献血前后输血传染病标志物的初、复检结果分析
【摘要】 目的 了解我中心献血者血液中输血传染病标志物的情况，以利于采取相应措施提高采供血质量。方法 输血传染病标志物的检测按卫医发(1993)第2号文颁布的《血站基本标准》所规定的5项进行，即乙型肝炎表面抗原(hepˉatitis B surface antigen，HBsAg)、丙型肝炎病毒抗体(hepatitis C virus antibody:抗-HIV)、丙氨酸氨基转移酶(alanino transminase，ALT)、梅毒血清学试验。用于统计分析的样本资料均随机抽取。献血前检测(初检)结果分初次、多次(≥2次)职业献血者(blood donors，BD)和义务献血者(voluntary blood donors，VBD)3种予以统计，献血后检测(复检)结果统计19256例。结果 VBD除HBsAg阳性率略高(相当于普通人群的比率)，抗-HCV、抗-HIV、ALT等异常者明显少于BD，梅毒血清学快速血浆反应素试验(rapid plasma reagin，RPR)阳性率与多次献血的BD比较差异无显著性，复检的不合格率为0.56%。结论 VBD比BD好，复检工作应加强，提倡科学用血。
, 百拇医药
关键词 义务献血者 职业献血者 窗口期 初检 复检 变异系数
【文献标识码】 B【文章编号】 1609-6614(2003)08-0732-03
不同人群血液中5项检测结果可有较大的差异[1，2] ，为了提高采供血管理质量，进一步保证输血安全，理应对各有关献血健康状况及所采集到的血液作必要的了解，现将我们的调查及分析结果报告如下。
1 材料与方法
1.1 样品处理 BD主要来自贵港市、桂平市、柳州市及罗城、来宾等县区，以农民为主。VBD来自柳州市各厂矿、机关、大中专院校、部队及其他各企事业单位。年龄均为18～55周岁，体格检查与血液比重合格。HBsAg、抗-HCV、抗-HIV检测用酶联免疫吸附试验(enzyme liked immunosorˉbent assay、ELISA)、ALT检测为改良赖氏法(小于25IU/L为异常)、梅毒血清学检测用RPR法。初检时先取小量血样进行5项检测，合格者方准以献血，同时留取一定血样做5项复检。初检为单孔(管)淘汰制，复检者在灰区上缘的亦多实行单孔(管)淘汰制。因抗-HIV异常被淘汰的血样送有关部门做确证试验，5项检测要求在样品采集后2天内完成。
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1.2 试剂 (1)抗-HIV检测试剂盒，美国进口，北京华怡生物技术有限公司提供。(2)抗-HCV检测试剂盒，美国进口，北京华怡生物技术有限公司提供。(3)HBsAg检测试剂盒，上海实业科华生物技术有限公司提供。(4)梅毒RPR试剂盒，北京华怡生物技术有限公司提供。(5)ALT检测试剂盒，上海荣盛生物技术有限公司提供。(1)～(4)试剂盒均经卫生部批准鉴定合格。
1.3 主要仪器 (1)美国BIO-RAD450型及550型酶标仪:用中国药品生物制点检定所提供的9201批含HBsAg为1、2、4、8、16ng/ml的线性血清检测r>0.990;用丹麦Nunc平底微孔板加入0.1ml0.1%～0.5%重铬酸钾溶液，浓度每相差0.1个百分点，A值比较差异有显著性(P<0.001);同一溶液孔间CV<5%，线性及精密性均较好。(2)美国BIO-RAD1250型洗板机及英国well wash4型洗板机。(3)瑞士Socorex5-50μl及50-220μl加样器，经检测其重复性及允许误差均在合格范围内。
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2 结果
2.1 BD与VBD5项初检结果 见表1。
