端粒酶对良恶性胸水鉴别诊断意义探讨
【文献标识码】 B 【文章编号】 1680-6115(2004)03-0258-01
端粒酶是合成端粒酶重复序列的反转录DNA合成酶，大量研究表明，端粒酶对良恶性肿瘤的诊断具有重要价值，本文对45例胸水进行端粒酶活性检测，初步探讨端粒酶对良恶性胸水鉴别的意义。
1 资料与方法
1.1 一般资料 选择临床胸水待查病例45例，男21例，女24例，平均年龄42.7岁。以上病例后经临床和病理诊断为恶性胸水17例，其中肺癌8例，恶性胸膜间皮瘤3例，肺转移癌6例;良性胸水28例，其中肺心病8例，结核性胸膜炎14例，原发性腹膜炎6例。
1.2 试剂 Telmerase PCR ELISA检测试剂盒购自Boeringer Mannheim，阳性对照为试剂盒提供。
1.3 方法 按胸腔穿刺常规进行胸腔穿刺，抽吸10ml胸水置无菌经0.1%DEPC处理过的干燥试管中，同时抽胸水进行常规细胞学检查。将胸水在4℃1000r/min离心10min，去上清，打散沉淀并加入裂解液50μl混匀，置4℃2h，16000r/min离心30min，吸取上清液，置-80℃保存备用，同时测定蛋白含量，按检测试剂盒要求和条件进行TRAP反应用酶标仪(∑960型)测其波长500μm的吸光值(OD值)，以OD<0.20为阳性标准。
2 结果
胸水端粒酶活性水平检测结果见表1。17例恶性胸水端粒酶活性水平明显高于良性胸水组。胸水细胞学阳性者9例，阳性率52.9%;端粒酶阳性者15例，阳性率88.2%。经χ 2 检验，恶性胸水端粒酶阳性率和胸水细胞学阳性率比较差异有显著性。
表1 良恶性胸水端粒酶活性水平
3 讨论
1994年Kim等 [1] 发展了端粒酶重复序列扩增程序(TRAP)的酶测定方法，相关研究资料表明，端粒酶的激活对癌细胞的转化作用已经被大多数学者认可，端粒酶活性检测有可能作为癌早期检测的分子标志物 [2] ，本研究显示，胸水端粒酶活性检测，恶性胸水的诊断率可以得到很大提高。这也进一步提示端粒酶活性检测与细胞学检查有良好的一致性，联合应用对提高胸水恶性肿瘤细胞阳性率具有显著性意义。因此，本方法具有高灵敏度、特异性强的特点，有利于对胸水良恶性进行鉴别诊断。但对于其中一些炎性增生细胞，端粒酶呈现低水平表达，其是否具有一定的临床意义尚待进一步的研究证实。
参考文献
1 Kim NW，Piatyszek MA，Prowse KR，et al.Specific association of human telomerase activity with immortal cells and cancer.Science，1994，266:2011-2012.
2 董为人，杨光彩.端粒酶在癌症早期检测中的意义.国外医学·临床生物化学与检验学分册，1998，19:198.
作者单位:113300辽宁省清原县人民医院
111003辽宁省辽阳市辽化医院
110001沈阳中国医科大学病理系
(收稿日期:2003-11-16)
(编辑小 川), http://www.100md.com(姜)
端粒酶是合成端粒酶重复序列的反转录DNA合成酶，大量研究表明，端粒酶对良恶性肿瘤的诊断具有重要价值，本文对45例胸水进行端粒酶活性检测，初步探讨端粒酶对良恶性胸水鉴别的意义。
1 资料与方法
1.1 一般资料 选择临床胸水待查病例45例，男21例，女24例，平均年龄42.7岁。以上病例后经临床和病理诊断为恶性胸水17例，其中肺癌8例，恶性胸膜间皮瘤3例，肺转移癌6例;良性胸水28例，其中肺心病8例，结核性胸膜炎14例，原发性腹膜炎6例。
1.2 试剂 Telmerase PCR ELISA检测试剂盒购自Boeringer Mannheim，阳性对照为试剂盒提供。
1.3 方法 按胸腔穿刺常规进行胸腔穿刺，抽吸10ml胸水置无菌经0.1%DEPC处理过的干燥试管中，同时抽胸水进行常规细胞学检查。将胸水在4℃1000r/min离心10min，去上清，打散沉淀并加入裂解液50μl混匀，置4℃2h，16000r/min离心30min，吸取上清液，置-80℃保存备用，同时测定蛋白含量，按检测试剂盒要求和条件进行TRAP反应用酶标仪(∑960型)测其波长500μm的吸光值(OD值)，以OD<0.20为阳性标准。
2 结果
胸水端粒酶活性水平检测结果见表1。17例恶性胸水端粒酶活性水平明显高于良性胸水组。胸水细胞学阳性者9例，阳性率52.9%;端粒酶阳性者15例，阳性率88.2%。经χ 2 检验，恶性胸水端粒酶阳性率和胸水细胞学阳性率比较差异有显著性。
表1 良恶性胸水端粒酶活性水平
3 讨论
1994年Kim等 [1] 发展了端粒酶重复序列扩增程序(TRAP)的酶测定方法，相关研究资料表明，端粒酶的激活对癌细胞的转化作用已经被大多数学者认可，端粒酶活性检测有可能作为癌早期检测的分子标志物 [2] ，本研究显示，胸水端粒酶活性检测，恶性胸水的诊断率可以得到很大提高。这也进一步提示端粒酶活性检测与细胞学检查有良好的一致性，联合应用对提高胸水恶性肿瘤细胞阳性率具有显著性意义。因此，本方法具有高灵敏度、特异性强的特点，有利于对胸水良恶性进行鉴别诊断。但对于其中一些炎性增生细胞，端粒酶呈现低水平表达，其是否具有一定的临床意义尚待进一步的研究证实。
参考文献
1 Kim NW，Piatyszek MA，Prowse KR，et al.Specific association of human telomerase activity with immortal cells and cancer.Science，1994，266:2011-2012.
2 董为人，杨光彩.端粒酶在癌症早期检测中的意义.国外医学·临床生物化学与检验学分册，1998，19:198.
作者单位:113300辽宁省清原县人民医院
111003辽宁省辽阳市辽化医院
110001沈阳中国医科大学病理系
(收稿日期:2003-11-16)
(编辑小 川), http://www.100md.com(姜)