高效液相色谱法测定人参口服液中人参皂苷R e 的含量
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中华医药杂志 2004年4月 第4卷 第4期
【摘要】 目的 建立一种人参口服液中人参皂苷R e 的高效液相色谱测定方法，用于生产及市场监控。方法 以依利特C 18 (25cm×4.6mm，5μm)为色谱柱;用乙腈-0.05%磷酸(99∶400)为流动相;以外标法按峰面积计算。结果 该法回收率为100.52%，表明用该法测定人参口服液中人参皂苷R e 的含量是可行的。结论 该法简便快捷，结果准确，可用于人参口服液中人参皂苷R e 的含量测定。
关键词 人参口服液 高效液相色谱法 含量测定 人参皂苷R e
【文献标识码】 B 【文章编号】 1680-077X(2004)04-0351-02
人参口服液是由人参经提取、精制而成的口服合剂。具有大补元气、生津止渴的功效。临床上用于治疗身倦乏力、食欲不振、心悸气短、失眠健忘等气虚证。其地方标准中无含量测定，现参照文献[1] 在质量标准中增加含量测定。
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1 仪器和试药
1.1 仪器 岛津高效液相色谱仪系统;CL ass —VP工作站。
1.2 试药 乙腈为色谱纯，磷酸为分析纯;人参皂苷R e 对照品(中国药品生物制品检定所，编号075—200013);人参口服液(哈药集团三精制药有限公司，批号02081911，02081912，02081913)。
2 方法和结果
2.1 色谱条件 色谱柱:依利特C 18 (25cm×4.6mm，5μm)为色谱柱;流动相:用乙腈-0.05%磷酸(99∶400)为流动相;检测波长:203nm;理论板数按人参皂苷R e 峰2500计算;进样量:10μl;流速0.8ml/min。
2.2 检测波长的选择 吸取人参皂苷R e 对照品溶液作光谱扫描，在203nm附近处有最大吸收，与中华人民共和国药典一部人参药材质量标准项下人参皂苷R e 检测波长203nm一致，故本品的测定波长选为203nm。
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2.3 测定方法 对照品溶液的制备:精密称取人参皂苷R e 对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液即得。供试品溶液的制备:取装量差异项下的本品，精密量取5ml，蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。测定法:分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
2.4 干扰实验 依测定方法分别制备人参皂苷R e 对照品溶液，人参口服液供试品溶液，不含人参的阴性对照溶液，在上述色谱条件下分别注入液相色谱仪，得色谱图(见图1)。结果:供试品溶液色谱图中，在与人参皂苷R e 对照品溶液色谱图相应保留时间处有相应人参皂苷R e 峰出现，且分离良好;而在阴性对照溶液色谱图中，在与人参皂苷R e 对照品溶液色谱图相应保留时间处没有相应的人参皂苷R e 峰出现。 图1 色谱图A:对照品溶液;B:供试品溶液;C:阴性对照液
2.5 线性关素 精密称取人参皂苷R e 对照品10.11mg置25ml量瓶中，以甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，以自动进样器分别取2.0μl，5.0μl，10.0μl，15.0μl，20.0μl，按上述色谱条件，进样10.0μl，以峰面积为纵坐标，以进样浓度为横坐标，记录峰面积，得回归方程为Y=0.000323609X-10.9871，线性相关系数r=0.9999，试验结果表明，人参皂苷R e 浓度在 80.88～808.80μg/ml范围内与峰面积的线性关系良好。
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2.6 精密度试验 照本文所述测定方法，精密量取人参口服液对照品溶液10.0μl，连续进样6次，测得峰面积，结果见表1，RSD=0.79%。
表1 人参皂苷R e 精密度试验结果
表1表明，人参皂苷R e 的进样精密度良好。
2.7 供试品的稳定性试验 照本文所述测定方法，精密量取人参口服液样品5.0ml(批号为02081911)，依法制得样品溶液，分别在0，1，2，3，4，5h进样分析，人参皂苷R e 峰面积测定结果(见表2)，RSD=1.02%。
表2 人参皂苷R e 稳定性试验结果
2.8 回收率试验 采取加样回收法试验，精密量取已测定含量的人参口服液样品5.0ml9份，分为3组，分别蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至5ml量瓶中，第一组3份分别加入人参皂苷Re 对样品0.144mg;第二组3份分别加入人参皂苷R e 对照品0.180mg;第三组3份分别加入0.216mg，加甲醇至刻度，摇匀，依法测定，分别计算人参皂苷R e 对照品加入时的加样回收率。结果人参皂苷R e 加样回收率为100.52%，RSD=1.01%。
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2.9 样品测定 按含量测定方法测定，结果见表4。
表4 样品中人参皂苷R e 含量测定结果
3 讨论
本法简便易行，灵敏度高，可用于人参口服液中人参皂苷R e 的含量测定和质量控制。
参考文献
1 国家药典委员会.中华人民共和国药典2000版(一部).北京:化学工业出版社，2000，6-7.
