单味黄芪和含黄芪复方的遗传毒性检测
【文献标识码】 B 【文章编号】 1726-6424(2004)02-0161-02
黄芪是一味常用的中药，始载于《本经》列为上品，味甘，性温，归肺、脾经。有益气升阳，利水消肿，托毒生肌之功效;临床上常用于脾肺气虚，中气下陷之证。我国殷学军等人 [1] 通过Ames试验、活体小鼠骨髓染色体畸变实验和骨髓多染红细胞微核实验，证实黄芪的水溶性提取物呈阳性，即具有诱变性。我们知道中药的临床应用，主要为其复方。多种中药一起煎煮过程中常发生化学变化，影响某些药效成份的性质。为此我们用小鼠骨髓多染红细胞微核试验，检测单味黄芪和含黄芪复方的微核细胞率，以探讨复方对其中单味药潜在遗传毒性的影响。
1 实验材料
1.1 实验用中药材 实验用中药材，由江苏省中医院中药房供给，并经本院药械处宋金斌主任中药师鉴定。将单味黄芪于8倍量的水中浸泡1h，文火煎煮0.5h，过滤取滤液，共2次，合并2次滤液，配制成2.0g/ml生药煎 液。按补中益气汤 [2] 的组成，其中黄芪剂量与单味黄芪剂量相同，用同样方法制成生药煎液，待用。
, 百拇医药
1.2 环磷酰胺 环磷酰胺(Cyclophosphamid，cp)由上海第十二制药厂生产，批号20030516。外观为无色透明晶体，实验时用蒸馏水配成4mg/ml溶液，给药剂量为40mg/kg，给药途径为腹腔注射。
1.3 实验动物 封闭群昆明种小鼠，体重18～22g，购自南京中医药大学实验动物中心，生产许可证SCXK(苏2002-0012)。
2 实验动物
取昆明种小鼠40只，按体重随机分为4组，每组10只，雌雄各半。Ⅰ组:为阴性对照组，每天用蒸馏水灌胃1次，给水容量为0.1ml/10g鼠重，连续3天。Ⅱ组:为环磷酰胺组，用预先配制的环磷酰胺溶液(4mg/ml)腹腔注射，注射容量为0.1mg/10g鼠重，给药1次 [3] 。Ⅲ组:为单味黄芪水煎液组，剂量为20mg/kg，给药方法同Ⅰ组。Ⅳ组:为补中益气汤组，给药方法同Ⅰ组。
, 百拇医药
实验方法采用常规小鼠骨髓细胞微核试验方法 [3] 。Ⅱ组给予环磷酰胺30h后处死动物，取胸骨骨髓刮片，每只小鼠计数1000个嗜多染红细胞(polychromatic trythrocytes，PCE)的带微核细胞(Micronuneleus，MN)数，计算微核细胞率。
3 结果实验资料
采用Student’s检验进行统计分析。 实验结果见表1。
表1 单味黄芪和含黄芪复方微核细胞率检测结果
注:与阴性对照组比较， ˇP>0.05， ˇˇ P<0.01。
从表1可以看出，单味黄芪水煎液微核细胞率为6.50‰，与阴性对照组相比，差异有非常显著性，表明单味黄芪在小鼠骨髓微核试验中呈诱变性。含黄芪的补中益气汤的微核细胞率为1.80‰，与阴性对照组相比，差异无显著性，表明含黄芪复方在小鼠骨髓微核试验中不显诱变性。
, 百拇医药
4 讨论
中药黄芪在中医临床组方中甚为常用，中药药理研究表明，黄芪具有提高免疫系统功能、抗氧化、抗病毒、抗癌等多种药物效应 [4] 。但殷学军等人 [1] 通过实验证实黄芪水溶性提取物具有诱变性。对于有诱变性的中药致突变机制，通常认为中药中具有诱变活性的成分可能是生物碱 [4] ，蒽醌衍生物 [5，6] 或黄酮类化合物 [7] 。黄芪的化学成分主要含 糖甙、多糖、有机酸、钙、磷、镁、铁等微量元素，还有少量黄酮如毛蕊异黄酮(caly-cosin) [8] ，究竟是哪一种成份具有诱变活性，目前尚不清楚。
我们知道中药的临床应用，很少是单味药，常是复方配伍，多味药的配伍及煎煮过程是否会使诱变性成分失活?事实上，对已有中成药及中药复方制剂，罕见诱变性报道。本文实验结果表明，单味黄芪在小鼠骨髓微核试验中呈阳性，而含同样剂量黄芪的复方，在小鼠骨髓微核试验中呈阴性。因此对某一中药的遗传毒性的评价，不能仅以该中药的某一种成分的遗传效应为依据，而主要应考虑其复方的遗传毒性。当然，对已报道有诱变性的中药，我们还需要大量的更加深入的研究工作，使我们更好地认识和解决中药诱变性问题。
, http://www.100md.com
参考文献
1 殷学军，刘德祥，王河川，等.102种中药水溶性提取物的诱变性筛选.癌变·畸变·突变，1989，1(1):27.
