柞蚕雄蛾浓缩液的保肝降酶作用
【文献标识码】 A 【文章编号】 1726-6424(2004)04-0306-02
蚕蛾是国内新兴的一种动物类药材,现有的研究显示柞蚕雄蛾浓缩液具有良好的调节免疫效果,本文进一步研究了其保肝降酶作用,以期为提高中成药在肝病治疗方面的疗效提供实验基础。
1 材料和方法
1.1 动物 昆明种小鼠体重18~22g,每批实验中体重差别不超过3g,雌雄各半。由山东省卫生防疫站动物实验室提供,动物经检验符合标准。
1.2 药物 柞蚕雄蛾浓缩液,由山东省农科院烟台蚕业研究所提供。
1.3 方法 动物随机分组,每组12只,分设空白对照组、四氯化碳模型组、乙肝宁阳性对照组(42mg/kg),药物剂量分大、小两个剂量组(16.53mg/kg,0.564mg/kg)。动物每日口服给药1次,共给药4次,最后一次给药后1h,给小鼠(空白对照组除外)腹腔注射0.1ml/10g,2.5%四氯化碳油溶液,20h后摘眼取血,分离血清,赖氏法测定血清谷丙转氨酶(SGPT)活性。试剂盒系卫生部上海生物制品研究所生产。同时各组取肝脏组织,4%福尔马林固定,做病理组织学观察。
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2 结果
2.1 血清谷丙转氨酶测定结果 见表1。
表1 对四氯化碳诱导肝损伤的保护作用
注: △ 与空白对照组比较, ˇ 与四氯化碳组比较
2.2 组织病理学观察 (1)正常对照组:肝组织结构正常,肝细胞未见浊肿、变性及坏死等形态学改变。汇管区也无急、慢性炎性细胞浸润。(2)模型组:肝组织中可见肝细胞广泛肿胀,部分肝细胞脂肪变性,少量肝细胞气球样变;较多的肝细胞片状坏死,严重处呈桥状坏死的改变,坏死区可见较多的急、慢性炎性细胞浸润。未见出血,胆小管未见异常。(3)柞蚕雄蛾浓缩液大剂量组:肝组织中可见肝细胞轻度肿胀,个别肝细胞气球样变,肝组织中可见部分肝细胞点、灶状坏死,坏死区可见急、慢性炎性细胞浸润。但其坏死程度及范围明显轻于模型组、轻于阳性药组、小剂量组。病变积分下降与模型组比较,差异有显著性(P<0.01)。(4)柞蚕雄蛾浓缩液小剂量组:肝组织中可见肝细胞轻度肿胀,部分肝细胞气球样变,肝组织中可见部分肝细胞点状及小灶状坏死,坏死区可见急慢性炎性细胞浸润。但其坏死程度及范围明显轻于模型组,微重于大剂量组。病变积分下降与模型组比较,差异有显著性(P<0.01)。(5)阳性药组:病变程度轻于模型组、重于药物组,肝组织可见肝细胞轻度肿胀,部分肝细胞气球样变,肝组织中可见部分肝细胞点、灶状坏死,坏死区可见急慢性炎性细胞浸润。病变积分下降与模型组比较,差异有显著性(P<0.01),见表2。
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表2 肝脏病变积分
注:CCl4模型组与正常对照组动物比较差异有非常显著性 ˇ P<0.001;柞蚕雄蛾浓缩液大、小剂量组,阳性药组与CCl4模型组比较差异有显著性 ˇˇ P<0.01。
3 讨论
中医认为,肝病的发生多由肝气疏泄失常所致。肝为刚脏,喜调达而恶抑郁,主疏泄一身之气机,其功能的发挥有赖于肝血的濡养,而肝肾乙癸同源,精血互化,肝体有赖于肾精的涵养,故肝的疏泄功能与肾精的充盛有着密切关系。蚕蛾是国内新兴的一种动物类药材,具补肾益精之功,《名医别录》认为可“主益精气,强阴道,交接不倦,亦止精”。《日华子本草》则认为是“壮阳事,止泄精、尿血,暖水藏。治暴风金疮、冻疮、汤火疮,并灭疮瘢”。明朝李时珍则曰:“蚕蛾性淫,出茧即媾,至于枯槁乃已,故强阴益精用之”,临床用之,肾精得充,则肝体得养,有利于肝脏恢复疏泄之功;另一方面,肝病病程常迁延日久,邪气留连必伤及人体正气,古人云“五脏之病,穷必及肾”,蚕蛾补肾益精,顾护其虚,可收到扶正以祛邪之功 [1] 。