2.2 BD与VBD5项初检结果比较 见表2。
2.3 19256例血液5项复检结果 见表3。
表1 BD与VBD5项初检结果 (略)
表2 BD与VBD5项初检结果(略)
表3 19256例血液5项复检结果 例(略)
3 讨论
我国是乙型肝炎和丙型肝炎的高流行区，普通人群HBsAg与抗-HCV阳性率可高达11.12%与5.1% [2] 。由于检测水平的提高，如ELISA技术与放射免疫法(radioimˉmunoassay，RIA)检测HBsAg的灵敏度比早年的琼脂免疫扩散法提高上千倍(0.5～1.0ng/ml:1000ng/ml) [3] ，加上对献血员进行乙肝疫苗注射以及输血工作“三统一”(统一管理血源、统一采血、统一供血)，输血后乙型肝炎与丙型肝炎的感染率已由早年的13.8%(37/269) [4] 与21% [5] 降至0.3%～1.7%与1%～4% [5] ，将ALT异常作为丙型肝炎携带者标志，预期可减少29%～31%的肝炎 [6] 。据报道，输入ALT>45IU/L的血液其输血后肝炎(post-transfusion hepatitis，PTH)比输入ALT<42IU/L的发生率高8倍 [7] ，梅毒血清学试验也有助于排除HIV、HCV、HBV(hepatitis Bvirus)感染的高危人群。事实上，人们并不可能通过5项检测去完全排除相关的输血传染病的产生，目前国内外常用抗体检测方法筛查献血者中的HCV和(或)HIV感染者，一旦此类患者处于抗体阳转前的“窗口期”或他们的有关抗体尚未产生或虽已产生但已消失，则必然发生漏检，如急性HCV感染后抗C 100-3 出现较晚(感染后3个月甚至1年左右)，保持时间短，有些病人根本不出现 [8] ，ALT有70%的假阳性和70% 的假阴性 [7] ，有80%以上(133/161)的抗-HCV阳性献血者因ALT正常而不能被淘汰 [9] 。用反应素检查梅毒有一定的缺陷:(1)对一期梅毒早期与三期梅毒容易产生漏检，对潜伏梅毒和神经梅毒不敏感;(2)试验应在23～29℃环境中进行，若<23℃，敏感度下降，>29℃，特异性下降;(3)假阳性率高达30%(15/50) [10] ;(4)RPR试剂盒的稳定性略差，不适宜的振荡将导致其敏感度下降(抗原颗粒破碎)。由于检测方面的诸多缺陷，以及总会有缺陷且永远都可能无法充分完善的原因，从而迫使我们努力不断寻找和发现更为合适的人充当献血者。根据我们的调查结果，目前VBD与BD更合适，因为BD的抗-HCV、抗-HIV、ALT等异常者明显多，对输血造成的风险必然较大。
, http://www.100md.com
国产抗-HIV试剂的假阳性率为0.01%～0.09% [11] ，与我们抗-HIV的复检结果一致。献血后复检不合格多见于抗HCV与ALT两项，其原因可能包含试剂与操作的误差及某些干扰因素，也不排除献血前出现漏检，由于献血前检查的有效期为2个星期，输血传染病标志物可能发生不同的变化。
为了保证酶标仪的读数准确性，对该仪器的线性与精密度应进行质控，依照本文1.3的方法，建议满足以下要求:r≥0.95，P≤0.001，CV≤5%，光电流减弱(如光路的不整洁)及滤光片霉变是主要影响因素，因此，应注意仪器的保养，可能时操作者最好使用37℃隔水式恒温培养箱进行ELISA试验中的孵育与呈色，酶标仪在相对湿度小于85%条件下存放与运行。
严格控制输血，科学用血，如使用成分输血、挑选4℃冷藏3天以后的血液以防止输血性梅毒等，将输血风险降至最低。
参考文献
, 百拇医药
1 叶德华，李明敏，陈昌年.常州市38758献血人次血液检测结果分析.中国输血杂志，1995，8(1):43.
2 刘崇柏.我国病毒性肝炎人群流行病学特征及流行因素研究.中华肝脏病杂志，1998，6(2):67-70.
