反相高效液相色谱法测定复方磺胺甲唑片中磺胺甲唑、甲氧苄啶含量
【摘要】 目的 采用反相高效液相色谱法测定复方磺胺甲唑片中磺胺甲唑、甲氧苄啶的含量。方法 HPLC法，Serial C18色谱柱，甲醇-0.05mol/L磷酸盐缓冲液(25∶75)为流动相。检测波长为240nm，外标法测定。结果 SMZ平均回收率为98.7%，RSD=1.06%。TMP平均回收率为98.6%，RSD=0.87%。结论 该方法简便、准确、可靠。可用于复方磺胺甲唑片的含量测定。
关键词 HPLC 甲醇磷酸盐缓冲液
【文献标识码】 B 【文章编号】 1609-6614(2003)21-2000-02
复方磺胺甲唑片为磺胺类抗菌药，是磺胺甲唑与甲氧苄啶的复方制剂，中国药典(2000年版)采用双波长紫外分光光度法测定含量 [1] ，美国药典采用高效液相法测定含量 [2] 。本品采用与美国药典不同的色谱条件测定两组分含量，方法简便、结果准确、可靠。
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1 仪器与试药
1.1 仪器 日本岛津Shimadzu LC-10AT高效液相色谱仪，岛津SPD-10A紫外检测器，岛津UV-2501型紫外分光光度计，Sartrius BP211D电子分析天平。
1.2 药品与试剂 复方磺胺甲唑片为市售药(批号:020202、030207、030501);磺胺甲唑、甲氧苄啶对照品(中国药品生物制品检定所);甲醇为色谱纯(江苏汉邦科技有限公司);磷酸二氢钾为分析纯，水为蒸馏水。
2 方法与结果
2.1 色谱条件 色谱柱:Serial C18柱(4.6mm×250mm，5μ);流动相:甲醇-磷酸盐缓冲液(0.05mol/L磷酸二氢钾1000ml，加三乙胺7ml，用磷酸调节pH值至5.90±0.05)(25∶75);流速:0.8ml/min;温度:室温;检测波长:240nm;进样体积:10μl。取2.3项下供试品溶液测定，结果理论塔板数按磺胺甲基异唑峰计算为8000，两峰分离度为11.3。同法制备不含SMZ及TMP空白样品测定，辅料无吸收。见图1。
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2.2 对照品溶液制备 精密称取干燥至恒重的磺胺甲唑(SMZ)对照品50mg与甲氧苄啶(TMP)对照品10mg，置100ml量瓶中加甲醇适量，振摇使磺胺甲唑与甲氧苄啶溶解，加甲醇稀释至刻度，摇匀(贮备液)，精密吸取5ml，置 25ml量瓶中，加上述磷酸盐缓冲液(pH5.90)稀释至刻度。
2.3 供试品溶液制备 取样品20片，研细，精密称取细粉适量(约相当于磺胺甲唑50mg与甲氧苄啶10mg)，置100ml量瓶中。按2.2项下自“加甲醇适量”起操作。
2.4 标准曲线绘制 分别精密吸取2.2项下对照品贮备液1.0ml、2.0ml、5.0ml、10.0ml、15.0ml置于25ml量瓶中，加上述磷酸盐缓冲液(pH5.90)稀释至刻度。按上述色谱条件进行测定，以峰面积为纵坐标，以浓度(μg/ml)为横坐标作图，得线性回归方程:
SMZ Y=3.920×10 4 ×-2.226×10 4 r=0.9997
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TMP Y=5.427×10 4 ×-1.111×10 3 r=0.9998
2.5 进样精密度试验 取上述对照品溶液，连续进样5次，测定峰面积(以磺胺甲唑峰计算)，RSD=0.65%。
2.6 供试品溶液稳定性试验 取上述供试品溶液，分别于0、2、4、6、10、12h进样测定峰面积。RSD=1.92%(SMZ)、RSD=1.63%(TMP)。
2.7 重复性试验 取同一批样品，按2.3项下配置5份供试品溶液，按2.1色谱条件测定，按外标法计算含量。RSD分别为2.67%(SMZ)、3.34%(TMP)表明方法重复性良好。
2.8 回收率试验 精密称取干燥至恒重的SMZ对照品50mg、TMP对照品10mg(共5份)，置100ml量瓶中;另精密称取已知含量的复方磺胺甲唑细粉适量(约相当于SMZ50mg，TMP10mg)置100ml量瓶中。按2.2项下自“加甲醇适量”起制备贮备液，分别精密吸取对照品贮备液及样品贮备液5ml置于25ml量瓶中，加磷酸盐缓冲液(pH5.90)稀释至刻度。按2.1色谱条件进行测定。结果见表1。
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表1 回收率试验
续表
2.9 样品测定 分别取样品按2.3项下制备，按2.1色谱条件操作。按外标法计算含量，结果见表2。
表2 样品测定结果
3 讨论
本文采用高效液相法测定复方磺胺甲唑片中两组分含量，试验结果，该方法操作简便，结果准确、可靠，与药典法相比测定结果差异无显著性，可用于测定复方磺胺甲唑片中的磺胺甲唑、甲氧苄啶含量。 (本文图见封三)
参考文献
1 中华人民共和国卫生部药典委员会编.中国药典(二部).北京:化学工业出版社，2000，518.
