管型物质崩解。

    (3)妇女经期不宜化验,以免出现假阳性结果。出现脓尿时要注意区分泌尿系统炎症和成年妇女的生殖系统炎症。, 百拇医药