3 王培华.输血技术学，北京:人民卫生出版社，1998，98.
4 谢桂琴，王淑华，马冠杰，等.血液质量与输血后乙型肝炎感染 的关系.中国输血杂志，1989，2(1):4-6.
5 田兆嵩.临床输血学，北京:人民卫生出版社，1998，252-260.
6 林婴，高加良，杨明清.ALT的影响因素对献血者检测ALT的意义.中国输血杂志，1999，12(1):38-39.
, 百拇医药
7 吴昌烈，许莉萍，冯恭文.供血者丙氨酸基转移酶检测的利弊.中国输血杂志，1999，12(1):40-41.
8 季阳.献血者发生丙型肝炎病毒感染后的实验诊断及预后.中国输血杂志，1996，9(4):215-219.
9 陈素良，田伟，孟宗达，等.开展献血者丙型肝炎病毒抗体筛检的迫切性.中国输血杂志，1992，5(4):203-204.
10 邱艳，郑静，高东英，等.对血站采用梅毒非特异性血清筛查血液结果的评价.中国输血杂志，1998，11(1):27.
11 陈斌，刘宝庆，魏亚明.国产抗-HIV试剂实际应用情况的质量评价.中国输血杂志，1998，11(2):85.
(编辑 浮萍), 百拇医药(李聚林)
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关键词 义务献血者 职业献血者 窗口期 初检 复检 变异系数
【文献标识码】 B【文章编号】 1609-6614(2003)08-0732-03
不同人群血液中5项检测结果可有较大的差异[1，2] ，为了提高采供血管理质量，进一步保证输血安全，理应对各有关献血健康状况及所采集到的血液作必要的了解，现将我们的调查及分析结果报告如下。
1 材料与方法
1.1 样品处理 BD主要来自贵港市、桂平市、柳州市及罗城、来宾等县区，以农民为主。VBD来自柳州市各厂矿、机关、大中专院校、部队及其他各企事业单位。年龄均为18～55周岁，体格检查与血液比重合格。HBsAg、抗-HCV、抗-HIV检测用酶联免疫吸附试验(enzyme liked immunosorˉbent assay、ELISA)、ALT检测为改良赖氏法(小于25IU/L为异常)、梅毒血清学检测用RPR法。初检时先取小量血样进行5项检测，合格者方准以献血，同时留取一定血样做5项复检。初检为单孔(管)淘汰制，复检者在灰区上缘的亦多实行单孔(管)淘汰制。因抗-HIV异常被淘汰的血样送有关部门做确证试验，5项检测要求在样品采集后2天内完成。
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1.2 试剂 (1)抗-HIV检测试剂盒，美国进口，北京华怡生物技术有限公司提供。(2)抗-HCV检测试剂盒，美国进口，北京华怡生物技术有限公司提供。(3)HBsAg检测试剂盒，上海实业科华生物技术有限公司提供。(4)梅毒RPR试剂盒，北京华怡生物技术有限公司提供。(5)ALT检测试剂盒，上海荣盛生物技术有限公司提供。(1)～(4)试剂盒均经卫生部批准鉴定合格。
1.3 主要仪器 (1)美国BIO-RAD450型及550型酶标仪:用中国药品生物制点检定所提供的9201批含HBsAg为1、2、4、8、16ng/ml的线性血清检测r>0.990;用丹麦Nunc平底微孔板加入0.1ml0.1%～0.5%重铬酸钾溶液，浓度每相差0.1个百分点，A值比较差异有显著性(P<0.001);同一溶液孔间CV<5%，线性及精密性均较好。(2)美国BIO-RAD1250型洗板机及英国well wash4型洗板机。(3)瑞士Socorex5-50μl及50-220μl加样器，经检测其重复性及允许误差均在合格范围内。
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2 结果
2.1 BD与VBD5项初检结果 见表1。
2.2 BD与VBD5项初检结果比较 见表2。