2 段富津.方剂学，上海:上海科学技术出版社，1998，116.
3 黄幸纾，陈星若.环境化合物致突变、致畸、致癌试验方法，杭州:浙江科学技术出版社，1985，220.
4 刘德祥，殷学军，王河川，等.洋金花总碱对细胞染色体损伤的观察.遗传，1988，10(1):30.
5 董伟华，郑智敏，刘佳亭，等.中药大黄、槐米、红花提取物的致突变作用.河南医科大学学报，1991，26(4):330.
6 王衍如，陈琼华.中药大黄的综合研究ⅩⅢ大黄蒽醌衍生物对DNA的作用.生物化学与生物物理学报，1997，9:95.
, 百拇医药
7 S.Ogawa，T.Hirayama，Y.Sumida，et al.Enhancement of the mutaˉgenicity of2-acetylaminofluorence by flavonoids and the structural reguirements.Mutat.Res，1987，190:107.
8 国家中医药管理局《中华本草》编委员.中华本草(精选本)，上海:上海科学技术出版社，1998，818.
作者单位:210029江苏省中医院
(收稿日期:2003-10-28)
(编辑黄 杰), 百拇医药(倪文澎)
黄芪是一味常用的中药，始载于《本经》列为上品，味甘，性温，归肺、脾经。有益气升阳，利水消肿，托毒生肌之功效;临床上常用于脾肺气虚，中气下陷之证。我国殷学军等人 [1] 通过Ames试验、活体小鼠骨髓染色体畸变实验和骨髓多染红细胞微核实验，证实黄芪的水溶性提取物呈阳性，即具有诱变性。我们知道中药的临床应用，主要为其复方。多种中药一起煎煮过程中常发生化学变化，影响某些药效成份的性质。为此我们用小鼠骨髓多染红细胞微核试验，检测单味黄芪和含黄芪复方的微核细胞率，以探讨复方对其中单味药潜在遗传毒性的影响。
1 实验材料
1.1 实验用中药材 实验用中药材，由江苏省中医院中药房供给，并经本院药械处宋金斌主任中药师鉴定。将单味黄芪于8倍量的水中浸泡1h，文火煎煮0.5h，过滤取滤液，共2次，合并2次滤液，配制成2.0g/ml生药煎 液。按补中益气汤 [2] 的组成，其中黄芪剂量与单味黄芪剂量相同，用同样方法制成生药煎液，待用。
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1.2 环磷酰胺 环磷酰胺(Cyclophosphamid，cp)由上海第十二制药厂生产，批号20030516。外观为无色透明晶体，实验时用蒸馏水配成4mg/ml溶液，给药剂量为40mg/kg，给药途径为腹腔注射。
1.3 实验动物 封闭群昆明种小鼠，体重18～22g，购自南京中医药大学实验动物中心，生产许可证SCXK(苏2002-0012)。
2 实验动物
取昆明种小鼠40只，按体重随机分为4组，每组10只，雌雄各半。Ⅰ组:为阴性对照组，每天用蒸馏水灌胃1次，给水容量为0.1ml/10g鼠重，连续3天。Ⅱ组:为环磷酰胺组，用预先配制的环磷酰胺溶液(4mg/ml)腹腔注射，注射容量为0.1mg/10g鼠重，给药1次 [3] 。Ⅲ组:为单味黄芪水煎液组，剂量为20mg/kg，给药方法同Ⅰ组。Ⅳ组:为补中益气汤组，给药方法同Ⅰ组。
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实验方法采用常规小鼠骨髓细胞微核试验方法 [3] 。Ⅱ组给予环磷酰胺30h后处死动物，取胸骨骨髓刮片，每只小鼠计数1000个嗜多染红细胞(polychromatic trythrocytes，PCE)的带微核细胞(Micronuneleus，MN)数，计算微核细胞率。