2 By authority of the United Sta tes Pharmacopeial Convention.USP-NF.Published by the Board of Trustees，1995(Ⅱ)，1464.
作者单位:223001江苏省淮安市药品检验所
(编辑罗 彬), http://www.100md.com(郝立芳)
关键词 HPLC 甲醇磷酸盐缓冲液
【文献标识码】 B 【文章编号】 1609-6614(2003)21-2000-02
复方磺胺甲唑片为磺胺类抗菌药，是磺胺甲唑与甲氧苄啶的复方制剂，中国药典(2000年版)采用双波长紫外分光光度法测定含量 [1] ，美国药典采用高效液相法测定含量 [2] 。本品采用与美国药典不同的色谱条件测定两组分含量，方法简便、结果准确、可靠。
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1 仪器与试药
1.1 仪器 日本岛津Shimadzu LC-10AT高效液相色谱仪，岛津SPD-10A紫外检测器，岛津UV-2501型紫外分光光度计，Sartrius BP211D电子分析天平。
1.2 药品与试剂 复方磺胺甲唑片为市售药(批号:020202、030207、030501);磺胺甲唑、甲氧苄啶对照品(中国药品生物制品检定所);甲醇为色谱纯(江苏汉邦科技有限公司);磷酸二氢钾为分析纯，水为蒸馏水。
2 方法与结果
2.1 色谱条件 色谱柱:Serial C18柱(4.6mm×250mm，5μ);流动相:甲醇-磷酸盐缓冲液(0.05mol/L磷酸二氢钾1000ml，加三乙胺7ml，用磷酸调节pH值至5.90±0.05)(25∶75);流速:0.8ml/min;温度:室温;检测波长:240nm;进样体积:10μl。取2.3项下供试品溶液测定，结果理论塔板数按磺胺甲基异唑峰计算为8000，两峰分离度为11.3。同法制备不含SMZ及TMP空白样品测定，辅料无吸收。见图1。
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2.2 对照品溶液制备 精密称取干燥至恒重的磺胺甲唑(SMZ)对照品50mg与甲氧苄啶(TMP)对照品10mg，置100ml量瓶中加甲醇适量，振摇使磺胺甲唑与甲氧苄啶溶解，加甲醇稀释至刻度，摇匀(贮备液)，精密吸取5ml，置 25ml量瓶中，加上述磷酸盐缓冲液(pH5.90)稀释至刻度。
2.3 供试品溶液制备 取样品20片，研细，精密称取细粉适量(约相当于磺胺甲唑50mg与甲氧苄啶10mg)，置100ml量瓶中。按2.2项下自“加甲醇适量”起操作。
2.4 标准曲线绘制 分别精密吸取2.2项下对照品贮备液1.0ml、2.0ml、5.0ml、10.0ml、15.0ml置于25ml量瓶中，加上述磷酸盐缓冲液(pH5.90)稀释至刻度。按上述色谱条件进行测定，以峰面积为纵坐标，以浓度(μg/ml)为横坐标作图，得线性回归方程:
SMZ Y=3.920×10 4 ×-2.226×10 4 r=0.9997
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TMP Y=5.427×10 4 ×-1.111×10 3 r=0.9998
2.5 进样精密度试验 取上述对照品溶液，连续进样5次，测定峰面积(以磺胺甲唑峰计算)，RSD=0.65%。
2.6 供试品溶液稳定性试验 取上述供试品溶液，分别于0、2、4、6、10、12h进样测定峰面积。RSD=1.92%(SMZ)、RSD=1.63%(TMP)。
2.7 重复性试验 取同一批样品，按2.3项下配置5份供试品溶液，按2.1色谱条件测定，按外标法计算含量。RSD分别为2.67%(SMZ)、3.34%(TMP)表明方法重复性良好。
2.8 回收率试验 精密称取干燥至恒重的SMZ对照品50mg、TMP对照品10mg(共5份)，置100ml量瓶中;另精密称取已知含量的复方磺胺甲唑细粉适量(约相当于SMZ50mg，TMP10mg)置100ml量瓶中。按2.2项下自“加甲醇适量”起制备贮备液，分别精密吸取对照品贮备液及样品贮备液5ml置于25ml量瓶中，加磷酸盐缓冲液(pH5.90)稀释至刻度。按2.1色谱条件进行测定。结果见表1。
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表1 回收率试验
续表
2.9 样品测定 分别取样品按2.3项下制备，按2.1色谱条件操作。按外标法计算含量，结果见表2。
表2 样品测定结果
3 讨论
本文采用高效液相法测定复方磺胺甲唑片中两组分含量，试验结果，该方法操作简便，结果准确、可靠，与药典法相比测定结果差异无显著性，可用于测定复方磺胺甲唑片中的磺胺甲唑、甲氧苄啶含量。 (本文图见封三)
参考文献
1 中华人民共和国卫生部药典委员会编.中国药典(二部).北京:化学工业出版社，2000，518.
2 By authority of the United Sta tes Pharmacopeial Convention.USP-NF.Published by the Board of Trustees，1995(Ⅱ)，1464.
作者单位:223001江苏省淮安市药品检验所
(编辑罗 彬), http://www.100md.com(郝立芳)