2.3 19256例血液5项复检结果 见表3。
表1 BD与VBD5项初检结果 (略)
表2 BD与VBD5项初检结果(略)
表3 19256例血液5项复检结果 例(略)
3 讨论
我国是乙型肝炎和丙型肝炎的高流行区，普通人群HBsAg与抗-HCV阳性率可高达11.12%与5.1% [2] 。由于检测水平的提高，如ELISA技术与放射免疫法(radioimˉmunoassay，RIA)检测HBsAg的灵敏度比早年的琼脂免疫扩散法提高上千倍(0.5～1.0ng/ml:1000ng/ml) [3] ，加上对献血员进行乙肝疫苗注射以及输血工作“三统一”(统一管理血源、统一采血、统一供血)，输血后乙型肝炎与丙型肝炎的感染率已由早年的13.8%(37/269) [4] 与21% [5] 降至0.3%～1.7%与1%～4% [5] ，将ALT异常作为丙型肝炎携带者标志，预期可减少29%～31%的肝炎 [6] 。据报道，输入ALT>45IU/L的血液其输血后肝炎(post-transfusion hepatitis，PTH)比输入ALT<42IU/L的发生率高8倍 [7] ，梅毒血清学试验也有助于排除HIV、HCV、HBV(hepatitis Bvirus)感染的高危人群。事实上，人们并不可能通过5项检测去完全排除相关的输血传染病的产生，目前国内外常用抗体检测方法筛查献血者中的HCV和(或)HIV感染者，一旦此类患者处于抗体阳转前的“窗口期”或他们的有关抗体尚未产生或虽已产生但已消失，则必然发生漏检，如急性HCV感染后抗C 100-3 出现较晚(感染后3个月甚至1年左右)，保持时间短，有些病人根本不出现 [8] ，ALT有70%的假阳性和70% 的假阴性 [7] ，有80%以上(133/161)的抗-HCV阳性献血者因ALT正常而不能被淘汰 [9] 。用反应素检查梅毒有一定的缺陷:(1)对一期梅毒早期与三期梅毒容易产生漏检，对潜伏梅毒和神经梅毒不敏感;(2)试验应在23～29℃环境中进行，若<23℃，敏感度下降，>29℃，特异性下降;(3)假阳性率高达30%(15/50) [10] ;(4)RPR试剂盒的稳定性略差，不适宜的振荡将导致其敏感度下降(抗原颗粒破碎)。由于检测方面的诸多缺陷，以及总会有缺陷且永远都可能无法充分完善的原因，从而迫使我们努力不断寻找和发现更为合适的人充当献血者。根据我们的调查结果，目前VBD与BD更合适，因为BD的抗-HCV、抗-HIV、ALT等异常者明显多，对输血造成的风险必然较大。
, http://www.100md.com
国产抗-HIV试剂的假阳性率为0.01%～0.09% [11] ，与我们抗-HIV的复检结果一致。献血后复检不合格多见于抗HCV与ALT两项，其原因可能包含试剂与操作的误差及某些干扰因素，也不排除献血前出现漏检，由于献血前检查的有效期为2个星期，输血传染病标志物可能发生不同的变化。
为了保证酶标仪的读数准确性，对该仪器的线性与精密度应进行质控，依照本文1.3的方法，建议满足以下要求:r≥0.95，P≤0.001，CV≤5%，光电流减弱(如光路的不整洁)及滤光片霉变是主要影响因素，因此，应注意仪器的保养，可能时操作者最好使用37℃隔水式恒温培养箱进行ELISA试验中的孵育与呈色，酶标仪在相对湿度小于85%条件下存放与运行。
严格控制输血，科学用血，如使用成分输血、挑选4℃冷藏3天以后的血液以防止输血性梅毒等，将输血风险降至最低。
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10 邱艳，郑静，高东英，等.对血站采用梅毒非特异性血清筛查血液结果的评价.中国输血杂志，1998，11(1):27.
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(编辑 浮萍), 百拇医药(李聚林)