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现代药理研究表明,原蚕蛾富含20余种游离的氨基酸,这可能是蚕蛾保肝降酶作用的机制之一 [2] 。Okai Koji报道,从家蚕蛾成虫的体液中分离得一种肽类物质,可抑制人和家养动物血清T淋巴细胞中DNA的合成,故可用于治疗自身免疫性紊乱疾病。药理实验还证明雄蚕蛾的提取液具雄性激素样作用。
本研究发现柞蚕雄蛾浓缩液无论小剂量组还是大剂量组与模型组相比均有显著意义,表明该药对四氯化碳诱导的肝损伤有保护作用。病理组织学检查显示:大剂量组与小剂量组中肝细胞胞浆疏松,嗜酸性变数量程度较四氯化碳组为轻,肝细胞坏死的数量、程度及大小范围明显少于四氯化碳组,病变积分明显下降。肝组织的形态学改变实验组与阳性对照组比较差异无显著性。提示大剂量组及小剂量组对四氯化碳所致肝组织的损伤有一定的保护作用。综上所述,我们认为柞蚕雄蛾浓缩液可明显降低四氯化碳中毒小鼠血清中谷丙转氨酶水平,对小鼠肝细胞具有明显保护作用;柞蚕雄蛾浓缩液可能具有降低四氯化碳中毒小鼠血清中甘油三酯水平作用,可明显减轻肝组织脂肪样变性;柞蚕雄蛾浓缩液对四氯化碳中毒小鼠受损伤的肝 组织具有明显保护作用,可减少肝细胞变性、坏死的程度和范围。有望进一步开发成为一保肝药物应用于临床。
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参考文献
1 李锋,景树明,刘军凤,等.原蚕蛾药用研究概况.时珍国医国药,1996,5:54-56.
2 朴惠善,鞠岩,郑云花,等.雄蚕蛾精液中氨基酸成分的提取分离及鉴定.延边大学医学报,1997,3:350.
作者单位:256700山东省日照市卫生防疫站
山东省医学科学院基础研究所
(收稿日期:2003-12-23)
(编辑阳 光), 百拇医药(胡善宏)
蚕蛾是国内新兴的一种动物类药材,现有的研究显示柞蚕雄蛾浓缩液具有良好的调节免疫效果,本文进一步研究了其保肝降酶作用,以期为提高中成药在肝病治疗方面的疗效提供实验基础。
1 材料和方法
1.1 动物 昆明种小鼠体重18~22g,每批实验中体重差别不超过3g,雌雄各半。由山东省卫生防疫站动物实验室提供,动物经检验符合标准。
1.2 药物 柞蚕雄蛾浓缩液,由山东省农科院烟台蚕业研究所提供。
1.3 方法 动物随机分组,每组12只,分设空白对照组、四氯化碳模型组、乙肝宁阳性对照组(42mg/kg),药物剂量分大、小两个剂量组(16.53mg/kg,0.564mg/kg)。动物每日口服给药1次,共给药4次,最后一次给药后1h,给小鼠(空白对照组除外)腹腔注射0.1ml/10g,2.5%四氯化碳油溶液,20h后摘眼取血,分离血清,赖氏法测定血清谷丙转氨酶(SGPT)活性。试剂盒系卫生部上海生物制品研究所生产。同时各组取肝脏组织,4%福尔马林固定,做病理组织学观察。
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2 结果
2.1 血清谷丙转氨酶测定结果 见表1。
表1 对四氯化碳诱导肝损伤的保护作用
注: △ 与空白对照组比较, ˇ 与四氯化碳组比较