作者单位:150010黑龙江哈药集团三精制药有限公司
(收稿日期:2003-10-25)
(编辑一 坤), 百拇医药(俄丽丹)
关键词 人参口服液 高效液相色谱法 含量测定 人参皂苷R e
【文献标识码】 B 【文章编号】 1680-077X(2004)04-0351-02
人参口服液是由人参经提取、精制而成的口服合剂。具有大补元气、生津止渴的功效。临床上用于治疗身倦乏力、食欲不振、心悸气短、失眠健忘等气虚证。其地方标准中无含量测定，现参照文献[1] 在质量标准中增加含量测定。
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1 仪器和试药
1.1 仪器 岛津高效液相色谱仪系统;CL ass —VP工作站。
1.2 试药 乙腈为色谱纯，磷酸为分析纯;人参皂苷R e 对照品(中国药品生物制品检定所，编号075—200013);人参口服液(哈药集团三精制药有限公司，批号02081911，02081912，02081913)。
2 方法和结果
2.1 色谱条件 色谱柱:依利特C 18 (25cm×4.6mm，5μm)为色谱柱;流动相:用乙腈-0.05%磷酸(99∶400)为流动相;检测波长:203nm;理论板数按人参皂苷R e 峰2500计算;进样量:10μl;流速0.8ml/min。
2.2 检测波长的选择 吸取人参皂苷R e 对照品溶液作光谱扫描，在203nm附近处有最大吸收，与中华人民共和国药典一部人参药材质量标准项下人参皂苷R e 检测波长203nm一致，故本品的测定波长选为203nm。
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2.3 测定方法 对照品溶液的制备:精密称取人参皂苷R e 对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液即得。供试品溶液的制备:取装量差异项下的本品，精密量取5ml，蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。测定法:分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
2.4 干扰实验 依测定方法分别制备人参皂苷R e 对照品溶液，人参口服液供试品溶液，不含人参的阴性对照溶液，在上述色谱条件下分别注入液相色谱仪，得色谱图(见图1)。结果:供试品溶液色谱图中，在与人参皂苷R e 对照品溶液色谱图相应保留时间处有相应人参皂苷R e 峰出现，且分离良好;而在阴性对照溶液色谱图中，在与人参皂苷R e 对照品溶液色谱图相应保留时间处没有相应的人参皂苷R e 峰出现。 图1 色谱图A:对照品溶液;B:供试品溶液;C:阴性对照液
2.5 线性关素 精密称取人参皂苷R e 对照品10.11mg置25ml量瓶中，以甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，以自动进样器分别取2.0μl，5.0μl，10.0μl，15.0μl，20.0μl，按上述色谱条件，进样10.0μl，以峰面积为纵坐标，以进样浓度为横坐标，记录峰面积，得回归方程为Y=0.000323609X-10.9871，线性相关系数r=0.9999，试验结果表明，人参皂苷R e 浓度在 80.88～808.80μg/ml范围内与峰面积的线性关系良好。
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2.6 精密度试验 照本文所述测定方法，精密量取人参口服液对照品溶液10.0μl，连续进样6次，测得峰面积，结果见表1，RSD=0.79%。
表1 人参皂苷R e 精密度试验结果
表1表明，人参皂苷R e 的进样精密度良好。
2.7 供试品的稳定性试验 照本文所述测定方法，精密量取人参口服液样品5.0ml(批号为02081911)，依法制得样品溶液，分别在0，1，2，3，4，5h进样分析，人参皂苷R e 峰面积测定结果(见表2)，RSD=1.02%。
表2 人参皂苷R e 稳定性试验结果
2.8 回收率试验 采取加样回收法试验，精密量取已测定含量的人参口服液样品5.0ml9份，分为3组，分别蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至5ml量瓶中，第一组3份分别加入人参皂苷Re 对样品0.144mg;第二组3份分别加入人参皂苷R e 对照品0.180mg;第三组3份分别加入0.216mg，加甲醇至刻度，摇匀，依法测定，分别计算人参皂苷R e 对照品加入时的加样回收率。结果人参皂苷R e 加样回收率为100.52%，RSD=1.01%。
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2.9 样品测定 按含量测定方法测定，结果见表4。
表4 样品中人参皂苷R e 含量测定结果
3 讨论
本法简便易行，灵敏度高，可用于人参口服液中人参皂苷R e 的含量测定和质量控制。
参考文献
1 国家药典委员会.中华人民共和国药典2000版(一部).北京:化学工业出版社，2000，6-7.
作者单位:150010黑龙江哈药集团三精制药有限公司
(收稿日期:2003-10-25)
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