3 结果实验资料
采用Student’s检验进行统计分析。 实验结果见表1。
表1 单味黄芪和含黄芪复方微核细胞率检测结果
注:与阴性对照组比较， ˇP>0.05， ˇˇ P<0.01。
从表1可以看出，单味黄芪水煎液微核细胞率为6.50‰，与阴性对照组相比，差异有非常显著性，表明单味黄芪在小鼠骨髓微核试验中呈诱变性。含黄芪的补中益气汤的微核细胞率为1.80‰，与阴性对照组相比，差异无显著性，表明含黄芪复方在小鼠骨髓微核试验中不显诱变性。
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4 讨论
中药黄芪在中医临床组方中甚为常用，中药药理研究表明，黄芪具有提高免疫系统功能、抗氧化、抗病毒、抗癌等多种药物效应 [4] 。但殷学军等人 [1] 通过实验证实黄芪水溶性提取物具有诱变性。对于有诱变性的中药致突变机制，通常认为中药中具有诱变活性的成分可能是生物碱 [4] ，蒽醌衍生物 [5，6] 或黄酮类化合物 [7] 。黄芪的化学成分主要含 糖甙、多糖、有机酸、钙、磷、镁、铁等微量元素，还有少量黄酮如毛蕊异黄酮(caly-cosin) [8] ，究竟是哪一种成份具有诱变活性，目前尚不清楚。
我们知道中药的临床应用，很少是单味药，常是复方配伍，多味药的配伍及煎煮过程是否会使诱变性成分失活?事实上，对已有中成药及中药复方制剂，罕见诱变性报道。本文实验结果表明，单味黄芪在小鼠骨髓微核试验中呈阳性，而含同样剂量黄芪的复方，在小鼠骨髓微核试验中呈阴性。因此对某一中药的遗传毒性的评价，不能仅以该中药的某一种成分的遗传效应为依据，而主要应考虑其复方的遗传毒性。当然，对已报道有诱变性的中药，我们还需要大量的更加深入的研究工作，使我们更好地认识和解决中药诱变性问题。
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参考文献
1 殷学军，刘德祥，王河川，等.102种中药水溶性提取物的诱变性筛选.癌变·畸变·突变，1989，1(1):27.
2 段富津.方剂学，上海:上海科学技术出版社，1998，116.
3 黄幸纾，陈星若.环境化合物致突变、致畸、致癌试验方法，杭州:浙江科学技术出版社，1985，220.
4 刘德祥，殷学军，王河川，等.洋金花总碱对细胞染色体损伤的观察.遗传，1988，10(1):30.
5 董伟华，郑智敏，刘佳亭，等.中药大黄、槐米、红花提取物的致突变作用.河南医科大学学报，1991，26(4):330.
6 王衍如，陈琼华.中药大黄的综合研究ⅩⅢ大黄蒽醌衍生物对DNA的作用.生物化学与生物物理学报，1997，9:95.
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7 S.Ogawa，T.Hirayama，Y.Sumida，et al.Enhancement of the mutaˉgenicity of2-acetylaminofluorence by flavonoids and the structural reguirements.Mutat.Res，1987，190:107.
8 国家中医药管理局《中华本草》编委员.中华本草(精选本)，上海:上海科学技术出版社，1998，818.
作者单位:210029江苏省中医院
(收稿日期:2003-10-28)
(编辑黄 杰), 百拇医药(倪文澎)