2.2 组织病理学观察 (1)正常对照组:肝组织结构正常,肝细胞未见浊肿、变性及坏死等形态学改变。汇管区也无急、慢性炎性细胞浸润。(2)模型组:肝组织中可见肝细胞广泛肿胀,部分肝细胞脂肪变性,少量肝细胞气球样变;较多的肝细胞片状坏死,严重处呈桥状坏死的改变,坏死区可见较多的急、慢性炎性细胞浸润。未见出血,胆小管未见异常。(3)柞蚕雄蛾浓缩液大剂量组:肝组织中可见肝细胞轻度肿胀,个别肝细胞气球样变,肝组织中可见部分肝细胞点、灶状坏死,坏死区可见急、慢性炎性细胞浸润。但其坏死程度及范围明显轻于模型组、轻于阳性药组、小剂量组。病变积分下降与模型组比较,差异有显著性(P<0.01)。(4)柞蚕雄蛾浓缩液小剂量组:肝组织中可见肝细胞轻度肿胀,部分肝细胞气球样变,肝组织中可见部分肝细胞点状及小灶状坏死,坏死区可见急慢性炎性细胞浸润。但其坏死程度及范围明显轻于模型组,微重于大剂量组。病变积分下降与模型组比较,差异有显著性(P<0.01)。(5)阳性药组:病变程度轻于模型组、重于药物组,肝组织可见肝细胞轻度肿胀,部分肝细胞气球样变,肝组织中可见部分肝细胞点、灶状坏死,坏死区可见急慢性炎性细胞浸润。病变积分下降与模型组比较,差异有显著性(P<0.01),见表2。
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表2 肝脏病变积分
注:CCl4模型组与正常对照组动物比较差异有非常显著性 ˇ P<0.001;柞蚕雄蛾浓缩液大、小剂量组,阳性药组与CCl4模型组比较差异有显著性 ˇˇ P<0.01。
3 讨论
中医认为,肝病的发生多由肝气疏泄失常所致。肝为刚脏,喜调达而恶抑郁,主疏泄一身之气机,其功能的发挥有赖于肝血的濡养,而肝肾乙癸同源,精血互化,肝体有赖于肾精的涵养,故肝的疏泄功能与肾精的充盛有着密切关系。蚕蛾是国内新兴的一种动物类药材,具补肾益精之功,《名医别录》认为可“主益精气,强阴道,交接不倦,亦止精”。《日华子本草》则认为是“壮阳事,止泄精、尿血,暖水藏。治暴风金疮、冻疮、汤火疮,并灭疮瘢”。明朝李时珍则曰:“蚕蛾性淫,出茧即媾,至于枯槁乃已,故强阴益精用之”,临床用之,肾精得充,则肝体得养,有利于肝脏恢复疏泄之功;另一方面,肝病病程常迁延日久,邪气留连必伤及人体正气,古人云“五脏之病,穷必及肾”,蚕蛾补肾益精,顾护其虚,可收到扶正以祛邪之功 [1] 。
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现代药理研究表明,原蚕蛾富含20余种游离的氨基酸,这可能是蚕蛾保肝降酶作用的机制之一 [2] 。Okai Koji报道,从家蚕蛾成虫的体液中分离得一种肽类物质,可抑制人和家养动物血清T淋巴细胞中DNA的合成,故可用于治疗自身免疫性紊乱疾病。药理实验还证明雄蚕蛾的提取液具雄性激素样作用。
本研究发现柞蚕雄蛾浓缩液无论小剂量组还是大剂量组与模型组相比均有显著意义,表明该药对四氯化碳诱导的肝损伤有保护作用。病理组织学检查显示:大剂量组与小剂量组中肝细胞胞浆疏松,嗜酸性变数量程度较四氯化碳组为轻,肝细胞坏死的数量、程度及大小范围明显少于四氯化碳组,病变积分明显下降。肝组织的形态学改变实验组与阳性对照组比较差异无显著性。提示大剂量组及小剂量组对四氯化碳所致肝组织的损伤有一定的保护作用。综上所述,我们认为柞蚕雄蛾浓缩液可明显降低四氯化碳中毒小鼠血清中谷丙转氨酶水平,对小鼠肝细胞具有明显保护作用;柞蚕雄蛾浓缩液可能具有降低四氯化碳中毒小鼠血清中甘油三酯水平作用,可明显减轻肝组织脂肪样变性;柞蚕雄蛾浓缩液对四氯化碳中毒小鼠受损伤的肝 组织具有明显保护作用,可减少肝细胞变性、坏死的程度和范围。有望进一步开发成为一保肝药物应用于临床。
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参考文献
1 李锋,景树明,刘军凤,等.原蚕蛾药用研究概况.时珍国医国药,1996,5:54-56.
2 朴惠善,鞠岩,郑云花,等.雄蚕蛾精液中氨基酸成分的提取分离及鉴定.延边大学医学报,1997,3:350.
作者单位:256700山东省日照市卫生防疫站
山东省医学科学院基础研究所
(收稿日期:2003-12-23)
(编辑阳 光), 百拇医药(胡善宏)